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《ms培養(yǎng)基環(huán)節(jié)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、植物組織培養(yǎng)基母液配制的若干關鍵環(huán)節(jié)植物組織培養(yǎng)(planttissueculture)是指植物的任何器官、組織或細胞，在人工預知的控制條件下，放在含冇營養(yǎng)物質(zhì)和植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)等組成的培養(yǎng)基屮，使其生長、分化形成完整植株的過程.植物組織培養(yǎng)具冇取材少，培養(yǎng)材料經(jīng)濟；人為控制培養(yǎng)條件，不受自然條件影響；生長周期短，繁殖率高；管理方便，利于自動化控制等特點?因而被廣泛應用丁?各種植物的快速繁殖Z屮.培養(yǎng)基母液，也叫濃縮貯備液.它是以培養(yǎng)基配方配制成的高倍的濃縮液，不同組分母液，它的濃縮倍數(shù)不同，一般最低為10倍，高的冇50倍、100倍、200倍，其至1000倍.母液是一個方法比較簡便、
2、用量比較準確且被廣泛采用的配制方法.本文就如何掌握培養(yǎng)基母液配制的操作要領作一闡述，以供參考.以MS培養(yǎng)基為例，其母液的配制包括大量元素、微量元素、鐵鹽、維生素、氨基酸、植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)和冇機附加物等種類?(見表1)表1MS培養(yǎng)基母液的配制成分規(guī)定用量/mg.L'1擴人倍數(shù)稱取量/mg母液定溶體積/ml配1LMS培養(yǎng)棊吸取量/ml大量元索KNOs19002038000100050NH4NO316502033000100050MgSO4?7H2O370207400100050KH2PO4170203400100050CaCl2?2H2O440208800100050微量兀數(shù)MnSO4?
3、4H2O22.310002230010001ZnSO4?7H2O8.61000860010001H3BO36.21000620010001KI0.83100083010001Na2MoO4?2H2O0.25100025010001CuSO4?5H2O0.02510002510001CoCl2?6H2O0.02510002510001鐵鹽Na2-EDTA37.31003730100010FeSO4?7H2O27.81002780100010維生素和氨基酸甘氨酸2.05010050010Vit.Bi0.150550010Vit.B60.5502550010肌醇10050500050010
4、1大量元素和微量元素母液的配制按規(guī)定用量，稱取所需的各種藥詁，在配制吋為減少工作量，可以把幾種藥品(如大量元素或微量元素)配在同一母液屮(見表1)?但由于各種藥品的混合，可能發(fā)生反應，生成沉淀物，以致母液失效.為避免類似現(xiàn)象發(fā)生，在大量元素、微量元素和維生索及氨基酸的母液配制吋，可采用如下2種做法加以解決：①將要配在同一母液的大量元素、微量元素和維生索及氨基酸等化合物，按“表1”所列藥甜的先后順序溶解藥甜，待前一種藥甜完全溶解后再加入后一種化學藥品，以此類推；②使每種成份分別完全溶解，再把它們彼此混合.2鐵鹽母液的配制鐵鹽的成份含硫酸亞鐵(FeS04?7H2O)和乙二胺四乙酸二鈉(N
5、a2-EDTA).這兩種化合物的溶解和混合較為嚴格，必須按如下方法配制，否則將會產(chǎn)生沉淀.該方法是：分別溶解FeS04?7出0和Na2?EDTA,加熱并不斷攪拌，使之完全溶解，冷卻，將2種溶液混合，調(diào)pH至5.5,用蒸溜水加至所需容積，棕色瓶保存于冰箱之屮.3植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)母液的配制植物牛長調(diào)節(jié)物質(zhì)是培養(yǎng)基的重要組分之一，一般是植物激索類物質(zhì)，如牛長素類的IAA、IBA、NAA,赤霉素類的GA3,細胞分裂素類的2,4?D、KT和6?BA等.由于大多數(shù)生長調(diào)節(jié)物質(zhì)難溶于水，因此配制方法也各不相同：①IAA,IBA和GA3先用少量95%灑精溶解，再加水定容，搖勻后貯于試劑瓶屮、貼上標簽
6、后，存放在冰箱中；②NAA可用熱水或少量95%酒糟溶解，再加水定容至所需容積；③2,4-D可溶于少許lmol?L“的NaOH溶液中，然后加水定容；④KT和6-BAnJ*用少量lmol?L“的HC1溶解，再加水定容；⑤玉米索先溶于少量95%酒精中，然后加水定容.植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)濃度通常用ppm(mg?mF1)和mol?L'1表示，在配制母液吋，常以ppm較為方便，一般配制成0.5ppm的母液，這個濃度既便于計算，也可避免冷藏時形成結晶.4冇機附加物母液的配制在植物組織培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中往往要加入一-些有機附加物，如椰子汁，以促進組織培養(yǎng)活性.曲于椰子汁的活性成分是耐熱的，在配制時，要先把
7、由果實中采集到的汁液加熱煮沸以除去其中的蛋白質(zhì)，過濾，然后置塑料瓶中貯存于的?20°c的低溫冰箱內(nèi).JAZrepressorproteinsarctargetsoftheSCFCOI1complexduringjasmonatcsignalling
