基于納米材料的腫瘤活體熒光成像以及光動力學(xué)治療研究

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1、為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場安保新項目的正常、順利開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個人素質(zhì)的培訓(xùn)計劃基于納米材料的腫瘤活體熒光成像以及光動力學(xué)治療研究　　活體動物體內(nèi)生物發(fā)光和熒光成像技術(shù)　　基礎(chǔ)原理與應(yīng)用簡介　　文章來自中國生物器材網(wǎng)　　文章目錄：　　一、活體生物發(fā)光成像技術(shù)　　二、活體動物熒光成像技術(shù)　　三、生物發(fā)光成像與熒光成像的比較　　四、活體動物可見光成像儀器原理與操作流程目的-通過該培訓(xùn)員工可對保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障

2、停車場安保新項目的正常、順利開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個人素質(zhì)的培訓(xùn)計劃　　活體動物體內(nèi)成像技術(shù)是指應(yīng)用影像學(xué)方法，對活體狀態(tài)下的生物過程進行組織、細胞和分子水平的定性和定量研究的技術(shù)?；铙w動物體內(nèi)成像技術(shù)主要分為可見光成像(opticalimaging)、核素成像、核磁共振成像和超聲成像、計算機斷層攝影或Cyt及dyes等熒光染料進行標記，利用熒光蛋白或染料產(chǎn)生的熒光就可以形成體內(nèi)的熒光光源。前者是動物體內(nèi)的自發(fā)光，不需要激發(fā)光源，可通過高度靈敏的CCD直接捕捉光信號，而后者則需要外界激發(fā)光源的激發(fā)才可以捕捉發(fā)光信號。傳統(tǒng)的動物實驗方法

3、需要在不同的時間點宰殺實驗動物以獲得數(shù)據(jù),得到多個時間點的實驗結(jié)果。相比之下，體內(nèi)可見光成像技術(shù)通過對同一組實驗對象在不同時間點進行記錄，跟蹤同一觀察目標的移動及變化，所得的數(shù)據(jù)也更加真實可信。另外,這一技術(shù)由于不涉及放射性物質(zhì)，具有操作簡單，所得結(jié)果直觀，靈敏度高等特點,在剛剛發(fā)展起來的幾年時間內(nèi)，已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開發(fā)等方面?！　∫?、活體生物發(fā)光成像技術(shù)　　技術(shù)原理　　1.標記原理　　哺乳動物生物發(fā)光，一般是將Fireflyluciferase基因即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細胞染色體DNA上以表達熒光素酶，培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達

4、熒光素酶的細胞株，當細胞分裂、轉(zhuǎn)移、分化時,熒光素酶也會得到持續(xù)穩(wěn)定的表達?；?、細胞和活體動物都可被熒光素酶基因標記。將標記好的細胞接種到實驗動物體內(nèi)后，當外源給予其底物熒光素(luciferin)，即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象。這種酶在ATP，氧存在的條件下，催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光，因此只有在活細胞內(nèi)才會產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象，并且發(fā)光光強度與標記細胞的數(shù)目線性相關(guān)。目的-通過該培訓(xùn)員工可對保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場安保新項目的正常、順利

5、開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個人素質(zhì)的培訓(xùn)計劃　　除FireflyLuciferase外，有時也會用到RenillaLuciferase。二者的底物不一樣，前者的底物是熒光素，后者的底物是coelentarizine。二者的發(fā)光波長不一樣，前者所發(fā)的光波長在540~600nm，后者所發(fā)的光波長在460~540nm左右。前者所發(fā)的光更容易透過組織，后者在體內(nèi)的代謝比前者快，而且特異性沒有前者好，所以大部分活體實驗使用FireflyLuciferase作為報告基因，如果需要雙標記，也可采用后者作為備選方案?！　晒馑孛傅陌l(fā)光是生物發(fā)光，不需要激

6、發(fā)光，但需要底物熒光素。熒光素在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng)，生成氧化熒光素(oxyluciferin)，并產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象。　　對于細菌標記，一般利用發(fā)光酶基因操縱子luxABCDE或luxCDABE，其由控制的編碼熒光素酶的基因和編碼熒光素酶底物合成酶的基因組成。利用這種辦法進行標記的細菌會持續(xù)發(fā)光，不需要外源性底物。但是一般細菌標記需要轉(zhuǎn)座子的幫助把外源基因插入到細菌染色體內(nèi)穩(wěn)定表達。　　2.底物熒光素的特點　　熒光素由于諸多優(yōu)點得到廣大科研人員的青睞，主要特點如下：　　(1)熒光素不會影響動物的正常生理功能?！　?2)熒光素是28

7、0道爾頓的小分子，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透細胞膜和血腦屏障。目的-通過該培訓(xùn)員工可對保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場安保新項目的正常、順利開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個人素質(zhì)的培訓(xùn)計劃　　(3)熒光素在體內(nèi)擴散速度快，可通過腹腔注射或尾部靜脈注射進入動物體內(nèi)。腹腔注射擴散較慢，持續(xù)發(fā)光長。熒光素腹腔注射老鼠后約1min后表達熒光素酶的細胞開始發(fā)光，10min后強度達到穩(wěn)定的最高點，在最高點持續(xù)約20~30min后開始衰減，約3

8、h后熒光素排除，發(fā)光全部消失，最佳檢測時間是在注射后15~35min之間；若進行熒光素靜脈注射，擴散快，但發(fā)光持續(xù)時間很短