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《藥學(xué)畢業(yè)論文--hplc法測定維他參顆粒中維生素b2的含量》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、HPLC法測定維他參顆粒中維生素B2的含量作者：卜文奎，杜娟，段廣珍，張曉宇，張男【關(guān)鍵詞】HPLC；WeitashenGranules；VitaminB2維他參顆粒由人參、山楂及多種維生素組成，維生素B2為該方的有效成分之一，維生素B2是人體中許多重要輔酶的組分。測定維生素B2含量的方法有熒光分光光度法等，筆者采用HPLC法測定其含量，經(jīng)方法學(xué)考察，其精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性、加樣回收率均符合要求，為維他參顆粒的質(zhì)量控制提供了實驗依據(jù)，從而有效控制其質(zhì)量。1儀器與試藥維生素B2對照品（100369-
2、200301，供含量測定用）購于中國藥品生物制品檢定所，純度大于98.5%。維他參顆粒自制，Agilent1100series高效液相色譜儀（G1311AQuatPump，G1314AVWD，G1379ADEGASSER）；Agilent51100工作站；CP225D（sartorius）十萬分之一天平；AS3120A超聲波清洗器；U-3010紫外可見雙光束掃描分光光度計。乙腈為色譜純，水為重蒸餾水；其他試劑均為分析純。2實驗條件2.1色譜條件的選擇色譜柱：AgilentXDB-C18（5μm，15
3、0mm×4.6mm）流動相：乙腈-0.008mol/L己烷磺酸鈉-三乙胺-冰醋酸（12∶87∶0.25∶0.75）。檢測波長：246nm；柱溫：30℃；流量：1ml/min；理論塔板數(shù)按維生素B2對照品峰計算不少于5000。2.2測定波長的選擇取少量維生素B2的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，稀釋，置U-3010紫外可見雙光束掃描分光光度計下于200～400nm波長下掃描，在225nm、267nm處均有最大吸收，選擇267nm作為HPLC的測定波長。2.3流動相的選擇經(jīng)參閱文獻［1～4］，分別對甲醇-0.05mol/L
4、，KH2PO4磷酸溶液（14∶86，pH3.0）、甲醇-0.008mol/L己烷磺酸鈉-三乙胺-冰醋酸（107∶500∶0.12∶4.6）、乙腈-0.008mol/L己烷磺酸鈉-三乙胺-冰醋酸（12∶87∶0.25∶0.75）、乙腈-0.008mol/L己烷磺酸鈉-三乙胺-冰醋酸（5∶93.92∶0.21∶0.87）四種流動相系統(tǒng)進行篩選，結(jié)果維生素B2在乙腈-0.008mol/L己烷磺酸鈉-三乙胺-冰醋酸（12∶87∶0.25∶0.75）流動相條件下達(dá)到基線分離，峰形對稱，維生素B2的陰性對照液無
5、干擾，保留時間適宜。故確定維生素B2流動相為乙腈-0.0085mol/L己烷磺酸鈉-三乙胺-冰醋酸（12∶87∶0.25∶0.75）。色譜圖見圖1、2。2.4對照品溶液制備精密稱取維生素B2對照品15.76mg，置100ml量瓶中，以乙腈-水-冰醋酸（5∶94∶1）的混合溶液溫?zé)崛芙獠⑾♂屩量潭?，搖勻，精密吸取5ml，置100ml量瓶中，以乙腈-水-冰醋酸（5∶94∶1）的混合溶液稀釋至刻度，搖勻，制成每1ml含維生素B20.00788mg的溶液。2.5線性關(guān)系考察精密吸取維生素B2對照品溶液3、6
6、、9、12、15、18μl進樣，按上述色譜條件測定峰面積，以對照品進樣量x為橫坐標(biāo)、峰面積值y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：y=4038.2x-4.9208，r=0.9995，結(jié)果表明，維生素B2進樣量在0.0473～0.2837μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.6供試品溶液制備取本品裝量差異項下的內(nèi)容物，研細(xì)，取0.3g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，精密加入乙腈-水-冰醋酸（5∶94∶1）的混合溶液25ml，密塞，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用乙腈-水-冰醋酸（5∶94∶
7、1）的混合溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。3方法學(xué)考察3.1精密度試驗精密吸取供試品溶液105μl，重復(fù)進樣5次，測得峰面積，維生素B2積分值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差0.8%，表明儀器精密度良好。3.2穩(wěn)定性試驗精密吸取供試品溶液10μl，在0、2、4、6、8h各進樣10μl，測其峰面積，維生素B2積分值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.0%，說明樣品在8h內(nèi)穩(wěn)定。3.3重復(fù)性試驗精密稱取供試品5份，每份約0.3g，照供試品溶液制備方法制備，每次進樣10μl，測維生素B2含量，結(jié)果維生素B2含量相對標(biāo)準(zhǔn)偏差
8、為2.3%，表明方法重復(fù)性較好。3.4加樣回收率取已知維生素B2含量的樣品（0.60mg/g），研細(xì)，取5份樣品，每份0.15g，精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，精密加入維生素B2對照品溶液5ml（濃度為0.0169mg/ml），再精密加入乙腈-水-冰醋酸（5∶94∶1）的混合溶液20ml，按供試品溶液制備方法操作并進行含量測定，求得平均回收率分別為97.9%；相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.7%，見表1。表1維生素B2加樣回收率考察結(jié)果（略）注：平均回收率為97.9%，R
