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《運(yùn)用酶聯(lián)免疫法與膠體金法檢測(cè)乙肝表面抗原的對(duì)比分析.doc》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、運(yùn)用酶聯(lián)免疫法與膠體金法檢測(cè)乙肝表面抗原的對(duì)比分析楊坍(武警廣西邊防總隊(duì)醫(yī)院廣西南寧530022)【摘要】目的:對(duì)比分析運(yùn)用酶聯(lián)免疫法與膠體金法檢測(cè)乙肝表面抗原各自優(yōu)缺點(diǎn)。方法:選取我院2015年1月1日?2015年9月31日采集的1791份血樣標(biāo)木作為研究對(duì)象,分別運(yùn)用酶聯(lián)免疫法與膠體金法對(duì)這些標(biāo)木實(shí)施了乙肝表面抗原檢測(cè),最后將兩種檢測(cè)方法其特點(diǎn)以及檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果:運(yùn)用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)結(jié)果為呈陽(yáng)性的血樣標(biāo)木有166份,占總樣木數(shù)的9.27%。運(yùn)用膠體金法檢測(cè)結(jié)果為呈陽(yáng)性的血樣標(biāo)木有159份,占總樣本數(shù)的8.88%o經(jīng)統(tǒng)計(jì)
2、學(xué)分析,對(duì)于乙肝表面抗原的檢測(cè)運(yùn)用酶聯(lián)免疫法明顯敏感性高于膠體金法。結(jié)論:根據(jù)兩法檢測(cè)結(jié)果,在進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)初篩的場(chǎng)合建議使用膠體金法;在醫(yī)療機(jī)構(gòu)中,應(yīng)選擇敏感度較高的酶聯(lián)免疫法進(jìn)行乙肝表面抗原篩選實(shí)驗(yàn)?!娟P(guān)鍵詞】乙肝表面抗原;酶聯(lián)免疫法;膠體金法;靈敏度【中圖分類號(hào)】R392【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】2095-1752(2016)18-0246-02酶聯(lián)免疫法與膠體金法都是檢測(cè)乙肝表面抗原的方法中較經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的常用方法。本文為了對(duì)比分析運(yùn)用酚聯(lián)免疫法與膠體金法檢測(cè)乙肝表面抗原各自優(yōu)缺點(diǎn),特選取我院2015年1月1日?2015年9月31日采
3、集的術(shù)前標(biāo)木或輸血標(biāo)木1791份作為研究對(duì)彖,分別運(yùn)用酶聯(lián)免疫法與膠體金法對(duì)這些標(biāo)木實(shí)施了乙肝表面抗原檢測(cè),最后將兩種檢測(cè)方法其特點(diǎn)以及檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析?,F(xiàn)將具體分析過(guò)程及分析結(jié)果報(bào)告如下。1.材料與方法1.1血樣標(biāo)本來(lái)源木文研究的血樣標(biāo)木是我院2015年1月1日?2015年9月31日采集的1791份術(shù)前標(biāo)木或輸血標(biāo)木,所有血樣標(biāo)木都是采用真空管對(duì)其進(jìn)行采集,且都在當(dāng)日檢測(cè)完畢。1.2儀器與試劑木次研究所使用的儀器和試劑是桂林優(yōu)利特URIT-670全自動(dòng)洗板機(jī)、KHBST-360酶標(biāo)儀、酶聯(lián)免疫法診斷試劑盒為上海榮盛生物藥業(yè)有限
4、公司產(chǎn)品、膠體金法診斷試劑盒為EFG牛物科技有限公司牛產(chǎn)。上述兩種儀器均進(jìn)過(guò)嚴(yán)格校準(zhǔn)和調(diào)試才投入使用,所有試劑也都在有效試用期范圍之內(nèi)。1.3方法先分別運(yùn)用酶聯(lián)免疫法與膠體金法對(duì)1791份血樣標(biāo)木實(shí)施乙肝表面抗原檢測(cè),最后將兩種檢測(cè)方法其特點(diǎn)以及檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析。1.3.1酶聯(lián)免疫法第一步,首先血樣標(biāo)本要經(jīng)過(guò)30min以上的凝集,其次將待檢100μl血清加入酶標(biāo)板微孔中于37°C水浴箱溫浴1小時(shí)后取出,第二步,將酶結(jié)合物加入微孔中并溫育30min,洗滌,加入顯色劑A、B液各50μl,放置37°C避光孵育20min,加
5、入終止液50μl,混勻;第三步,使用KHBST-360酶標(biāo)儀對(duì)其進(jìn)行比色,最后依據(jù)讀取的吸光度值進(jìn)行相應(yīng)計(jì)算。1.3.2膠體金法第一步,首先使用加樣器吸取血清60ul,其次緩慢地將其滴在試紙條的加樣端,最后讓血清自動(dòng)經(jīng)過(guò)濾膜并移動(dòng)向檢測(cè)端;第二步,在20±4°C環(huán)境溫度下放置lOmin以后觀察檢測(cè)結(jié)果。1.3.3結(jié)果判讀酶聯(lián)免疫法:當(dāng)S/CO&t;l的時(shí)候,則表明該樣品檢測(cè)結(jié)果為陰性;當(dāng)S/CO≥l的時(shí)候,則表明該樣品檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。[2]膠體金法:當(dāng)紫紅色的免疫復(fù)合物線條僅僅出現(xiàn)在試紙條對(duì)照線位置的時(shí)候,則
6、表明該樣品檢測(cè)結(jié)果為陰性;當(dāng)紫紅色的免疫復(fù)合物線條同時(shí)出現(xiàn)在試紙條的對(duì)照線位置和檢測(cè)線位置的時(shí)候,則表明該樣品檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。[3]1.3.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法木文主要采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)本文研究所得所有數(shù)據(jù)予以統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示計(jì)量資料,計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),采用t檢驗(yàn),當(dāng)P<0.05時(shí)候,則視為存在顯著差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。1.結(jié)果從上表可以看到,運(yùn)用酶聯(lián)免疫法對(duì)這1791份血樣標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果為呈陽(yáng)性的血樣標(biāo)木有166份,占總樣木數(shù)的9.27%。運(yùn)用膠
7、體金法對(duì)這1791份血樣標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果為呈陽(yáng)性的血樣標(biāo)本有159份,占總樣本數(shù)的8.88%0運(yùn)用兩種檢測(cè)方法對(duì)1791份血樣標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果同為陽(yáng)性的血樣標(biāo)木有158份。酶聯(lián)免疫法檢測(cè)為陰性而膠體金法檢測(cè)為陽(yáng)性的血樣標(biāo)木有1份。酶聯(lián)免疫法檢測(cè)為陽(yáng)性而膠體金法檢測(cè)為陰性的有8份。運(yùn)用兩種檢測(cè)方法對(duì)1791份血樣標(biāo)木進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果同為陰性的血樣標(biāo)木有1624份。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,對(duì)于乙肝表面抗原的檢測(cè)運(yùn)用酶聯(lián)免疫法明顯靈敏度高于膠體金法,存在顯著差異(P<0.01),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.討論以前就有文獻(xiàn)報(bào)道過(guò)這兩種方法在檢測(cè)敏
8、感性方面存在著差異[1-2]o從本次檢測(cè)結(jié)果上看,酶聯(lián)免疫法檢測(cè)過(guò)程繁瑣但靈敏度高,膠體金法檢測(cè)過(guò)程快捷簡(jiǎn)便但靈敏度較低,存在一定的漏檢率。在實(shí)際工作的操作中,建議在需要對(duì)乙肝病毒進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)初篩的場(chǎng)合使用膠體金快速檢測(cè)試劑