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《il-10基因多態(tài)性與hbv感染易感性研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、IL-10基因多態(tài)性與HBV感染易感性研宄高建梅1劉平興2鄒云蓮1董虹1嚴新民1(通訊作者)(1云南省第一人民醫(yī)院臨床基礎醫(yī)學研究所/昆明理工大學附屬醫(yī)院云南昆明650032)(2勐臘縣疾病預防控制中心云南景洪666300)【摘要】目的探討IL-10啟動子「S1800871和rsl800896位點多態(tài)性與HBV感染的相關性。方法運用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜技術，對200例健康對照和400例HBV感染患者的IL-10啟動子「S1800871和rsl800896位點進行基因分型。結果rsl800871位點基
2、因型分布頻率在HBV感染組與正常對照組間顯著不同(χ2=9.625,P=0.008),TT基因型有增高的趨勢。以非條件logistic回歸模型校正混雜因素后，在T隱性模式下(TT/CC+TC),兩組間仍有統(tǒng)計學差異(P=0.034；OR為1.467;95%CI為1.028-2.094);而rsl800896位點基因型和等位基因分布頻率在兩組間差別無統(tǒng)計學意義。結論IL-10基因多態(tài)性與HBV易感性相關，rsl800871TT基因型可能是HBV感染的危險因素?！娟P鍵詞】IL-10基因多態(tài)性肝炎病毒乙型【中
3、圖分類號】R39【文獻標識碼】A【文章編號】2095-1752(2013)11-0084-02研究證實，宿主的遺傳異質性特別是與免疫應答相關的基因的多態(tài)性可導致不同人群或個體間免疫功能的差異，從而與HBV易感性密切關系［1-2］。細胞介素10(interleukin-10,IL-10)是由Th2細胞產生的一種具有多效性的免疫調節(jié)性細胞因子，其啟動子區(qū)域「S1800871和rsl800896位點的多態(tài)性可影響IL-10基因的轉錄活性和血漿IL-10水平［3-4］,與乙型肝炎病毒的感染和和預后密切相關。木文以運用基
4、質輔助激光解析電離飛行時間質譜技術(Matrix-AssistedLaserDesorption/IonizationTimeofFlightMassSpectrometry,MALDI-TOF-MS)分析了IL-10啟動子多態(tài)性與HBV感染的相關性，現報道如下：對象與方法1.研究對象：在知情同意的原則下，收集云南西雙版納州醫(yī)院門診及住院患者血樣600份，其中正常對照200例，HBV感染患者400人，診斷標準符合《病毒性肝炎防治方案》。所有觀察人員均靜脈抽取EDTA-K2抗凝靜脈血3ml,充分混勻后-20°C保
5、存?zhèn)溆谩?.ll-10rsl800871和「S1800896位點多態(tài)性分析：全血標本用全血基因組提取試劑盒(百泰克DP1801)提取基因組DNA作為模板，采用MALDI-TOF-MS技術對IL-10啟動子rsl800871和rsl800896位點進行基因分型。首先進行PCR擴增，其中引物濃度為0.1μmol/L,HotStarTaqlU,dNTP濃度為0.5μmol/L,MgCI2濃度為1.625mmol/L,DNA模板10ng。PCR反應的條件為94°C15分鐘；94°C20秒，56°C30秒，7
6、2°Cl分鐘，45個循環(huán)；72°C延伸3分鐘。隨后將擴增后的產物進行SAP純化后進行延伸反應，其中伸反應引物0.84mol/L,iPlex酶1U,反應條件為94°C30秒；94°C5秒，52°C5秒，40個循環(huán)；80°C5秒，5個循環(huán)；72°C延伸3min。反應結束后每個延伸反應產物經樹脂純化后于芯片上點樣，MassARRAYAnalyzer質譜檢測相應位點的基因型。PCR引物和延伸引物見表1。表1PCR引物及延伸引物序列3.統(tǒng)計學分析：采用SPSS11.7統(tǒng)計軟件分析，直接計算法計算基因型和等位基因頻率，組間
7、頻率比較采用x2檢驗，非條件logistic冋歸模型計算相對風險度的比值比(OR)及95%可信區(qū)間(Cl)，P<0.05視為有統(tǒng)計學意義。結果1.飛行吋間質譜檢測結果：經x2檢驗所調查的人群基因型頻率分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)，樣本具有代表性。rsl800871三種基因型均有檢出，而rsl800896位點只有AA和AG基因型，結果見圖1。圖1IL-10啟動子rsl800871和rsl800896位點飛行時間質譜圖注：a?e分別為：rsl800871CC、rsl8008
8、71TT、rsl800871CT、rsl800896AA和rsl800896GA2.IL-10啟動子rsl800871和rsl800871位點多態(tài)性與HBV感染相關性分析：HBV感染組rsl800871位點基因型分布頻率與正常對照組顯著不同(χ2=9.625,P=0.008),TT基因型冇增高的趨勢。而rsl800896位點基因型和等位基因分布頻率在兩組間差別無統(tǒng)計學意義，結果
