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《里氏木霉產(chǎn)纖維素酶誘導(dǎo)劑的篩選與過程優(yōu)化-細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、‘‘‘，n一’’‘Inducersscreeningandprocessoptimizationon』"richodermareesetonproducingcellulasebyLIHuiAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofScienceCellBiologyCentralSouthUniversityofForestryandTechnology498ShaoshanSouthRoad，TianxinDistrictChangshaHunan410004，P
2、．R．CHINASupervisorProfessorWangYijiangApril，201l，一學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品，也不包含為獲得中南林業(yè)科技大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式表明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。作者簽名：≮輝hI1年6月7日中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)
3、定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件或電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)中南林業(yè)科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于：1、保密口，在年解密后適用本授權(quán)書。2、不保密阢(請(qǐng)您在以上相應(yīng)方框打“4")作者簽名：慧霄聊簽名：糾吾永“1年b月，7日yo11年莎月7日摘要纖維素乙醇生產(chǎn)過程中，纖維素酶的成本占了很高的比例，降低纖維素酶的成本能有效地降低纖維素乙醇的成本。高產(chǎn)纖維素酶的菌株，低廉而高效的誘導(dǎo)劑和優(yōu)化培養(yǎng)工藝都能有效降低纖維素酶的成本。本研究通過對(duì)乳糖、蔗
4、糖、半乳糖、木糖、麥芽浸粉、工業(yè)纖維素、稻草粉、大麥稈粉、可溶性淀粉、麥芽糖等可能性誘導(dǎo)劑的基礎(chǔ)上，篩選出合適的誘導(dǎo)劑，并優(yōu)化培養(yǎng)基，找到產(chǎn)纖維素酶的最優(yōu)條件，構(gòu)建分批培養(yǎng)非構(gòu)造式動(dòng)力學(xué)模型，最后，對(duì)纖維素酶的特性進(jìn)行了部分研究。通過對(duì)比不同濃度的可能性誘導(dǎo)劑培養(yǎng)下的里氏木霉菌絲體干重、濾紙酶活和B．葡萄糖苷酶酶活和它們的變化趨勢(shì)，篩選出工業(yè)纖維素作為里氏木霉RUTC．30產(chǎn)纖維素酶的誘導(dǎo)劑。在單因素實(shí)驗(yàn)找出工業(yè)纖維素、硫酸銨和生物素合適的添加量范圍基礎(chǔ)上，通過實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)軟件Design．Expert進(jìn)行中心組合設(shè)計(jì)尋找工業(yè)纖維素、硫酸銨和生物素的最優(yōu)添加量。結(jié)果表明：當(dāng)工業(yè)纖
5、維素添加量為39．7229／L，硫酸銨添加量為5．9709／L，生物素添加量為239．072I．tg／L；濾紙酶活為6．292U／ml，13-葡萄糖苷酶酶活為O．877U／ml，可溶性蛋白質(zhì)含量達(dá)到1．174mg／ml。經(jīng)驗(yàn)證濾紙酶活為6．158U／ml，與預(yù)測(cè)相差2．13％，f3-葡萄糖苷酶酶活為O．864U／ml，與預(yù)測(cè)相差1．48％，可溶性蛋白質(zhì)含量為1．159mg／ml，與預(yù)測(cè)相差1．28％。相對(duì)于未優(yōu)化前濾紙酶活提高了18．66％，D．葡萄糖苷酶酶活提高了5．75％，可溶性蛋白質(zhì)含量提高了12．52％。在7．5L發(fā)酵罐中，濾紙酶活為4．817U／ml，13-葡萄糖苷
6、酶酶活為O．881U／ml，可溶性蛋白質(zhì)含量達(dá)到1．118mg／ml，濾紙酶活與搖瓶培養(yǎng)的結(jié)果相差比較大。同時(shí)，蛋白質(zhì)電泳顯示工業(yè)纖維素誘導(dǎo)的纖維素酶中幾乎不含有其它雜蛋白。通過響應(yīng)面優(yōu)化的最優(yōu)結(jié)果，在7．5L發(fā)酵罐中保持恒定的硫酸銨和生物素添加量，改變工業(yè)纖維素添加量的基礎(chǔ)上，構(gòu)建了里氏木霉產(chǎn)纖維素酶的分批培養(yǎng)非構(gòu)造式動(dòng)力學(xué)模型，這些模型能夠良好的擬合菌絲體、工業(yè)纖維素、可溶性蛋白質(zhì)、濾紙酶活和p一葡萄糖苷酶酶活的變化。但對(duì)可溶性蛋白質(zhì)、濾紙酶活和p一葡萄糖苷酶酶活的擬合效果低于對(duì)菌絲體和工業(yè)纖維素的擬合效果。從模型參數(shù)看出可溶性蛋白質(zhì)、濾紙酶活和p．葡萄糖苷酶酶活的合成與
7、菌絲體是部分生長(zhǎng)偶聯(lián)的關(guān)系。每毫克胞外蛋白質(zhì)約為4．4個(gè)濾紙酶活。單位濾紙酶活成本模型是培養(yǎng)時(shí)間的函數(shù)，對(duì)比在工業(yè)纖維素和微晶纖維素誘導(dǎo)下的單位濾紙酶活成本變化，發(fā)現(xiàn)工業(yè)纖維素相對(duì)于微晶纖維素有一定的經(jīng)濟(jì)優(yōu)勢(shì)。對(duì)比工業(yè)纖維素和微晶纖維素誘導(dǎo)的纖維素酶對(duì)濾紙和對(duì)硝基苯基．p．D．毗喃葡萄糖苷酶解的Km和Vmax，和纖維素酶活，發(fā)現(xiàn)工業(yè)纖維素誘導(dǎo)的纖維素酶有著更高的酶解效率。C02+對(duì)濾紙酶活和p．葡萄糖苷酶酶活都有抑制作用，其它金屬離子對(duì)濾紙酶活有一定的促進(jìn)作用。關(guān)鍵詞：里氏木霉；工業(yè)纖維素；纖維素酶：濾
