《紅細(xì)胞檢驗(yàn)》ppt課件

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1、1第二章紅細(xì)胞手工檢驗(yàn)--紅細(xì)胞檢驗(yàn)主講人：丁肖華醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院紅細(xì)胞檢查紅細(xì)胞計(jì)數(shù)血紅蛋白測(cè)定血細(xì)胞比容紅細(xì)胞平均指數(shù)計(jì)算網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞沉降率測(cè)定3紅細(xì)胞檢查紅細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程造血干細(xì)胞→早幼紅細(xì)胞→中幼紅細(xì)胞→晚幼紅細(xì)胞→網(wǎng)織紅細(xì)胞→成熟紅細(xì)胞上一頁(yè)下一頁(yè)返回EPO紅系祖細(xì)胞→原始紅細(xì)胞成熟紅細(xì)胞120天上一頁(yè)下一頁(yè)返回鐵→鐵代謝原卟啉→膽色素代謝珠蛋白→蛋白質(zhì)代謝衰老紅細(xì)胞紅細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程6檢測(cè)方法1.手工顯微鏡法：2.血液分析儀法：一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)手工顯微鏡法7定義：用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)后，滴入改良

2、Neubauer計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算即可求得每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。8改良牛鮑計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)板910紅細(xì)胞稀釋液組成與作用稀釋液組成作用備注Hayem液NaCl、Na2SO4、HgCl2調(diào)節(jié)滲透壓、增加紅細(xì)胞懸浮性和防腐作用高球蛋白血癥時(shí)，蛋白質(zhì)沉淀致紅細(xì)胞凝集枸櫞酸鈉稀釋液NaCl、枸櫞酸鈉、甲醛NaCl和枸櫞酸鈉調(diào)節(jié)滲透壓，枸櫞酸鈉具抗凝，甲醛防腐生理鹽水生理鹽水急診時(shí)用1%甲醛生理鹽水甲醛、生理鹽水急診時(shí)用11【操作】1.準(zhǔn)備計(jì)數(shù)板2.加稀釋液：2ml3.加血：10μl混勻4.充池5.計(jì)數(shù)6.計(jì)算：紅細(xì)胞數(shù)

3、=N/5*25*10*200*106/L121.分析前質(zhì)量控制患者準(zhǔn)備、標(biāo)本采集、存儲(chǔ)溫度和時(shí)間2.分析中質(zhì)量控制計(jì)數(shù)誤差（技術(shù)誤差和固有誤差）、白細(xì)胞影響3.分析后質(zhì)量控制結(jié)合臨床資料質(zhì)量控制131.手工顯微鏡法（1）血液分析儀的校正（2）白細(xì)胞減少時(shí)的對(duì)照核實(shí)。（3）血小板計(jì)數(shù)受小紅細(xì)胞干擾時(shí)的校正2．血液分析儀法方法精確，且操作簡(jiǎn)便、快速，已廣泛應(yīng)用。方法學(xué)評(píng)價(jià)14成年：男性（4～5.5）×1012/L女性（3.5～5.0）×1012/L新生兒：（6.0～7.0）×1012/L參考值151．生理性變化(1)年齡與性別的差異(2)精

4、神因素(3)劇烈體力運(yùn)動(dòng)和勞動(dòng)(4)氣壓降低(5)妊娠中、后期臨床意義162．病理性變化(2)紅細(xì)胞增多1)原發(fā)性紅細(xì)胞增多2)繼發(fā)性紅細(xì)胞增多3)相對(duì)性紅細(xì)胞增多(1)紅細(xì)胞和血紅蛋白量減少1）紅細(xì)胞生成障礙2）造血原料缺乏3）利用障礙紅細(xì)胞4）破壞過(guò)多和失血臨床意義17醫(yī)學(xué)決定水平①高于6.8×l012/L，應(yīng)采取相應(yīng)的治療措施。②低于3.5×1012/L為診斷貧血的界限，應(yīng)繼續(xù)尋找原因。③低于1.5×l012／L應(yīng)考慮輸血指該項(xiàng)目結(jié)果如高于或低于某一個(gè)值時(shí)就應(yīng)該采取一定的措施，為患者處理起提供依據(jù)的作用。臨床意義血紅蛋白(血色素，

5、Hb或HGB)組成二、血紅蛋白測(cè)定珠蛋白：4條，種屬特異性亞鐵血紅素：4個(gè)，無(wú)種屬特異性19每個(gè)Hb分子由2條α類肽鏈和2條β類肽鏈組成，每條珠蛋白肽鏈含有1個(gè)亞鐵血紅素。在人體不同生長(zhǎng)時(shí)期，Hb種類與比例不同：21定義：血紅蛋白測(cè)定是測(cè)定外周血液中各種血紅蛋白的總濃度，用g/L表示血紅蛋白測(cè)定221．氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)測(cè)定法2．其他測(cè)定法十二烷基硫酸鈉血紅蛋白（SDS-Hb）法疊氮高鐵血紅蛋白(HiN3)法堿羥血紅蛋白法沙利(Sahli)酸化血紅蛋白法溴代十六烷基三甲胺血紅蛋白測(cè)定法（CTAB）等檢測(cè)原理23HiCN轉(zhuǎn)化液：

6、即文齊氏液540nm處有一吸收波峰，用分光光度計(jì)測(cè)定換算成每升血液中的血紅蛋白濃度，或制備標(biāo)準(zhǔn)曲線供查閱。CN-血紅蛋白高鐵血紅蛋白氰化高鐵血紅蛋白高鐵氰化鉀540nm血紅蛋白濃度吸光度24血紅蛋白濃度計(jì)算公式：Hb(g/L)=A?540HiCN/44×64458/1000×251=A×367.7A?540HiCN：測(cè)定管吸光度44：毫摩爾消光系數(shù)64458/1000：1mmol/LHb溶液中所含Hb克數(shù)251為稀釋倍數(shù)25血紅蛋白SDS-HbSDS540nm血紅蛋白濃度吸光度十二烷基硫酸鈉血紅蛋白（SDS-Hb）法方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)HiCN

7、操作簡(jiǎn)便、快速(5min)，結(jié)果穩(wěn)定可靠，試劑容易保存，便于質(zhì)控，為參考方法①KCN有劇毒②高白細(xì)胞和高球蛋白可致渾濁。③HbCO轉(zhuǎn)化慢SDS-Hb不用劇毒試劑、無(wú)公害，操作簡(jiǎn)便，呈色穩(wěn)定，準(zhǔn)確度和精度高①SDS-Hb消光系數(shù)未確定②SDS質(zhì)量差異性大。③SDS溶血活力大，不適于同時(shí)進(jìn)行自動(dòng)化分析AHD575同HiCN法，不用劇毒試劑不便于自動(dòng)檢測(cè)、氯化血紅素純度達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn)HiN3準(zhǔn)確度和精密度高，試劑毒性低HbCO轉(zhuǎn)化慢CTAB溶血活力強(qiáng)，但不破壞白細(xì)胞，適合自動(dòng)化分析精密度和準(zhǔn)確性低2627分析前質(zhì)量控制：同紅細(xì)胞計(jì)數(shù)分析中質(zhì)量控制

8、技術(shù)誤差：稀釋倍數(shù)、分光光度計(jì)波長(zhǎng)、光縫、比色杯光徑需校正HiCN轉(zhuǎn)化液：棕色玻璃瓶HiCN參考液：關(guān)鍵質(zhì)控物：室內(nèi)質(zhì)控分析后質(zhì)量控制：同紅細(xì)胞計(jì)數(shù)質(zhì)量控制28①成年：男性：120～160g／L；女性：ll