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1、腦神康膠囊對培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元缺氧復氧損傷的保護作用作者:李偉劉德山常萍林煒煒【摘要】目的觀察益氣補腎中藥腦神康膠囊對體外培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元缺氧復氧損傷的保護作用。方法原代培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元,隨機分為對照組,損傷組,腦神康膠囊高、中、低濃度組。對照組正常培養(yǎng),損傷組及腦神康膠囊各濃度組建立缺氧復氧損傷模型,其中腦神康膠囊各濃度組于復氧時換以不同濃度(5%、10%、20%)含藥血清的培養(yǎng)液,檢測各組細胞超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脫氫酶(LDH)活力及丙二醛(MDA)含量,測定細胞存活率及凋亡率,R
2、TPCR法檢測bcl2mRNA和baxmRNA的表達及兩者比值。結(jié)果與對照組比較,損傷組SOD活性及細胞存活率均明顯下降(P<0.01),MDA含量、LDH活力及細胞凋亡率均顯著升高(P<0.01),bcl2mRNA表達下降,baxmRNA表達升高,bcl2/bax降低(均P<0.01);腦神康膠囊各濃度組均較損傷組SOD活性及細胞存活率均升高(P<0.01),MDA含量及細胞凋亡率均降低(P<0.01),LDH活力及baxmRNA表達降低(P<0.01,
3、P<0.05),bcl2mRNA表達升高,bcl2/bax增加(均P<0.01),且呈明顯的劑量依賴性。結(jié)論腦神康膠囊對海馬神經(jīng)元缺氧復氧損傷有明顯的保護作用,其作用機制可能與其提高神經(jīng)元抗氧化能力、調(diào)節(jié)凋亡相關蛋白、減少凋亡密切相關?!娟P鍵詞】海馬神經(jīng)元;缺氧復氧損傷;腦神康膠囊;抗氧化;凋亡 【Abstract】ObjectiveToexploretheprotectiveeffectsofNaoshenkangtraditionalChinesemedicineechani
4、sms.MethodsTheprimarilyculturedneonaterathippocampalneuronslydividedintonormal,anoxiareoxygenationandlarge,middle,andsmalldosageofChineseMedicineprotectivegroups.TheChineseMedicineprotectivegroupsbeforereoxygenation.ThemetabolicrateofMTT,thecontento
5、fmalondialdehyde(MDA)andtheactivitiesofsuperoxidedismutase(SOD),lactatedehydrogenase(LDH)easuredbyassaykits.Theapoptosisratesofhippocampalneuronsetry.RTPCRRNAexpressionsofbcl2andbaxgenes.ResultsTheactivityofSOD,survivalrateofcell,theratioofbcl2/baxa
6、ndtheexpressionofbcl2mRNAinanoxiareoxygenationgroupRNAalgroup.TheactivityofSOD,thesurvivalrateofcell,theexpressionofbcl2mRNAandtheratioofbcl2/baxinallChineseMedicineprotectivegroupsRNAonstratedobviousdosageeffectrelationship.ConclusionsNaoshenkan
7、gcapsulehasaprotectiveeffectonhippocampalneuronsagainstanoxiareoxygenationinjury,anditsmechanismmaybethattheChineseMedicinecanincreasetheantioxidativeactivitiesofneurons,regulateassociatedprotEinofapoptosisandinhibittheapoptosis. 【Keypalneurons;Anoxi
8、areoxygenation;Naoshenkangcapsule;Oxygenfreeradical;Apoptosis 氧自由基學說在缺血性腦損傷的機制中占有重要地位,缺血時自由基大量堆積對腦組織產(chǎn)生毒性作用,造成組織器官的結(jié)構(gòu)損傷和功能障礙,導致神經(jīng)元壞死和凋亡〔1〕。有關凋亡機制及抗凋亡藥物的中西藥開發(fā),一直是國內(nèi)外研究的熱點課題。近年來,臨床及動物實驗采用益氣補腎中藥治療腦缺血性疾病,取得了較好的療效〔2,3〕,但體外實驗未見報道。本研究旨在體外建立胚胎大