《細(xì)菌培養(yǎng)技術(shù)》ppt課件

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1、細(xì)菌培養(yǎng)技術(shù)南華大學(xué)預(yù)防醫(yī)學(xué)與放射衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心教學(xué)對象：高等醫(yī)學(xué)院校衛(wèi)生檢驗(yàn)專業(yè)學(xué)生實(shí)驗(yàn)課時(shí)：4學(xué)時(shí)課程類型：專業(yè)實(shí)驗(yàn)課課程要求：必修每組人數(shù)：2人實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵笳莆占?xì)菌的培養(yǎng)方法。掌握平板劃線法、斜面、液體和半固體培養(yǎng)基等各種接種方法。熟悉接種工具、接種環(huán)境要求和無菌操作要領(lǐng)。學(xué)會(huì)觀察平板、斜面、液體、半固體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容常用細(xì)菌培養(yǎng)方法。細(xì)菌的分離培養(yǎng)和接種技術(shù)。細(xì)菌生長現(xiàn)象觀察。一、常用細(xì)菌培養(yǎng)方法需氧培養(yǎng)法（一般培養(yǎng)）適用于需氧菌和兼性厭氧菌培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度：37℃（采用恒溫培養(yǎng)箱）。培養(yǎng)時(shí)間：1

2、8～24h。二氧化碳培養(yǎng)法適用于奈瑟菌屬和布魯菌屬等苛養(yǎng)菌培養(yǎng)?？刹捎脿T缸法、二氧化碳培養(yǎng)箱。一、常用細(xì)菌培養(yǎng)方法微需氧培養(yǎng)法適用于空腸彎曲菌、幽門螺桿菌等微需氧菌培養(yǎng)?？刹捎贸闅鈸Q氣法。厭氧培養(yǎng)法適用于專性厭氧菌培養(yǎng)。厭氧培養(yǎng)箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養(yǎng)法、硫乙醇酸鹽法等。二、細(xì)菌的分離培養(yǎng)和接種技術(shù)(一)接種工具接種針和接種環(huán)：由三部分組組成，即環(huán)（針）、金屬柄和絕緣柄。接種前后都要過火滅菌。接種針用于穿刺接種細(xì)菌，接種環(huán)用于固體、液體培養(yǎng)基的細(xì)菌接種。L型玻璃棒：用于瓊脂平板涂布接種細(xì)菌。（二）接種環(huán)境操作需在接種罩、

3、超凈工作臺(tái)或無菌室內(nèi)進(jìn)行。（三）細(xì)菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標(biāo)本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染標(biāo)本殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染環(huán)境細(xì)菌接種的基本程序取菌種試管和待接種的斜面試管滅菌接種環(huán)沾取標(biāo)本接種接種后滅菌接種環(huán)（四）接種方法1.平板劃線接種法：目的：使混合的細(xì)菌呈單個(gè)分散生長，形成單個(gè)菌落，以便獲得純菌。方法：分區(qū)劃線法：適用于含菌量較多的標(biāo)本。連續(xù)劃線法：適用于含菌量較少的標(biāo)本。分區(qū)劃線法第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第三區(qū)劃線滅菌接種環(huán)連續(xù)劃線法（四）接種方法2.液體培養(yǎng)基接種法可觀察細(xì)

4、菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象或用作生化反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。（四）接種方法3.半固體培養(yǎng)基接種法：穿刺接種法，用于保存菌種或觀察細(xì)菌動(dòng)力。11（四）接種方法4.斜面接種法：用于鑒定和保存菌種。（四）接種方法5.涂布接種法：用于測定標(biāo)本中活菌數(shù)和藥敏實(shí)驗(yàn)細(xì)菌接種。（四）接種方法6.傾注培養(yǎng)法：用于細(xì)菌計(jì)數(shù)。將上述已接種細(xì)菌的培養(yǎng)基置37℃恒溫培養(yǎng)箱中孵育18～24h，觀察細(xì)菌的生長現(xiàn)象。三、細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象1、細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象菌落定義：指單個(gè)細(xì)菌在平板培養(yǎng)基上生長繁殖，形成單一肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。菌落特征：大小、形狀、邊緣、

5、顏色、表面、透明度、濕潤度、黏度、溶血性。菌苔：指多個(gè)菌落融合在一起形成的細(xì)菌堆積物。菌落與菌苔菌落菌苔2、細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象混濁沉淀：多見于鏈狀排列的細(xì)菌。菌膜：多見于厭氧菌。細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象菌膜菌沉淀均勻渾濁對照3、細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有鞭毛細(xì)菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線并向外擴(kuò)散生長，穿刺線邊緣模糊。無鞭毛細(xì)菌：只沿穿刺線生長，穿刺線邊緣清晰。細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有動(dòng)力現(xiàn)象無動(dòng)力現(xiàn)象