紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚psy基因的分離畢業(yè)論文

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1、正文：紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚PSY基因的分離本科生畢業(yè)設計（論文）題目：紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚PSY基因的分離學院：化學與生命科學學院1正文：紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚PSY基因的分離畢業(yè)設計（論文）原創(chuàng)性聲明和使用授權說明原創(chuàng)性聲明本人鄭重承諾：所呈交的畢業(yè)設計（論文），是我個人在指導教師的指導下進行的研究工作及取得的成果。盡我所知，除文中特別加以標注和致謝的地方外，不包含其他人或組織已經(jīng)發(fā)表或公布過的研究成果，也不包含我為獲得及其它教育機構的學位或?qū)W歷而使用過的材料。對本研究提供過幫助和做出過貢獻的個人或

2、集體，均已在文中作了明確的說明并表示了謝意。作者簽名：　　　　　日　期：　　　　　指導教師簽名：　　　　　日　　期：　　　　　使用授權說明本人完全了解大學關于收集、保存、使用畢業(yè)設計（論文）的規(guī)定，即：按照學校要求提交畢業(yè)設計（論文）的印刷本和電子版本；學校有權保存畢業(yè)設計（論文）的印刷本和電子版，并提供目錄檢索與閱覽服務；學?？梢圆捎糜坝?、縮印、數(shù)字化或其它復制手段保存論文；在不以贏利為目的前提下，學校可以公布論文的部分或全部內(nèi)容。作者簽名：　　　　　日　期：　　　　　

3、1正文：紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚PSY基因的分離目錄摘要1英文摘要11引言12材料22.1植物材料22.2實驗試劑22.3主要儀器和設備23方法33.1總RNA提取33.1.1常用試劑配制33.1.2器具處理與準備33.1.3提取RNA33.2RNA的純化43.3RNA提取質(zhì)量與含量檢測43.3.1總RNA的電泳分析43.3.2總RNA含量與純度測定43.4cDNA鏈合成53.4.1cDNA一鏈的合成53.4.2cDNA第二鏈合成53.5基因的克隆及序列分析63.5.1基因的克隆63.5.2割膠回收63

4、.5.3T-載體連接64結果與分析74.1RNA電泳結果分析74.2RNA紫外分光光度計測定結果分析74.3純化后RNA電泳結果分析84.4合成cDNA電泳結果分析84.5PSY基因的克隆94.6序列性分析95討論12參考文獻14致謝詞16紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚PSY基因的分離化學與生命科學學院生物科學專業(yè)付文佳（05260204）指導老師：楊莉（副教授）1正文：紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚PSY基因的分離摘要：采用改良Bugos法提取紅肉蜜柚及其親本琯溪蜜柚成熟果實果肉RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。根據(jù)NCBI網(wǎng)

5、站公布的PSY基因全序列設計引物，采用高保真Taq聚合酶進行PCR擴增，將擴增產(chǎn)物連接到pUCm-T載體，轉(zhuǎn)化至大腸桿菌DH5α，并送公司測序。比較發(fā)現(xiàn)，紅肉蜜柚和琯溪蜜柚果肉PSY基因全長均為1317bp，編碼439個氨基酸，序列比對結果顯示兩者PSY基因與柑桔屬PSY基因同源性都相對較高，同源性最高達99%。關鍵詞：紅肉蜜柚；琯溪蜜柚；PSY基因；基因分離；序列分析IsolatingPSYGenefromRed-fleshedSweetPomeloandItsParentGuanxiSweetPummelo

6、FUWen-jiaDirector:YANGLi(CollegeofChemistryandLifeScience,ZhejiangNormalUniversity,052No.04)Abstract：ThetotalRNAwasextractedfromtheripefruitofRed-fleshedsweetpomeloandGuanxisweetpomelousingimprovedBugosRNAextractionmethod,thenweresynthesisedcDNAbyreversetran

7、scriptasekit.Atthesametime,wedesignedprimersforPSYgenesequencesaccordingtotheinformationPSYgenesequencesonNCBI,high-fidelityTaqpolymerasewereusedforPCRamplificationandcDNAasthetemplate.Finally,thePCRproductswereconnectedtopUCm-Tvector,thensequencedandanalyze

8、dthesequences.SequenceanalysisindicatedthatthecDNAfragmentwas1317bp,encodinga439aminoacidproteinandhaved99%identitywiththoseofothercitrusinthehighestlevel.Theresearchingmaybeessentialforthemolec