資源描述：
《甘珀酸鈉對(duì)小鼠急性肝損傷保護(hù)作用的研究 》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、甘珀酸鈉對(duì)小鼠急性肝損傷保護(hù)作用的研究肖旭姚青王基云李曉兵陳虎張焱蘆曉紅高嶺【摘要】目的探討甘珀酸鈉(carbenoxolonesodium，CS)對(duì)四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用。方法昆明種小鼠60只隨機(jī)分為6組，各組分別每天給予不同劑量(160、80、40mg·kg-1)的CS和聯(lián)苯雙酯滴丸(200mg·kg-1)灌胃，對(duì)照組和模型組給予生理鹽水。7d后，除空白對(duì)照組外各組小鼠皮下注射0.1%CCl4制備急性肝損傷模型，16h后取血檢測(cè)血清ALT、AST活性;測(cè)定肝組織勻漿中MDA含量和S
2、OD、GSH的活性及觀察肝臟病理學(xué)變化。結(jié)果CS(160、80mg·kg-1)能降低CCl4所致急性肝損傷小鼠血清ALT、AST活性(P0.01)，降低肝臟MDA的含量(P0.01)，增強(qiáng)GSH和SOD活力(P0.01，P0.05)，并能明顯改善肝組織的病理學(xué)損傷。結(jié)論CS對(duì)CCl4所致小鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用。【關(guān)鍵詞】甘珀酸鈉;急性肝損傷;四氯化碳甘草是一味重要的傳統(tǒng)中藥，其主要成份甘草次酸及其衍生物具有廣泛抗炎、抗?jié)?、抗腫瘤、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力等藥理作用[1-4]。甘珀酸鈉(carbenoxoloneso
3、dium，CS)是甘草次酸的半琥珀酸酯二鈉鹽，其抗?jié)兊男Ч^好[5]，國內(nèi)外對(duì)其肝保護(hù)作用的研究報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察甘珀酸鈉對(duì)小鼠急性化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用，初步探討其可能機(jī)制?！ ?材料與方法 1.1材料 1.1.1動(dòng)物清潔級(jí)健康昆明種小鼠，雄性，體重(20±2)g，由寧夏醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(寧)2005-0001。 1.1.2藥品與試劑甘珀酸鈉(由寧夏大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院提供)，聯(lián)苯雙酯滴丸(biphenyldimethyldicarboxylate，BDD，浙江萬邦藥
4、業(yè)有限公司，批號(hào)0701003，臨用前用生理鹽水配至所需濃度)，CCl4(鄭州市化學(xué)試劑三廠，分析純，批號(hào)990923，用時(shí)以精制橄欖油配制成0.1%溶液)，多聚甲醛(天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號(hào)20080112)，谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷光甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒均購自南京建成生物工程研究所?！ ?.1.3主要儀器分析天平(METTLERTOLEDO瑞士)721分光光度計(jì)(北京瑞利分析儀器公司);高速低溫離心機(jī)(日立公司CF16RX);電熱恒溫水
5、浴箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司DK-S14)?！ ?.2方法 1.2.1CCl4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷模型的建立[6]將小鼠隨機(jī)分成6組，每組10只。分別為正常對(duì)照組、CCl4模型組、聯(lián)苯雙酯滴丸組(200mg·kg-1)、CS160、80、40mg·kg-1組。灌胃給藥，容量0.1mL·10g-1，模型組和空白組分別灌胃給予同體積生理鹽水，每天1次，連續(xù)給藥7d。于末次給藥2h后，皮下注射0.1%CCl4橄欖油溶液，10mL·kg-1，正常對(duì)照組皮下注射等容量的橄欖油溶液，禁食，不禁水。造模16h后，摘眼球取
6、血，3000r·min-1離心10min，取血清超低溫冰箱凍存，待測(cè)。采血后，快速斷頭處死，取肝右葉組織0.5g，在冰生理鹽水中漂洗，濾紙拭干，用生理鹽水制成10%肝組織勻漿，離心，取上清待測(cè)。同時(shí)取左葉相同部位肝臟，4%多聚甲醛固定做病理切片?！ ?.2.2測(cè)定指標(biāo)血清ALT、AST(化學(xué)比色法);肝組織勻漿SOD(羥胺法)、MDA(TBA法)和GSH(比色法)均按試劑盒要求測(cè)定;取肝左葉同一部位組織，常規(guī)石蠟包埋，切片，HE染色，光鏡下觀察肝組織的形態(tài)學(xué)變化?！ ?.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)均以(±s)表示，用SP
7、SS統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，樣本均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn)，P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?！ ?結(jié)果 2.1血清生化指標(biāo)檢測(cè) CS各劑量組均可使CCl4所致小鼠血清中升高的ALT、AST活性降低(P0.05)，呈劑量依賴性。結(jié)果見表1。表1CS對(duì)CCl4致急性肝損傷小鼠血清ALT、AST的影響 2.2肝組織勻漿生化指標(biāo)檢測(cè) 與正常對(duì)照組比較模型組小鼠肝組織中MDA含量明顯升高(P0.01)，SOD與GSH活性顯著下降(P0.01)，提示肝臟出現(xiàn)脂質(zhì)過氧化。而CS160、80mg·kg-1組可顯著抑制肝組織中MDA的
8、升高(P0.01)，并使SOD、GSH活性明顯升高(P0.05)，提示CS有較強(qiáng)的抗氧化及清除氧自由基的作用，結(jié)果見表2。 2.3肝臟組織病理學(xué)觀察 正常對(duì)照組小鼠肝臟外觀呈紅褐色，質(zhì)地軟而有彈性;光鏡下可觀察到肝小葉結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞排列整齊，大小均勻，分界清楚，無炎細(xì)胞浸潤(rùn)。模型組小鼠肝臟體積增大，質(zhì)脆，邊緣鈍而厚，表面呈黃褐色;鏡下見肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，肝細(xì)胞核消失，出現(xiàn)以中央靜脈為
