天麻復(fù)方降壓膠囊中天麻有效成分提取工藝研究

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1、天麻復(fù)方降壓膠囊中天麻有效成分提取工藝研究陳陸馬超英李芬鄧月婷蔣合眾【摘要】目的考察影響天麻降血壓有效成分的提取因素。方法采用單因素比較法和正交設(shè)計(jì)法對(duì)天麻降壓有效成分的提取工藝進(jìn)行優(yōu)選。結(jié)果確定天麻的提取工藝為：用12，10，6倍量70%乙醇為提取溶劑，提取3次，前2次提取時(shí)間為1h，后1次為30min。結(jié)論該實(shí)驗(yàn)確定的天麻提取工藝方法合理，穩(wěn)定可行?！娟P(guān)鍵詞】天麻素多糖正交實(shí)驗(yàn)　　天麻為蘭科植物天麻GastrodiaelataBl.的干燥塊莖，傳統(tǒng)上作為止痛、鎮(zhèn)靜劑用于治療癲癇、眩暈、風(fēng)濕、高血壓病等疾病〔1〕?，F(xiàn)代研究表明，天

2、麻含有天麻素、香草醛、香草醇、琥珀酸、維生素、生物堿、多糖等物質(zhì)，其中天麻素為主要活性成分，有明顯降血壓作用；另外，天麻多糖能增加心肌營(yíng)養(yǎng)和腦血流量，提高細(xì)胞的免疫功能，有助于高血壓病的治療〔2〕。現(xiàn)以浸膏收率、天麻多糖含量和天麻素含量為主要指標(biāo)，考察提取條件，篩選出適合制備天麻復(fù)方降壓膠囊的天麻提取條件。1材料與儀器天麻藥材購(gòu)于四川峨眉仙山中藥科技發(fā)展有限公司；無水葡萄糖對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢驗(yàn)所提供，批號(hào)110833-200302；天麻素對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢驗(yàn)所提供，批號(hào)110807-200205；島津UV300紫外分

3、光光度計(jì)；島津LC-20AT高效液相色譜儀；乙腈為色譜純，濃硫酸、苯酚、乙醇為分析純。2方法與結(jié)果2.1天麻提取方式的考察稱取天麻粗顆粒25g3份，分別加入70%乙醇200ml，采用超聲、冷凝回流和70℃浸漬的方式提取1h，提取液紗布過濾后定容至1000ml，按照“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定浸膏收得率、天麻素含量和天麻多糖含量。結(jié)果見表1。結(jié)果表明，冷凝回流對(duì)天麻的提取效率最高，實(shí)驗(yàn)采用此方式。2.2提取工藝的正交實(shí)驗(yàn)研究2.2.1因素水平的選擇以對(duì)提取效果影響最顯著的因素：醇濃度（A）、溶劑量（B）、提取次數(shù)（C）、提取時(shí)間（D）4個(gè)因

4、素進(jìn)行考察，各取3個(gè)水平，進(jìn)行L9（34）正交實(shí)驗(yàn)，以浸膏收率、多糖含量、天麻素含量為指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)分，并結(jié)合生產(chǎn)成本、生產(chǎn)周期等因素綜合評(píng)價(jià)，優(yōu)化天麻提取工藝。實(shí)驗(yàn)以25g為研究量，因素水平設(shè)計(jì)見表2。表1提取方式考察表2因素水平2.2.2正交實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果取天麻粗粉按表2設(shè)定的正交實(shí)驗(yàn)方案冷凝回流提取。各組提取液紗布過濾后，均濃縮至100ml，再加水定容至1000ml，作為供試品。按照“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定浸膏收得率、天麻多糖含量和天麻素含量。結(jié)果見表3。由正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，影響提取效果的因素順序?yàn)椋篊（提取次數(shù)）＞A（醇濃度）

5、＞B（溶劑量）＞D（提取時(shí)間）。極差結(jié)果為A1＞A2＞A3,B1＞B2＞B3,C1＞C2＞C3,D1＞D3＞D2,直觀分析確定最佳提取工藝為：A1B1C1D1。鑒于D1和D3對(duì)實(shí)驗(yàn)影響程度相近，考慮實(shí)際生產(chǎn)成本，可將提取時(shí)間（D）由2h調(diào)整為1h；同時(shí)藥物第3次提取時(shí)藥物有效成分已大量滲出，可縮短提取時(shí)間，減少溶劑用量。綜合考慮，將工藝優(yōu)化為：用12，10，6倍量70%乙醇為提取溶劑，提取3次，前2次提取時(shí)間為1h，后1次為30min。2.2.3驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)按照“2.2.2”項(xiàng)確定的最佳工藝和優(yōu)化工藝進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。結(jié)果見表4。表3正交實(shí)

6、驗(yàn)結(jié)果綜合加權(quán)評(píng)分由公式:Y=Y1`+Y2`+Y3`=20×Y1/9.97+60×Y2/0.457+20×Y3/4.04計(jì)算而得。浸膏收率以平均值9.97%計(jì)為20分，高于9.97%仍計(jì)20分，天麻素含量以最高0.457%計(jì)為60分，多糖含量以最高4.04%計(jì)為20分表4驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，優(yōu)化工藝與最佳工藝結(jié)果相近，且優(yōu)化工藝的實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性良好。2.3相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定2.3.1浸膏收率的測(cè)定從已定容至1000ml的提取液中量取200ml（相當(dāng)于生藥5g），移入已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，70℃水浴濃縮至干，放入105℃烘箱干

7、燥6h，取出，置干燥器中冷卻30min后，取出，精密稱重，計(jì)算浸膏收率。2.3.2苯酚-硫酸法測(cè)定天麻多糖含量〔3〕對(duì)照品溶液的制備：精密稱取105℃干燥至恒重的無水葡萄糖對(duì)照品1.070g，置1000ml容量瓶中加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（1.07mg/ml）。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密量取對(duì)照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0,6.0ml，分別置50ml容量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密量取上述溶液各1ml，置錐形瓶中，分別加入蒸餾水2ml，6.25%苯酚溶液1ml，混勻，迅速加入硫酸5ml，搖勻，倒入具塞試管中

8、，置沸水浴加熱15min，取出，冷卻至室溫，以第1份為空白，在492nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以吸光度（A）為縱坐標(biāo)，葡萄糖對(duì)照品濃度（C）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為A=0.0062C+0.0039，相關(guān)系數(shù)為r=0.99