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1、本科生畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）題目：紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚PSY基因的分離學(xué)院：化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）原創(chuàng)性聲明和使用授權(quán)說(shuō)明原創(chuàng)性聲明本人鄭重承諾：所呈交的畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文），是我個(gè)人在指導(dǎo)教師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的成果。盡我所知，除文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人或組織已經(jīng)發(fā)表或公布過(guò)的研究成果，也不包含我為獲得及其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或?qū)W歷而使用過(guò)的材料。對(duì)本研究提供過(guò)幫助和做出過(guò)貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均已在文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。作者簽名：日期： 指導(dǎo)教師簽名：日期：使用授權(quán)說(shuō)明本人完全了解大學(xué)關(guān)于
2、收集、保存、使用畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的規(guī)定，即：按照學(xué)校要求提交畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的印刷本和電子版，并提供目錄檢索與閱覽服務(wù)；學(xué)校可以采用影印、縮印、數(shù)字化或其它復(fù)制手段保存論文；在不以贏利為目的前提下，學(xué)校可以公布論文的部分或全部?jī)?nèi)容。作者簽名：日期： 目錄摘要1英文摘要11引言12材料22.1植物材料22.2實(shí)驗(yàn)試劑22.3主要儀器和設(shè)備23方法33.1總RNA提取33.1.1常用試劑配制33.1.2器具處理與準(zhǔn)備33.1.3提取RNA33.2RNA的純化43.3RNA提取質(zhì)量與含量檢
3、測(cè)43.3.1總RNA的電泳分析43.3.2總RNA含量與純度測(cè)定43.4cDNA鏈合成53.4.1cDNA一鏈的合成53.4.2cDNA第二鏈合成53.5基因的克隆及序列分析63.5.1基因的克隆63.5.2割膠回收63.5.3T-載體連接64結(jié)果與分析74.1RNA電泳結(jié)果分析74.2RNA紫外分光光度計(jì)測(cè)定結(jié)果分析74.3純化后RNA電泳結(jié)果分析84.4合成cDNA電泳結(jié)果分析84.5PSY基因的克隆94.6序列性分析95討論12參考文獻(xiàn)14致謝詞16紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚PSY基因的分離化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院生物科學(xué)專業(yè)付文佳（05260204）
4、指導(dǎo)老師：楊莉（副教授）摘要：采用改良Bugos法提取紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚成熟果實(shí)果肉RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。根據(jù)NCBI網(wǎng)站公布的PSY基因全序列設(shè)計(jì)引物，采用高保真Taq聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將擴(kuò)增產(chǎn)物連接到pUCm-T載體，轉(zhuǎn)化至大腸桿菌DH5α，并送公司測(cè)序。比較發(fā)現(xiàn)，紅肉蜜柚和琯溪蜜柚果肉PSY基因全長(zhǎng)均為1317bp，編碼439個(gè)氨基酸，序列比對(duì)結(jié)果顯示兩者PSY基因與柑桔屬PSY基因同源性都相對(duì)較高，同源性最高達(dá)99%。關(guān)鍵詞：紅肉蜜柚；琯溪蜜柚；PSY基因；基因分離；序列分析IsolatingPSYGenefromRed-fle
5、shedSweetPomeloandItsParentGuanxiSweetPummeloFUWen-jiaDirector:YANGLi(CollegeofChemistryandLifeScience,ZhejiangNormalUniversity,052No.04)Abstract：ThetotalRNAwasextractedfromtheripefruitofRed-fleshedsweetpomeloandGuanxisweetpomelousingimprovedBugosRNAextractionmethod,thenweresynt
6、hesisedcDNAbyreversetranscriptasekit.Atthesametime,wedesignedprimersforPSYgenesequencesaccordingtotheinformationPSYgenesequencesonNCBI,high-fidelityTaqpolymerasewereusedforPCRamplificationandcDNAasthetemplate.Finally,thePCRproductswereconnectedtopUCm-Tvector,thensequencedandanal
7、yzedthesequences.SequenceanalysisindicatedthatthecDNAfragmentwas1317bp,encodinga439aminoacidproteinandhaved99%identitywiththoseofothercitrusinthehighestlevel.TheresearchingmaybeessentialforthemolecμLarmechanismofPSYgenemutation.KeyWords：red-fleshedsweetpomelo;guanxisweetpummelo;
8、PSYgene;geneisolationing;sequenceanalysis1引言芽變是
