腦神康膠囊對(duì)培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷的保護(hù)作用論文

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1、腦神康膠囊對(duì)培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷的保護(hù)作用論文李偉劉德山常萍林煒煒【摘要】目的觀察益氣補(bǔ)腎中藥腦神康膠囊對(duì)體外培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷的保護(hù)作用。方法原代培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元,隨機(jī)分為對(duì)照組，損傷組，腦神康膠囊高、中、低濃度組。對(duì)照組正常培養(yǎng)，損傷組及腦神康膠囊各濃度組建立缺氧復(fù)氧損傷模型，其中腦神康膠囊各濃度組于復(fù)氧時(shí)換以不同濃度(5%、10%、20%)含藥血清的培養(yǎng)液，檢測(cè)各組細(xì)胞超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脫氫酶(LDH)活力及丙二醛(MDA)含量，測(cè)定細(xì)胞存活率及凋亡率，RTPCR法檢測(cè)bcl2mRNA和baxmRNA的表達(dá)及兩者比值。結(jié)果與對(duì)照組比較.fr

2、eelRNA表達(dá)下降，baxmRNA表達(dá)升高，bcl2/bax降低(均P0.01);腦神康膠囊各濃度組均較損傷組SOD活性及細(xì)胞存活率均升高(P0.01)，MDA含量及細(xì)胞凋亡率均降低(P0.01)，LDH活力及baxmRNA表達(dá)降低(P0.01，P0.05),bcl2mRNA表達(dá)升高，bcl2/bax增加(均P0.01)，且呈明顯的劑量依賴(lài)性。結(jié)論腦神康膠囊對(duì)海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷有明顯的保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與其提高神經(jīng)元抗氧化能力、調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白、減少凋亡密切相關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】海馬神經(jīng)元;缺氧復(fù)氧損傷;腦神康膠囊;抗氧化;凋亡【Abstract】ObjectiveToex

3、ploretheprotectiveeffectsofNaoshenkangtraditionalChinesemedicineechanisms.MethodsTheprimarilyculturedneonaterathippocampalneuronslydividedintonormal,anoxiareoxygenationandlarge,middle,andsmalldosageofChineseMedicineprotectivegroups.TheChineseMedicineprotectivegroupsbeforereoxygenation.Themet

4、abolicrateofMTT,thecontentofmalondialdehyde(MDA)andtheactivitiesofsuperoxidedismutase(SOD),lactatedehydrogenase(LDH)easuredbyassaykits.Theapoptosisratesofhippocampalneuronsetry.RTPCRRNAexpressionsofbcl2andbaxgenes.ResultsTheactivityofSOD,survivalrateofcell,theratioofbcl2/baxandtheexpressionof

5、bcl2mRNAinanoxiareoxygenationgroupRNAalgroup.TheactivityofSOD,.freelRNAandtheratioofbcl2/baxinallChineseMedicineprotectivegroupsRNAonstratedobviousdosageeffectrelationship.ConclusionsNaoshenkangcapsulehasaprotectiveeffectonhippocampalneuronsagainstanoxiareoxygenationinjury,anditsmechanismm

6、aybethattheChineseMedicinecanincreasetheantioxidativeactivitiesofneurons,regulateassociatedproteinofapoptosisandinhibittheapoptosis.【Keypalneurons;Anoxiareoxygenation;Naoshenkangcapsule;Oxygenfreeradical;Apoptosis氧自由基學(xué)說(shuō)在缺血性腦損傷的機(jī)制中占有重要地位，缺血時(shí)自由基大量堆積對(duì)腦組織產(chǎn)生毒性作用，造成組織器官的結(jié)構(gòu)損傷和功能障礙，導(dǎo)致神經(jīng)元壞死和凋亡〔1〕。有關(guān)凋亡機(jī)制

7、及抗凋亡藥物的中西藥開(kāi)發(fā)，一直是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)課題。近年來(lái)，臨床及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用益氣補(bǔ)腎中藥治療腦缺血性疾病，取得了較好的療效〔2，3〕，但體外實(shí)驗(yàn)未見(jiàn)報(bào)道。本研究旨在體外建立胚胎大鼠海馬神經(jīng)元的缺氧復(fù)氧損傷模型，觀察益氣補(bǔ)腎中藥方——腦神康膠囊對(duì)其神經(jīng)元的抗氧化及抗凋亡作用。1材料與方法1.1動(dòng)物成年雄性TT均為Sigma公司產(chǎn)品，DMEM/F12培養(yǎng)基由Gibco公司生產(chǎn)，胎牛血清由杭州四季青生物工程公司生產(chǎn)，其余為國(guó)產(chǎn)分析純。超氧化物歧化