《遺傳實驗指導(dǎo)》word版

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1、遺傳學(xué)實驗指導(dǎo)一、實驗項目1、減數(shù)分裂的觀察2、果蠅唾液腺染色體的觀察3、花粉母細(xì)胞涂抹制片4、分離規(guī)律5、等位基因分離的驗證6、獨(dú)立分配規(guī)律7、基因的連鎖與交換8、有絲分裂9、石蠟切片技術(shù)10、染色體數(shù)目變異的誘發(fā)及鑒定11、顯微攝影技術(shù)12、植物染色體組型分析13、細(xì)胞核內(nèi)DNA的鑒定14、高等植物核DNA的簡易快速提取15、外源DNA的花粉管道導(dǎo)入技術(shù)16、大腸桿菌E.coliDH5α感受態(tài)細(xì)胞的制備和轉(zhuǎn)化二、實驗項目實驗一減數(shù)分裂的觀察一、實驗?zāi)康挠^察并熟悉減數(shù)分裂的全過程，以及各個時期染色體的行為和變化，為學(xué)習(xí)遺傳學(xué)基本規(guī)律奠定基礎(chǔ)。二、實驗說明減數(shù)分

2、裂是在性母細(xì)胞成熟時，配子形成過程中所發(fā)生的一種特殊的有絲分裂。在性母細(xì)胞形成過程中，先由有性組織（如花藥、胚珠）中的某些細(xì)胞分化為孢母細(xì)胞（2n），以后進(jìn)一步由這些孢母細(xì)胞進(jìn)行兩次連續(xù)的分裂，而染色體只分裂一次，結(jié)果產(chǎn)生四個染色體數(shù)目減半的大（?。╂咦樱╪）。這些孢子進(jìn)一步發(fā)育為雌（雄）配子，通過雌雄配子的受精結(jié)合，新個體的染色體又恢復(fù)到與親本相同的數(shù)目，從而保證了親代和子代間染色體數(shù)目的恒定性。減數(shù)分裂各時期的主要特點(diǎn)如下：第一次分裂前期Ⅰ這一時期較長，變化也較復(fù)雜，一般又分為五個時期。1、細(xì)線期：這是減數(shù)分裂開始時期，染色體細(xì)長如線，首尾不分，繞作一團(tuán)，核

3、仁明顯，電子顯微鏡下觀察，數(shù)目成雙。2、偶線期：由于螺旋化，染色體開始變短、變粗，同源染色體配對，出現(xiàn)聯(lián)會，呈二價體狀態(tài)是這一時期的主要特征。3、粗線期：配對后的染色體逐漸縮短變粗，由于各染色體是由已復(fù)制的兩條染色單體通過著絲粒連接起來，故每一配對的染色體中就含有四條染色單體，又稱四合體。4、雙線期：四合體繼續(xù)縮短變粗，同源染色體雖因非姊妹染色單體相互排斥而分開，但由于非姊妹染色單體之間發(fā)生交換，而在同源染色體的一定區(qū)段出現(xiàn)交叉結(jié)。5、終變期：染色體變得更短更粗，交叉結(jié)向端部移動（端化），核仁、核膜開始消失，染色體分散在整個核內(nèi)，此時觀察染色體最為清楚，便于計數(shù)

4、。中期Ⅰ核仁、核膜消失，染色體排列在赤道板上，成對染色體的著絲粒轉(zhuǎn)向兩極，紡錘絲出現(xiàn)。后期Ⅰ同源染色體由紡錘絲牽引著絲粒，向兩極移動，由于各染色體的著絲粒尚未分裂，每一極只分到每對同源染色體中的一個，故兩個子細(xì)胞將只有半數(shù)的染色體，從而實現(xiàn)了染色體數(shù)目的減半（2n→n）。末期Ⅰ染色體移到兩極后，松開變細(xì)，形成子核，細(xì)胞質(zhì)分裂，在中央由紡錘絲形成細(xì)胞板，形成二分體。第二次分裂前期Ⅱ染色體又開始明顯縮短，二分染色體的兩個染色單體相互散開，但仍和著絲粒連在一起，沒有分開。中期Ⅱ每個二分染色體又整齊地排列在各個分裂細(xì)胞的赤道板上。后期Ⅱ每個二分染色體的著絲粒縱裂為二，姊

5、妹染色單體分別移向兩極。末期Ⅱ拉向兩極的染色單體形成新的細(xì)胞核，同時細(xì)胞質(zhì)又分為兩部分。這樣經(jīng)過兩次分裂，形成四個子細(xì)胞，又叫四分體或四分孢子，每個孢子內(nèi)只含有最初細(xì)胞的半數(shù)染色體，以后就開始了配子體的發(fā)育。三、實驗材料用具1、材料玉米（2n=20）、普通小麥（2n=42）、水稻（2n=24）、黑麥（2n=14）、蠶豆（2n=12）花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂各時期的永久制片。2、用具顯微鏡、二甲苯、擦鏡紙等。四、實驗方法根據(jù)前述減數(shù)分裂各時期的特點(diǎn)，在顯微鏡下，先低倍后高倍尋找花粉母細(xì)胞分裂相，仔細(xì)觀察，并分析確定時期，最后按顯微鏡下觀察的實際情況繪圖。五、作業(yè)繪出減數(shù)

6、分裂各時期的圖象。實驗二果蠅唾液腺染色體的觀察一、實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)解剖果蠅三齡幼蟲的唾液腺及唾液腺染色體的制片方法，觀察果蠅唾液腺染色體。二、實驗原理果蠅的唾液腺位于幼蟲前端的食道兩側(cè)和神經(jīng)球附近（圖2-1）。剖取果蠅唾液腺細(xì)胞進(jìn)行制片觀察，可見到一個由4對染色體的著絲粒結(jié)合形成的染色中心，以及向四周伸展的5條染色體臂（X、2L、2R、3L、3R），其中第4對染色體為粒狀，與染色中心密切相聯(lián)，總稱為唾液腺染色體（圖2-2）。果蠅唾液腺染色體是一種典型的多線染色體。它是果蠅唾液腺細(xì)胞核內(nèi)有絲分裂所致，即核內(nèi)染色體中的染色線連續(xù)復(fù)制而染色體并不分裂，結(jié)果使每條染色體中的

7、染色線可多達(dá)500～1000條，長度和體積分別比其它細(xì)胞的染色體長100～200倍、大1000～2000倍，因此也稱巨型染色體。由于每條染色體的染色線在不同的區(qū)段螺旋化程度不一，因而出現(xiàn)一系列寬窄不同、染色深淺不一或明暗相間的橫紋。不同染色體的橫紋數(shù)量、形狀和排列順序是恒定的。利用這些特征不僅可以鑒別不同的染色體，還可以結(jié)合遺傳實驗結(jié)果進(jìn)行基因定位。此外，由于其體細(xì)胞同源染色體的配對，故易于進(jìn)行染色體的缺失、重復(fù)、倒位和易位的細(xì)胞學(xué)觀察和研究。三、實驗材料用具藥品1、材料果蠅的三齡幼蟲活體。2、用具顯微鏡、雙筒解剖鏡、培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、吸水紙

8、、灑精燈、火柴等。3、藥