方格牌破壁靈芝孢子粉標(biāo)準(zhǔn)

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1、國家食品藥品監(jiān)督管理局保健食品產(chǎn)品技術(shù)要求方格牌破壁靈芝孢子粉fanggepaipobilingzhibaozifen【配方】靈芝孢子粉【生產(chǎn)工藝】本品經(jīng)干燥、粉碎、分裝等主要工藝加工制成?！靖泄僖蟆繎?yīng)符合表1的規(guī)定。表1感官要求項目指標(biāo)色澤棕色至棕褐色滋味、氣味具本品特有的滋味、氣味，無異味性狀均勻粉末狀，無結(jié)塊雜質(zhì)無肉眼可見外來雜質(zhì)【鑒別】無【理化指標(biāo)】應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2理化指標(biāo)項目指標(biāo)檢測方法蛋白質(zhì)，g/100g彡12.0GB5009.5破壁率，％彡951破比率的測定水分，％彡9.0GB5009.3灰分，％彡2.0

2、GB5009.4鉛（以Pb計），mg/kg彡0.5GB5009.12砷（以As計），mg/kg彡0.3GB/T5009.11親（以Hg計），mg/kg彡0.3GB/T5009.17/、/、/、，mg/kg彡0.2GB/T5009.19滴滴涕，mg/kg彡0.2GB/T5009.191破壁率的測定1.1原理：單位質(zhì)量樣品未破壁孢子數(shù)與同單位質(zhì)量標(biāo)樣（未經(jīng)破壁的孢子）中的孢子數(shù)之比為樣品中孢子的未破壁率。破壁率=1-未破壁率。未破壁率孢子表現(xiàn)為完整的卵形且外壁光滑。1.2標(biāo)樣配制與計數(shù)：精密稱取0.lg標(biāo)樣，稀釋至100mL。充分

3、攪拌均勻，立即取少許懸浮液均勻涂抹在血球計數(shù)板框內(nèi)，蓋上玻片。在顯微鏡下（600倍以上）觀察，計數(shù)，一般每一檢樣觀察不少于50個視野。1.3樣品測定：同上1.4結(jié)果計算W<）XnX=（1X100WXno式中：X—樣品中孢子破壁率，％;W。一標(biāo)樣的質(zhì)量；W一樣品的質(zhì)量重量；n0—標(biāo)樣50個（或m個）視野屮的孢子總數(shù)；n—標(biāo)樣50個（或⑺個）視野中的完整未破壁孢子總數(shù)。附：在無未破壁孢子予以對照的情況下，可用下面方法檢測破壁孢子計算其破壁率。按1.2項操作步驟，每檢測樣分別計破壁和未破壁孢子數(shù)。觀察視野數(shù)根據(jù)破壁情況自行調(diào)整，一般

4、不少于10個視野。在視野下的破壁孢子表現(xiàn)為不呈完整卵形的大小不等形狀各異的碎片，或表現(xiàn)為外壁粗糙的卵形個體。破壁孢子數(shù)=碎片數(shù)/相當(dāng)于一個完整孢子的碎片數(shù)（取平均值，通常為2?4）+外壁粗糙的卵形體數(shù)。未破壁孢子數(shù)=完整卵形且外壁光滑的個體數(shù)P破破壁率％=（1）X100P破+1）未破式中：Pf>.:所觀察的視野下破壁孢子數(shù)總和P所觀察的視野下未破壁孢子數(shù)總和n：觀測視野數(shù)總和測一個平行樣，得出破壁率后取兩破壁率的平均伉【微生物指標(biāo)】應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3微生物指標(biāo)項目指標(biāo)檢測方法菌落總數(shù)，cfu/g<30000GB4789.2

5、大腸菌群，MPN/lOOg<90GB/T4789.3-2003霉菌，cfu/g^25GB4789.15酵母，cfu/g<25GB4789.15致病菌（指沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌）不得檢出GB4789.4、GB4789.5、GB4789.10、GB/T4789.11【標(biāo)志性成分含量測定】應(yīng)符合表4的規(guī)定。表4標(biāo)志性成分含量測定項目指標(biāo)檢測方法粗多糖（以葡萄糖計），mg/100g彡15001粗多糖的測定靈芝=萜（以齊墩果酸計），mg/100g彡5002靈芝三萜的測定1粗多糖的測定1.1儀器1.1.1分光光度

6、計1.1.2離心機(jī)（4000r/min）1.1.3旋轉(zhuǎn)混勻器1.2試劑除特殊注明外，本方法所用的試劑均為分析純；所用水為去離子水或同等純度蒸餾水。1.2.1無水乙醇1.2.2乙醇洗滌液：20mL水巾加入無水乙醇lOOmL,混勻。1.2.3硫酸1.2.4苯酚溶液（50g/L）:稱取精制苯酚5.Og,加水溶解并稀釋至100mL,混勻。溶液置冰箱中可保存1個月。1.2.5葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取1.OOOOg經(jīng)過98?100°C干燥至恒重的葡萄糖，加水溶解后以水稀釋至lOOOmL,此溶液ImL含葡萄糖lmg,用前稀釋10倍（0.lm

7、g/mL），現(xiàn)用現(xiàn)配。1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密移取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.OOmL,分置于具塞試管中。加蒸餾水補(bǔ)充至體積2.OOmL,再加苯酚溶液l.OOmL,搖勻，依次加入濃硫酸5.00mL，搖勻，置沸水浴中2min,取出置室溫，于485nm波長處，以試劑空白溶液為參比測定吸收度。以含糖量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。1.4樣品處理：稱収樣品2.0g,置圓底燒瓶巾，精密加水lOOmL，稱定重量，分散均勻后加熱回流3h,放冷，再稱定重量，加水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜

8、置數(shù)小時，取上清液供沉淀多糖。準(zhǔn)確吸取以上清液5.OOmL,加入無水乙醇25mL,搖勻，4°C靜置過夜，以4000r/min離心15min,棄去上淸液。沉淀用水溶解并定容至25.OmL，混勻后供測定用。1.5樣品測定：吸取供試品溶液1.OOmL,加水補(bǔ)充至2.OOmL,再加苯