關于酶聯(lián)免疫法與膠體金法應用在乙肝表面抗原檢測中的效果

關于酶聯(lián)免疫法與膠體金法應用在乙肝表面抗原檢測中的效果

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1、關于酶聯(lián)免疫法與膠體金法應用在乙肝表面抗原檢測中的效果【中圖分類號】R18.56【文獻標識碼】B【文章編號】2095-6851(2017)01-0-02乙肝表面抗原主要是指乙肝病毒外殼蛋白,是臨床上乙肝血清標志檢査中的一項主要指標之一,其自身不存在傳染性,通常與乙肝病毒共同存在[1]。乙肝病毒的傳播,主要是通過血液傳播感染這一途徑,所以,為了有效控制血液傳播風險,需要對血樣質量進行檢驗,以確定血樣屮是否存在乙肝表面抗原[2]。當前,臨床上對乙肝表面抗原檢測通常采用酶聯(lián)免疫法與膠體金法。木文主要研究酶聯(lián)免疫法與膠體金法應用在乙肝表面抗原檢測中的效果,并總結如下:

2、1.資料與方法1.1血樣來源此次研究的血樣標本,均為我院2015年12月-2016年8月期間采集的2040份體檢樣木。所有樣木均使用真空管采集,且均對每以標木予以乙肝病毒攜帶普査,并在當FI完成所有樣本檢測。1.2儀器與試劑此次研究所使用的檢測儀器均有上??迫A生物有限公司提供的KHBST36w洗板機與KHBST-360酶標儀,兩種述儀器皆在通過廠方嚴格校準與調試之后方投入使用。同時,此次所使用的酶聯(lián)免疫法檢測試劑由上??迫A生物工程股份有限公司生產,生產批號為201211062013012420130307;膠體金法?z測試劑由艾康生物技術有限公司生產,生產批號

3、為20120719201302012013040720130711,且試劑均在有效試用范圍。1.3方法分別使用酶聯(lián)免疫法與膠體金法對2040份血樣予以乙肝表面抗原檢測,對兩種檢測的結果、方法、特征進行回顧性分析。(1)酶聯(lián)免疫法。首先吸取20uL稀釋液滴入微孔并加入100uL的血清,使其在37°C下溫育60min,之后再將酶結合物50uL加入到反應孔中,再溫育30min,在溫育結束后治愈洗板機進行洗滌拍干,并加底物顯色,最后進行終止液的加入并用酶標儀予以比色,正確讀取吸光度值并加以計算。(2)膠體金法。首先使用加樣器吸取新鮮血清60UL慢慢滴至試紙條加樣端,讓

4、血清自動通過濾膜并14檢測端移動。之后在室溫環(huán)境下放置lOmin,對檢驗結果進行觀察。(3)結果判讀。酶聯(lián)免疫法結果判讀:若S/C0S1時,表明檢測結果呈陽性;若S/CO〈1,則表明檢測結果呈陰性。膠體金法結果判讀:若試紙條檢測線與對照線位置出現兩條紫紅色免疫復合物線條,表明結果呈陽性;若紫紅色免疫復合物線條只出現于試紙條對照線位置,則表明結果呈陰性。1.4統(tǒng)計學處理采用SPSS20.0軟件處理本次數據,計量資料表示用“x土s”,計數資料用x?檢驗,差異存在統(tǒng)計學意義時P〈0.05。1.結果采用酶聯(lián)免疫法檢測時,檢測出陽性血樣標木有186份,占總數的9.11%

5、;而采用膠體金法檢測時,檢測出陽性血樣標本179份,占總數的8.77%。采用兩種方法對全部血樣標本進行檢測時,結果同時顯示為陽性的血樣標本為170份,酶聯(lián)免疫檢測顯示陰性,而膠體金法檢測顯示陽性有4份;酶聯(lián)免疫法檢測顯示為陽性而膠體金法檢測顯示為陰性有10份。運用兩種方式對2040份血樣檢測,結果顯示同為陰性血樣有1860份(具體如表1所示)。2.討論膠體金法及酶聯(lián)免疫法為臨床上檢測乙肝表面抗原的常見方法,兩者在檢測原理上有著較大的區(qū)別。相對來講,膠體金主要是由氯金酸與還原劑等物質發(fā)生反應而聚合成的顆粒,該種種顆粒會受到靜電影響,而成為膠體狀態(tài),并具有較強的穩(wěn)

6、定性。而在弱堿狀況下,膠體金會帶有負電荷,并與蛋白質分子正電荷基團相結合[3]。所以,搞這個結合屬于靜電結合,蛋白質的生物特性通常不會受到影響。另外,膠體金具有敏感性、方便性、穩(wěn)定性、快捷性、試劑與設備無特殊性、結果直觀性等特征。而酶聯(lián)免疫法則是一種相對特殊的試劑檢測形式,主要是以免疫酶技術為基礎所形成的新型免疫測定技術。主要通過酶復合物與抗體的結合,之后利用試劑顯示的顏色予以檢測[4]。該種方法在敏感性與特異性上較高,但同時,也存在操作繁雜的缺陷。在檢測過程屮,致使結果受到影響的各種因素也比較多,對檢測設備與檢測人員有著較高的要求。從此次研宂結果也可以看出,

7、在2040份血樣標木中,使用酶聯(lián)免疫法檢驗結果呈陽性的血樣標本為186份,占總數的9.11%;而采用膠體金法檢驗結果呈陽性的血樣標木為179份,占總數的8.77%。也就是說,在乙肝表血抗原檢測中采用酶聯(lián)免疫法的靈敏度明敁要高于膠體金法,比較差異存在統(tǒng)計學方面的意義(P〈0.05)。綜上所述,在大規(guī)模乙肝病毒攜帶篩檢屮,可采用膠體金檢測法對血樣進行快速的篩查,以提高檢測效率,縮短初篩時間。人在少數膠體金法檢測結果呈陽性的二次篩檢中,可采用酶聯(lián)免疫檢測以確保結果的精準性。參考文獻[1]侯娟,陳偉金.乙型肝炎表面抗原不同檢測方法的優(yōu)勢比較分析[J].當代醫(yī)學,201

8、4,20(12):23-24.[2]劉

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