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1、第一篇微生物學(xué)基礎(chǔ)第3章 消毒與滅菌第一節(jié)物理消毒滅菌法第二節(jié)化學(xué)消毒滅菌法第三節(jié)影響消毒滅菌效果的因素7/6/20211無(wú)菌操作基本技術(shù)滅菌接種7/6/20212滅菌(sterilization):殺滅或去除物體上所有微生物的方法,包括芽胞。消毒(disinfection):指殺死物體上病原微生物的方法,芽胞或非病原微生物可能仍存活。用于消毒的藥品稱為消毒劑(disinfectant)。防腐(antisepsis):體外防止或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。細(xì)菌一般不死亡。用于防腐的藥品稱為防腐劑(antiseptics)。第一節(jié)常用術(shù)語(yǔ)和概念7/6/20213抑菌(bact
2、eriostasis):抑制細(xì)菌和真菌的生長(zhǎng)繁殖的方法。常用的抑菌劑(bacteriostat)是一些抗生素,能可逆性抑制細(xì)菌的繁殖,但不直接殺死細(xì)菌無(wú)菌(asepsis):指沒有活菌的意思。無(wú)菌操作(antiseptictechnique):指防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。清潔和凈化:減少微生物數(shù)量或活性的方法。7/6/20214第二節(jié)消毒滅菌方式一、物理消毒滅菌法熱力滅菌法干熱滅菌法 濕熱滅菌法光線與射線過(guò)濾除菌超聲波消毒法干燥與低溫抑菌法7/6/20215干熱滅菌法:使微生物脫水干燥和大分子變性死亡焚燒燒灼干烤:通常加溫160~180℃保持2h紅外線滅
3、菌7/6/20216濕熱滅菌法在同一溫度下濕熱的殺菌效果比干熱好,因?yàn)椋簻責(zé)釡缇鷷r(shí)菌體蛋白質(zhì)易變性;濕熱穿透力大;濕熱蒸汽有潛熱存在。7/6/20217巴氏消毒法(pasteurization)61.1~62.8℃30min71.7℃15~30秒殺死液體中的病原菌或某些特定微生物。消毒牛奶、酒類等食品。7/6/20218煮沸消毒法煮沸100℃經(jīng)5min可殺死一切細(xì)菌的繁殖體,一般消毒以煮沸10min為宜。芽胞需1~2小時(shí)才能殺死。用于一般外科器械、膠管和注射器、飲水和食具的消毒。7/6/20219流通蒸汽滅菌法細(xì)菌繁殖體需15-30min才能殺死,但芽胞不會(huì)被全部殺死。
4、間歇滅菌法本法是利用反復(fù)多次的流通蒸汽滅菌,以達(dá)到滅菌的目的。只適用于不耐熱(100℃以內(nèi))的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如某些培養(yǎng)基的滅菌。7/6/202110高壓蒸汽法Autoclaving壓力:1.05kg/cm2溫度:121.3℃時(shí)間:15~30min效果殺死一切微生物,包括芽胞耐高熱、不怕潮濕的物品7/6/202111燃料加熱壓力鍋式高壓滅菌器7/6/202112光線與射線日光和紫外線殺菌波長(zhǎng):240~280nm,最適:260nm殺菌機(jī)制:破壞核酸結(jié)構(gòu)用于物體表面和空氣消毒電離射線和微波γ射線、高能量的電子束(陰極射線)不升高溫度且穿透力強(qiáng)適于忌熱物品的滅菌或消毒7/6/2021
5、13濾過(guò)除菌(filter)常用不能加熱滅菌的血清或液體不能除去病毒、支原體和L型細(xì)菌常用的除菌濾器蔡氏(Seitz)濾器玻璃濾器薄膜濾器7/6/202114超聲波消毒法:殺菌不徹底,主要用于破碎細(xì)菌,提取菌體組分。腌制干燥與低溫抑菌法:主要用于保存食品、保存菌種。真空干燥法7/6/202115二、化學(xué)消毒滅菌法類別作用機(jī)制常用種類酚類蛋白變性,細(xì)胞膜損傷石炭酸醇類蛋白變性乙醇氧化劑氧化、蛋白沉淀高錳酸鉀、過(guò)氧乙酸、碘酒重金屬鹽氧化、蛋白酶變性紅汞、硫柳汞表面活性劑蛋白變性,細(xì)胞膜損傷新潔而滅染料干擾氧化、抑制繁殖龍膽紫酸堿類破壞膜、壁,蛋白凝固醋酸、生石灰烷化劑蛋白質(zhì)
6、、核酸烷基化環(huán)氧乙烷7/6/202116消毒劑的作用機(jī)理使細(xì)胞膜通透性受損;使菌體蛋白變性和凝固,失去生物活性,導(dǎo)致細(xì)菌死亡;破壞或改變蛋白質(zhì)與核酸功能基團(tuán),使菌體酶蛋白失去酶的活性。7/6/202117二、化學(xué)消毒滅菌法(一)高效消毒劑(high-leveldisinfectants)1.含氯消毒劑;2.過(guò)氧化物消毒劑;3.醛類消毒劑;4.環(huán)氧乙烷(二)中效消毒劑(intermediate-leveldisinfectants)1.含碘消毒劑;2.醇類消毒劑(三)低效消毒劑(low-leveldisinfectants)1.季銨鹽類;2.氯已定;3.高錳酸鉀7/6/2
7、02118固體二氧化氯消毒劑7/6/202119第三節(jié)消毒滅菌的運(yùn)用(一)高危器械物品用時(shí)需進(jìn)入無(wú)菌組織的物品。所有這些物品都應(yīng)該滅菌。(二)中危器械物品用時(shí)不進(jìn)入無(wú)菌組織但接觸黏膜的器械。采用消毒即可。(三)低危器械物品只接觸未損傷皮膚但不進(jìn)入無(wú)菌組織和不接觸黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。(四)快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械一、醫(yī)療器械物品的消毒滅菌7/6/202120(二)室內(nèi)空氣消毒滅菌1.物理消毒法①紫外線照射(1.5W/m3,1h)最常用;②濾過(guò)除菌:空氣通過(guò)孔徑小于0.2μm的高效過(guò)濾裝置以除去細(xì)菌和帶菌塵埃。2.化學(xué)消毒法包括化學(xué)