資源描述:
《常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線(xiàn)閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制(一)??反應(yīng)劑????1、檢查葡萄糖試劑配方一??本尼迪克(Benedict)溶液(1)在400毫升蒸餾水中溶解85克檸檬酸鈉和50克無(wú)水碳酸鈉。(2)在50毫升加熱的蒸餾水中溶解8.5克硫酸銅。把硫酸銅溶液緩緩倒入檸檬酸鈉-碳酸鈉溶液中,邊加邊攪拌,如果產(chǎn)生沉淀,要過(guò)濾。本尼迪克溶液配制后能長(zhǎng)期使用(存放時(shí)間較久而產(chǎn)生沉淀是,取上層清液使用,不必重新配制)。本尼迪克溶液用來(lái)測(cè)試食物、血液和尿中的葡萄糖,可測(cè)出0.15~0.20%的葡萄糖。這種溶液跟未知物同加熱時(shí),如果未知物中有葡萄糖,會(huì)形
2、成紅色的氧化亞銅沉淀物。配方二??裴林(Fehling)溶液(1)把34.5克硫酸銅溶于500毫升蒸餾水中。(2)把125克氫氧化鉀(鈉)和173克酒石酸鉀鈉溶解在500毫升蒸餾水中。上述兩種溶液應(yīng)分別保存。在檢測(cè)葡萄糖時(shí),使他們等量的混合,加入待測(cè)物的試管內(nèi),加熱到沸騰。如果有葡萄糖,會(huì)形成紅色的氧化亞銅沉淀物。2、檢查淀粉的試劑魯哥氏(Lugol’s)溶液(碘液)取6克碘化鉀溶于20毫升蒸餾水中,攪拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸餾水,貯存在棕色試劑瓶?jī)?nèi)。碘液用來(lái)測(cè)試食物樣品或葉片中的淀粉,也
3、用作染色劑,例如可染色鞭毛、纖毛和細(xì)胞核等。3、檢查蛋白質(zhì)的試劑配方一??米倫(Millon)試劑在60毫升濃硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加溫可助溶),溶解后加入兩倍體積的蒸餾水稀釋?zhuān)o置澄清后,取它上層的清液備用。這種試劑可長(zhǎng)期保存。在待測(cè)物中加入少量米倫試劑,加熱,如果有蛋白質(zhì),會(huì)出現(xiàn)紅色。這種試劑不能用來(lái)測(cè)定尿中的蛋白質(zhì)。配方二??雙縮尿試劑分別配制10%氫氧化鈉溶液和1%硫酸銅溶液。在3毫升待測(cè)物中加入1毫升10%氫氧化鈉溶液和1滴1%硫酸銅溶液。如果有蛋白質(zhì),會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)。4、檢查脂肪的試劑蘇丹
4、Ⅲ(Ⅳ)酒精飽和溶液取0.2克蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ),放入純酒精中,加熱,使它充分溶解,成為飽和酒精溶液,過(guò)濾后密閉在試劑瓶?jī)?nèi)保存?zhèn)溆谩?、酸堿指示劑配方一??酚酞試劑和試紙酚酞試劑??取1克酚酞,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,裝在試劑瓶?jī)?nèi)密閉保存。酚態(tài)試紙??取1克酚酞,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸餾水。把綠紙條放入酚酞溶液中浸濕后,取出,放在無(wú)氨氣影響處晾干。酚泰試劑(試紙)??pH值變色范圍8.2~10,在酸性和中性溶液中都無(wú)色,再堿性溶液中呈深紅色。配方二??紅藍(lán)石蕊試紙取市售石蕊1克,放
5、在80毫升10%酒精溶液中攪拌,使它溶解,然后過(guò)濾。把濾液分成兩份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出現(xiàn)紅色為止。另1份滴入稀氫氧化鈉溶液,到出現(xiàn)藍(lán)色為止。在上述制備的溶液中分別浸濕濾紙條,隨后取出濾紙條,放在蔽光處、無(wú)酸堿性氣體影響的地方晾干,即的紅、藍(lán)兩種石蕊試紙。紅石蕊試紙?jiān)趬A性溶液中變藍(lán),藍(lán)石蕊試紙?jiān)谒嵝匀芤褐凶兗t。6、檢查二氧化碳的試劑檢查二氧化碳的試劑,可用溴代麝香草酚藍(lán)溶液和石灰水。配方一??溴代麝香草酚藍(lán)溶液取0.1克溴代麝香草酚藍(lán),溶解在100毫升蒸餾水里,滴入少量0.1%氫氧化鉀溶液,使它成為弱堿性溶液而
6、呈藍(lán)色。溴代麝香草酚藍(lán)溶液pH值變色范圍是6.0(黃)~7.6(藍(lán))。待測(cè)物中如果有二氧化碳,會(huì)形成碳酸而使溶液變成黃色。配方二??石灰水在蒸餾水中加入生石灰(氧化鈣),變加邊攪拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈飽和狀態(tài)時(shí)為止。在石灰水澄清后,傾出上層清液,用濾紙過(guò)濾,放在密閉瓶?jī)?nèi)保存。如果測(cè)定的物質(zhì)中有二氧化碳,會(huì)生成碳酸鈣,使石灰水變渾濁。7、檢查細(xì)胞生活力的試劑檢查細(xì)胞有無(wú)生活力,可用中性紅甲基藍(lán)試劑。配制的方法是先分別配制1%中性紅溶液和1%甲基藍(lán)溶液,這兩種溶液各取1份混合,用來(lái)鑒定細(xì)胞的死活。該試劑使活細(xì)胞的
7、液泡染上紅色,而使死細(xì)胞全部染成藍(lán)色。(二)分離液1、肌細(xì)胞分離液配方一??馬克凱郎(Maccallum)液取1份濃硝酸、2份甘油、3份水,混合后就得到馬克凱郎液。把新鮮的肌肉組織小塊(橫紋肌、心肌和平滑肌)投入這種溶液里浸漬,分離時(shí)間需1~3日。這種溶液尤其適于分離橫紋肌核心肌細(xì)胞。配方二??氫氧化鉀溶液取35克氫氧化鉀,放在100毫升蒸餾水中,加熱,使它完全溶解后,在室溫下冷卻。把新鮮的肌肉組織塊投入氫氧化鉀溶液中,浸泡15~30分鐘后,肌細(xì)胞便可分離。2、上皮細(xì)胞分離液配方一??福爾馬林—氯化鉀溶液稱(chēng)取58.44
8、克氯化鈉,用蒸餾水溶解,再稀釋到1000毫升,加入2毫升福爾馬林。這種溶液是很好的上皮細(xì)胞分離液,分離很迅速,而且能保護(hù)纖細(xì)的上皮細(xì)胞纖毛。小腸和氣管的上皮組織小塊,放在此溶液里2小時(shí)即可分離,口腔和皮膚上皮組織小塊的細(xì)胞分離一般需3日左右。配方二??水和氯醛溶液稱(chēng)取5克水和氯醛,用蒸餾水溶解,再稀釋到100毫升,就得到5%水合氯