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《cck-8對lps誘導(dǎo)小鼠單核巨噬細(xì)胞raw264.7細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)利對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。研究生躲秒導(dǎo)師簽章{簍絮甄出睦竹二、渡。塞塞級學(xué)院簽章?硼汐年3月歸j～：。一．．?河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特
2、別加以標(biāo)注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：導(dǎo)師簽章：嗲。＼≤每b月們?nèi)說萬方數(shù)據(jù)目錄中文摘要1英文摘要5英文縮寫10研究論文CCK．8對LPS誘導(dǎo)小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264．7細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響前言剮吾11材料與方法12結(jié)果23附圖25討論31結(jié)論33參考文獻(xiàn)33綜述內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與炎癥相關(guān)性疾病的研究進(jìn)展36致謝44個人簡歷45萬方數(shù)據(jù)中文摘要CCK-8對LPS誘導(dǎo)小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264．7細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響摘要目的：炎癥是組織對各
3、種損傷因子的刺激所發(fā)生的一種以防御反應(yīng)為主的基本病理過程。而炎癥失控是感染性疾病并發(fā)多器官功能障礙(Multipleorgandysfunctionsyndrome，MODS)的主要發(fā)病機(jī)制，單核一巨噬細(xì)胞的活化在誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。在脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS)或其它致炎因素作用下，單核巨噬細(xì)胞生成并釋放大量的促炎因子，包括IL．16、IL一6等，這些促炎因子的過度釋放可引起機(jī)體自身組織損傷，導(dǎo)致全身性炎癥反應(yīng)綜合征，最終導(dǎo)致MODS甚至死亡。因此，有效控制單核巨噬細(xì)胞的過度激活將對減輕機(jī)體炎癥
4、反應(yīng)起到積極的保護(hù)作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的主要場所，對應(yīng)激原的刺激十分敏感。各種應(yīng)激原作用后通過誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中錯誤折疊和未折疊蛋白的堆積而激活未折疊蛋白反應(yīng)(unfoldedproteinresponse，UPR)及細(xì)胞凋亡等內(nèi)質(zhì)網(wǎng)反應(yīng)，導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能紊亂，引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(Endoplasmicreticulumstress，ERS)。有研究發(fā)現(xiàn)，ERS在LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用，LPS攻擊巨噬細(xì)胞可引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)錯誤折疊及未折疊蛋白質(zhì)增多，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(78一kDaglucose
5、．regulatedprotein，GRP78)轉(zhuǎn)而與之結(jié)合，釋放肌醇需要元件．1(inositolrequiringelement一1，IREl)，IREl活化切割轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白l(X—boxbindingprotein1，XBPl)mRNA，使XBPlmRNA由無活性形式轉(zhuǎn)為活性形式，翻譯成XBPl蛋白，作用于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)元件(ERstressresponseelement，ERSE)，促進(jìn)C／EBP同源蛋白(C／EBPhomologousprotein，CHOP)基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，CHOP表達(dá)增高，可激活半胱天冬蛋
6、白酶．1l／半胱天冬蛋白酶一1(caspase。11／caspase．1)信號通路，促進(jìn)IL一1B的生成，誘發(fā)炎癥相關(guān)性疾病。因此控制ERS的程度對抑制LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)具有重要意義。膽囊收縮素(cholecystokinin，CCK)是一類廣泛存在于體內(nèi)多個系統(tǒng)的腦．腸肽，參與多種生物學(xué)功能的調(diào)節(jié)，如神經(jīng)．體液調(diào)節(jié)、記萬方數(shù)據(jù)中文摘要憶及攝食調(diào)節(jié)等。CCK在體內(nèi)存在多種形式，其中八肽膽囊收縮素(cholecystokininoctopeptide，CCK-8)是存在于小腸、血液及中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)最重要的形式。本實驗室以往研究發(fā)
7、現(xiàn)，八肽CCK(CCK一8)具有一定的抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用，能減輕內(nèi)毒素休克大鼠肺臟、肝臟、脾臟、腎臟間質(zhì)水腫及白細(xì)胞的浸潤等病理損傷，同時抑制體內(nèi)多種促炎因子的釋放。因此CCK．8對于治療炎癥相關(guān)性疾病具有較好的應(yīng)用前景，但CCK．8對LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞ERS啟動炎癥反應(yīng)信號通路有何調(diào)節(jié)作用，尚未見文獻(xiàn)報道?；谝陨涎芯勘尘埃緦嶒炦x擇可穩(wěn)定傳代的小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264．7細(xì)胞探討這一科學(xué)問題，對于闡明CCK．8的抗炎機(jī)制以及藥物開發(fā)應(yīng)用具有重要意義。方法：l選用小鼠單核巨噬細(xì)胞(購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫)RAW264．
8、7細(xì)胞作為研究對象。2實驗分組：將小鼠RAW264．7細(xì)胞按隨機(jī)數(shù)字表法分為6組：對照組(Con組)：用無血清DMEM／高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)；LPS組：用含0．599／mlLPS無血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)；CCK．8組：用含10。69mol／mlCCK．8無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)；C
