ms培養(yǎng)基配方83357

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1、MS培養(yǎng)基配方成分分子量使川濃度(mg/L)大量元素硝酸鉀KN03101.111900硝酸鞍NH4NO380.041650磷酸二氫鉀KH2PO4136.09170硫酸鎂MgSO4.7H2O246.47370氯化鈣CaCI2.2H2O147.02440微量元素碘化鉀KI166.010.83硼酸H3BO361.836.2硫酸猛MnSO4.4H2O223.0122.3硫酸鋅ZnSO4.7H2O287.548.6鉗酸鈉Na2Mo04.2H2O241.950.25硫酸銅CuSO4.5H2O249.680.025氯化鉆

2、COCI2.62237.930.025恢鹽乙二胺四乙酸二鈉Na2.EDTA372.2537.3硫酸亞鐵FeSO24.7H2O278.0327.8有機(jī)成分肌醇100甘氨酸2鹽酸硫胺索VB10.1鹽酸毗哆醇VB60.5煙酸VB5或VPP0.5蔗糖sucrose342.3130g/L瓊脂agar7g/LMS培養(yǎng)基是目前普遍使用的培養(yǎng)基.它有較高的無機(jī)鹽濃度.對保證組織牛長所需的礦質(zhì)營養(yǎng)和加速愈傷組織的生長十分有利.由于配方屮的離子濃度高?在配制.貯存.消毒等過程屮.即使有些成分略有出入.也不致影響離子間的平衡.M

3、S固休培養(yǎng)基可用來誘導(dǎo)愈傷組織.或用于胚?莖段?莖尖及花藥培養(yǎng)?它的液體培養(yǎng)基用于細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時能獲得明顯成功?這種培養(yǎng)基屮的無機(jī)養(yǎng)分的數(shù)量和比例比較合適?足以滿足植物細(xì)胞在營養(yǎng)上和生理上的需要.說明:表屮各培養(yǎng)基配方中?均未列出鐵鹽?關(guān)于鐵鹽配方?除尼許培養(yǎng)基為檸檬酸鐵10毫克/升外.其余均為:5.57克的FeSO4-7H2O(硫酸亞鐵)和7.45克的Na2?EDTA(乙胺四乙酸二鈉)溶于1升水的溶液.5毫升/升.須再添加氨基酸?酪蛋白水解物?酵母捉収物及椰子汁籌有機(jī)附加成分.與其它培養(yǎng)基的基木成分相比.

4、MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽?鉀和鞍的含量高?這是它的明顯特點.植物組織培養(yǎng)中常用的一種培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基。MS培養(yǎng)基的配制包括以下步驟。培養(yǎng)基母液的配制和保存MS培養(yǎng)基含有近30種營養(yǎng)成分,為了避免每次配制培養(yǎng)基都要對這兒十種成分進(jìn)行稱量,可將培養(yǎng)基中的各種成分,按原量的20借或200倍分別稱量,配成濃縮液,這種濃縮液叫做培養(yǎng)基母液。這樣每次使用時,取其總量的1/20(50mL)或1/200(5mL),加水稀釋,制成培養(yǎng)液?,F(xiàn)將制備培養(yǎng)基母液所需的各類物質(zhì)的量列出,供配制時使用。NH4NO333000KN0338

5、000CaCI2-2H2O8800MgSO4-7H2O7400KH2PO43400微量元素(母液II)KI166H3BO31240MnSO4*4H2O4460ZnSO4-7H2O1720Na2MoO4-2H2O50CuSO4-5H2O5CoCI2-6H2O5鐵鹽(母液III)FeSO4-7H2O5560Na2-EDTA-2H2O7460有機(jī)成分(母液IV)IVA肌醇20000IVB鹽酸毗哆醇(維牛素B6)100鹽酸硫胺素(維牛素B1)100廿氨酸400以上各種營養(yǎng)成分的用量,除了母液I為20倍濃縮液外,其余

6、的均為200倍濃縮液。上述幾種母液都要單獨配成1L的貯備液。其中,母液I、母液I[及母液IV的配制方法是:每種母液屮的兒種成分稱量完畢后,分別用少量的蒸徭水徹底溶解,然后再將它們混溶,最后定容到1L。母液III的配制方法是:將稱好的FeSO4?7H2O和Na2?EDTA£H2O分別放到450mL蒸懈水中,邊加熱邊不斷攪拌使它們?nèi)芙?,然后將兩種溶液混合,并將pH調(diào)?至55,最后定容到1L,保存在棕色玻璃瓶中。各種母液配完后,分別用玻璃瓶貯存,并且貼上標(biāo)簽,注明母液號、配制倍數(shù)、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。M

7、S培養(yǎng)基中述需要加入2,4■二氯苯氧乙酸(2,4?D)、荼乙酸(NAA)、6節(jié)基瞟吟(6BA)等植物牛長調(diào)節(jié)物質(zhì),并且分別配成母液(01mg/fnL)o其配制方法是:分別稱取這3種物質(zhì)各10mg,將2,4?D和NAA川少量(1mL)無水乙醉預(yù)溶,將6BA川少量(1mL)的物質(zhì)的量濃度為0.1mol/L的NaOH溶液溶解,溶解過程需要水浴加熱,最后分別定容至100mL,即得質(zhì)量濃度為01mg/fnL的母液。配制培養(yǎng)液用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的川量:母液I為50mL,磁II、III、IVA和IVB

8、各5mLo再取2,4D5mL.NAA1mL,與各種母液一起放入燒杯屮。配制培養(yǎng)液時應(yīng)注意:①在使用捉前配制的母液時,應(yīng)在量取各種母液Z前,輕輕搖動盛放母液的瓶子,如杲發(fā)現(xiàn)瓶中有沉淀、懸浮物或被微生物污染,應(yīng)立即淘汰這種母液,重新迓行配制;②用量筒或移液管量取培養(yǎng)基母液之前,必須川所暈取的母液將暈筒或移液管潤洗2次;③量取母液時,最好將各種母液按將要量取的順序?qū)懺诩埳?,量?種,劃掉1種,以免出錯。溶化瓊脂用粗天平

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