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1、乙型肝炎病毒DNA實時焚光定量PCR檢測在臨床診斷中的價值分析文雯畢節(jié)市第一人民醫(yī)院貴州畢節(jié)551700【摘要】目的：本文就乙型肝炎病毒DNA實時熒光定量PCR檢測在臨床診斷屮的價值進行分析與研究。方法：選擇我院自2014年9月-2015年10月期間確診為乙型肝炎病毒患者50例，其后將上述患者進行平均分組，接受EUSA法的患者設為A組，接受實時熒光定量PCR檢測的患者設為B組，其后對比檢測結果。結果：B組患者的HBV-DNA陽性率明顯高于A組，且組間由統(tǒng)計學軟件分析，結果存在顯著性差異。結論:在乙型肝炎病毒檢測屮應用實時熒光定量PCR,具有較高的
2、敏感度，且可以對疾病的預后奠定棊礎?！娟P鍵詞】乙型肝炎病毒DNA;實時熒光定量PCR檢測；診斷價值乙型肝炎病毒所屬乙型肝炎病原體范疇，一旦患者感染此病毒，其免疫標志物會出現(xiàn)變化［1］。從以往的檢測手段來看，臨床常以ELISA法為主，雖然該方法可以使病毒狀態(tài)得以展現(xiàn)，但是相對受限。近年來，實時熒光定量PCR檢測法應運而生，憑借較高的敏感性和特異性廣泛應用于臨床。為此，本文為探究該檢測方法的診斷價值，選擇我院近一年收治的確診為乙型肝炎病毒患者50例作為研究對象，現(xiàn)將研究結果進行如下分析。1資料內容與檢測方法1.1資料內容本次研究數(shù)據(jù)結果選擇我院自20
3、14年9月-2015年10月期間確診為乙型肝炎病毒患者50例，其后將兩組患者進行平均分組，即A組和B組，每組患者25例。A組(n=25)患者屮，男性患者15例，女性患者10例，年齡分布范圍在25-48歲之間，屮位年齡為(31.2±4.7)歲。B組(n=25)患者屮,男性患者20例，女性患者5例，年齡分布范圍在22-50歲之間，屮位年齡為（32.3&plUSmn;4.4）歲。統(tǒng)計學軟件分析兩組受檢者的資料內容，結果并無顯著，可進一步研究。1.2檢測方法首先收集A組和B組患者的樣本，收集方法為：選取患者的靜脈血，并對上層血清進行分離，其
4、后選取患者的上層血清，lOOμ,與此同時，將等量的DNA濃縮液加入其中，利用振蕩器將其搖勻，并進行離心，時間約為10分鐘。最后將上層血清除去后將30μL的DNA提取液加入其中，混勻后進行離心，并靜置在恒溫條件下。其后給予A組患者ELISA法檢測，最后結果依據(jù)酶標儀進行診斷；給予B組實吋熒光定量PCR檢測，最后結果依據(jù)宏石SLAN核酸擴增儀進行診斷［2】。1.3指標觀察對A組和B組患者的檢測結果進行對比，最后將所得記錄進行分析和統(tǒng)計。1.4數(shù)據(jù)整理本次研究所涉及的數(shù)據(jù)均由軟件包（SPSS11.0）進行整理和計數(shù)，陽性率為本次的計數(shù)資料，
5、以％表示，組間檢驗結果選擇卡方進行，當P〈0.05則表示差異具有顯著性。2結果A組（n=25）患者接受ELISA法檢測，并對其HBsAg、HBeAgy以及HBcAb標記，結果顯示：15個樣本結果呈陽性，標記物為：HBsAg和HBcAb，檢測陽性率為60.0%；B組（n=25）患者接受實時熒光定量PCR檢測，并對其HBsAg、HBeAgy以及HBcAb標記，結果顯示：25個樣本結果呈陽性，檢測出的標記物為：HBsAg,HBeAgy以及HBcAb，檢測陽性率為100%;組間結果由統(tǒng)計學軟件進行分析和整理后得知：B組患者的陽性檢測率高于A組，iL差異顯
6、著。3討論據(jù)有關統(tǒng)計顯示，乙肝肝炎以及攜帶HBV的患者達到數(shù)億人以上，且感染發(fā)生率可達10%［3］。一般而言，HBV的傳播途徑以母嬰為主，在一定程度上會危及其生命安全，因此，及早診斷及早治療對臨床冇著重要的意義。在以往的檢測手段中，HBV血清標志物檢測應用較為普遍，臨床上又將艽稱之為兩對半檢測，該檢測方法可以將患者體內的HBY免疫反應得以展現(xiàn)，雖然可以明確病毒入侵信息，但是存在一定的局限性。近年來，實時熒光定量PCR檢測廣泛應用于臨床，該檢測方法不僅可以將病毒攜帶水平得以體現(xiàn)，冋吋具有較高的特異性和敏感性［4】。與此同吋該檢測方法可以量化HBV-
7、DNA,在一定程度上可以進一步了解患者的傳染性，以及HBV復制情況，從而對疾病的治療奠定良好基礎，利于預后。此外，實吋熒光PCR檢測技術具有一定的優(yōu)勢，其主要是PCR與DNA探針技術相結合，對PCR進行探測吋，會改變熒光信號，與此冋吋，在實驗期間，其主要過程均在封閉狀態(tài)中實施，免于PCR的后期處理，同時免于PCR的電泳檢測，在一定程度上使PCR定量和污染問題得到處理，且速度較快，同吋具有較高的準確性和特異性［5］。因此，實時熒光定量PCR檢測可以作為診斷乙型肝炎病毒的手段。一般而言，HBV的抗原主要HBsAg、HBeAgy、HBcAb以及HBeA
8、b，而HBcAb呈現(xiàn)陽性時，則提示HBV感染。結合本次實驗數(shù)據(jù)結果可以得知，B組患者采用實吋熒光定量PCR檢測，A組患者采用ELISA法
