dna分子標(biāo)記在山茶屬植物中的應(yīng)用

《dna分子標(biāo)記在山茶屬植物中的應(yīng)用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、DNA分子標(biāo)記在山茶屬植物中的應(yīng)用山茶屬（Camellia）是山茶科（Theaceae）中種類較多、系統(tǒng)較為原始的屬，為雌雄同株、蟲媒傳粉的常綠灌木或小喬木［1］,是眾多栽培茶花的野生祖先［2］。因其植株形態(tài)優(yōu)美、花姿綽約、花色鮮艷繽紛、葉色濃綠光亮而受到世界園藝界的青睞，再宥重要的園林應(yīng)用價值［3］。山茶是溫暖地區(qū)重要的觀賞樹種和經(jīng)濟作物。我國是山茶屬植物的分布中心，冇著極其豐富的茶花種質(zhì)資源。早在1000多年前，屮岡和日木就把一些山荼屬原種作為觀賞植物進行栽培，并從野生種屮選出了許多著名的栽培品

2、種。山茶屬約20組280種，分布于東亞北冋歸線W側(cè)，我W現(xiàn)有238種，以云南、廣東、廣西、四川最多［4］。現(xiàn)代人工栽培范圍已經(jīng)遍及我岡長江流域以南，北達膠東半島，在口木、北美、西歐、大洋洲（澳大利亞、新西蘭）等地區(qū)也廣泛栽培。山茶屬植物具冇很重要的經(jīng)濟利用價值，其種子含汕率高，是重要的食用油和工業(yè)用油；茶葉是世界流行的飲料，是國際貿(mào)易的重要商品；有少數(shù)種類還可供藥用；大多數(shù)種類樹形美觀，花朵鮮艷，極具觀賞性,是很好的園林綠化樹種【7】。分子標(biāo)記是繼形態(tài)學(xué)標(biāo)記、細胞學(xué)標(biāo)記以及生物化學(xué)標(biāo)記之G發(fā)展起來的

3、直接反應(yīng)種質(zhì)資源遺傳物質(zhì)水平多態(tài)性的一種遺傳標(biāo)記，具冇標(biāo)記數(shù)量多、基兇組變異豐富、檢測手段方便快捷、口標(biāo)基岡的表達不受生物的生K:發(fā)育階段及外界環(huán)境所影響等特點，是種質(zhì)資源系統(tǒng)鑒定與育種研究的最高效的手段之一。因此，DNA分子標(biāo)記技術(shù)在動植物研究屮已得到廣泛的應(yīng)用。不同類型的DNA分子標(biāo)記機技術(shù)也廣泛的應(yīng)用于III茶的遺傳育種研究中，在III茶的進化和系統(tǒng)發(fā)育、種質(zhì)資源遺傳多樣性與親緣關(guān)系鑒定、品種指紋圖譜和遺傳圖譜的構(gòu)建、0標(biāo)性狀基因定位與克隆等研究領(lǐng)域已廣泛應(yīng)用。木文綜述了主要幾種用于山茶屬植物

4、研究的DNA分子標(biāo)記技術(shù)的基本特點、原理及其應(yīng)用現(xiàn)狀。1應(yīng)用于山茶屬植物的DNA分子標(biāo)記類型1.1RAPDRAPDKAPD（隨機擴增多態(tài)性）標(biāo)記，是一種以PCR為基礎(chǔ)來測定未知物種序列基組多態(tài)性的顯性分子標(biāo)記技術(shù)。該標(biāo)記是以基因組DNA為模板，一個隨機核苷酸序列（一?般為9?10個堿基對）為引物，進行PCR擴增，擴增產(chǎn)物的多態(tài)性反應(yīng)其檢測物種基因組的多態(tài)性。擴增所產(chǎn)生的條帶數(shù)主要取決于物種基因組的復(fù)雜性。KAPD標(biāo)記具冇可隨機合成引物、無需預(yù)知被測物種的基因組的核苷酸序列、方法簡便易行、所需模板DN

5、A量少、成本低等優(yōu)點。該技術(shù)已廣泛的應(yīng)用于生物的系譜分析、系統(tǒng)進化關(guān)系、品種鑒定等的研究上。1.2AFLPAFLP（擴增片段L<:度多態(tài)性）標(biāo)記，是一種以PCR技術(shù)為基礎(chǔ)來擴增物種基因組DNA限制性片段的一種分子標(biāo)記技術(shù)。該技術(shù)是通過引物誘導(dǎo)對基因組DNA進行選擇性擴增來測定物種多態(tài)性。該技術(shù)結(jié)合了RAPD和RFLP標(biāo)記技術(shù)的優(yōu)點，具冇所需DNA模板量少、重復(fù)性好、多態(tài)性好及分辨率高等優(yōu)點。0前已廣泛的應(yīng)用于動植物的遺傳育種、基岡組遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建、基因表達與調(diào)控、物種的進化與分類中。1.3SSR

6、SSR（簡單重復(fù)序列、微衛(wèi)星DNA）標(biāo)記，是以一種特異引物PCR為基礎(chǔ)的顯性DNA分子標(biāo)記技術(shù)。真核生物的基因組中微:T4星含量非常豐富，且隨機分布在核DNA屮，因此，通過對種間或種內(nèi)微衛(wèi)星變異數(shù)□來測定其多態(tài)性，具有多態(tài)性高、數(shù)量豐富、信息量高、特異性強等優(yōu)點，目前已廣泛的應(yīng)用于指紋圖譜和遺傳圖譜的構(gòu)建、目標(biāo)基因定位等研究中。1.4TSSRISSR（簡申序列重復(fù)間區(qū)）標(biāo)記，是以一種錨定引物（SSR引物添加堿基）PCR為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記。該技術(shù)是利用錨定引物與特定位點互補的重復(fù)序列問的DNA片段進行P

7、CR擴增，其產(chǎn)物的差異性表現(xiàn)為物種間（

8、々）的多態(tài)性，具有引物通用、多態(tài)性高、信息量大、檢測方便等優(yōu)點。目前該技術(shù)己廣泛應(yīng)用于植物遺傳圖譜和指紋圖譜的構(gòu)建、遺傳多樣性及親緣關(guān)系的研究、物種進化及系統(tǒng)分類研究、品種鑒定等研究屮。1.5ESTEST（表達序列標(biāo)簽）標(biāo)記，是指不同組織來源的互補DNA（cDNA）序列。其表達序列標(biāo)簽代表物種在特定生長發(fā)育時期和環(huán)境卜特定組織基因所表達的序列，該技術(shù)已被廣泛的應(yīng)用于基因組物理圖譜的構(gòu)建、新基因的探尋以及基因識別等研究領(lǐng)域屮。1.2SRAPSKAP（相關(guān)序列擴

9、增多態(tài)性）標(biāo)記，是一種結(jié)合了RAPD、AFLP、RFLP等分子標(biāo)記優(yōu)點井克服其缺點的PCR標(biāo)記系統(tǒng)的顯性新型標(biāo)記，是通過獨特的雙引物（17bp上游引物和18bp下游引物）設(shè)計對啟動子或⑷含子區(qū)域進行特異擴増，其引物具有通用性。該標(biāo)記是利用不同種質(zhì)資源的扁動子、內(nèi)含子與間隔區(qū)長度的不同而致使其種問和種內(nèi)表現(xiàn)岀明顯的多樣性。SRAP分子標(biāo)記具有多態(tài)性商、重復(fù)性好、笏操作、快捷方便、成本低、在基因組屮分布均勻、易對特定序列進行測序與相關(guān)基因的克隆等諸多優(yōu)點。目前已成功應(yīng)用丁