腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞中thy-1激活誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的研究

《腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞中thy-1激活誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。

1、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文論文題目：腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞中Thy．1激活誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的研究作者姓名胡偉國(guó)學(xué)生學(xué)號(hào)指導(dǎo)教師朱正綱教授指導(dǎo)小組鄭民華教授劉炳亞教授吳云林教授學(xué)科專業(yè)：外科學(xué)(普通外科)申請(qǐng)學(xué)位：外科學(xué)博士研究方向：胃腸道腫瘤培養(yǎng)單位：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院答辯日期：2014年10月萬方數(shù)據(jù)JJ嘲嬲掣Y281d鞘掣ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicineDoctoralDissertationTHESTUDYOFCANCER．ASSOCIATEDFIBROBLASTPROMOTESTU

2、MORINVASIoNANDMETASTASISBYINDUCINGEPITHELIAL—MESENCHYMALTRANSITIONVIAACTIVATINGTHY．-1INHUMANGASTRICCANCERAuthorWei—guoHUStudent’SIDT201100024SupervisorProf．Zheng—gangZHUCo-supervisorsProf．Min．huaZHENGPrOf．Bin-yaLIUProf．Yun—linWUMajorSurgery(GeneralSurgery)ResearchFieldGastrointestinaICanc

3、erDegreePh．DDebateDateOct。2014A咖iationRuijinHospital，ShanghaiJiaoTongUniversitySchoolofMedicine萬方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。貳蒜兩學(xué)位論文作者簽名：日期：2014年10月18日萬方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)學(xué)

4、位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密√(請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“4”)贏薩翻學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：2014年10月18日日期：2014年10月日萬方數(shù)據(jù)腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞中Thy．1激活誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的研究摘要【目的】研究腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)

5、胞(CAFs)促進(jìn)胃癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Em)的作用，并探討其機(jī)制。【方法】分離、純化、鑒定人胃癌，將CAFs和配對(duì)的正常成纖維細(xì)胞(NFs)分別與胃癌細(xì)胞系MKN28進(jìn)行共培養(yǎng)，研究胃癌細(xì)胞的遷移侵襲能力和胃癌細(xì)胞是否發(fā)生EMT的變化；研究54例胃癌病人的組織芯片和5例原代分離培養(yǎng)的胃癌CAFs中胸腺細(xì)胞分化抗原．1(Thy．1)表達(dá)；進(jìn)一步通過shRNA技術(shù)在CAFs中將Thy．1表達(dá)進(jìn)行基因沉默后再與MKN28進(jìn)行共培養(yǎng)，以證實(shí)胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞是否通過Thy-1介導(dǎo)胃癌細(xì)胞發(fā)生EMT?！窘Y(jié)果】成功分離、純化并鑒定了人胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞，分離出的胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞呈

6、現(xiàn)紡錘形的形態(tài)，與NFs形態(tài)無顯著差異。應(yīng)用a．SMAmRNA的表達(dá)對(duì)分離出的原代細(xì)胞進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)在CAFs中01．SMAmRNA的表達(dá)都比配對(duì)的NFs中顯著增加，提示從胃癌組織中分離出的成纖維細(xì)胞即為胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞，可以作為細(xì)胞模型進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。當(dāng)CAFs和配對(duì)的NFs分別與胃癌細(xì)胞系MKN28進(jìn)行共培養(yǎng)后，胃癌細(xì)胞的遷移侵襲能力顯著增強(qiáng)，胃癌細(xì)胞中E．cadherin表達(dá)顯著減低，Vimentin、Snail、Slug及MMP一9表達(dá)顯著增高，表明胃癌細(xì)胞發(fā)生了EMT。通過54例胃癌病人的組織芯片以及分離的胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞中的免疫組化研究發(fā)現(xiàn)，胃癌基質(zhì)比非

7、癌組織基質(zhì)中Thy-1表達(dá)量顯著增強(qiáng)，陽性細(xì)胞形態(tài)上呈現(xiàn)為梭形，主要位于癌巢周圍，而胃癌組織基質(zhì)主要細(xì)胞成分為CAFs，Thy-1主要在CAFs中出現(xiàn)高表達(dá)。在分離出的5例胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞中，通過檢測(cè)Thy-lmRNA及蛋白表達(dá)后發(fā)現(xiàn)，4／5例樣本的CAFs中Thy一1的表達(dá)較配對(duì)NFs中顯著增加，進(jìn)一步證實(shí)了在胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞中Thy-1存在異常的過度表達(dá)。通過shRNA技術(shù)在CAFs中將Thvl表達(dá)進(jìn)行基萬方數(shù)據(jù)因沉默后再與MKN28進(jìn)行共培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)胃癌細(xì)胞的EMT效應(yīng)發(fā)生了減弱，并且其遷移侵襲能力也發(fā)生了減弱，E