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1、苦瓜籽皂苷的提取工藝及抑菌活性 摘要:主要研究了苦瓜籽皂苷的提取工藝及抑菌活性。通過正交試驗確定苦瓜籽皂苷的最佳工藝條件,即超聲波功率為240W,超聲波提取時間為40min,乙醇濃度為85%,液料比為15,此條件下苦瓜籽皂苷提取率達到1.85%??喙献言碥站哂休^好的抑菌活性,對枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、黑曲霉和根霉的MIC為6.25%,對大腸桿菌的MIC為12.5%,對沙門氏菌和釀酒酵母的MIC為25%?! £P鍵詞:苦瓜籽;皂苷;提?。灰志钚浴 ≈袌D分類號:TS207.3文獻標識碼:ADOI編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2
2、016.07.008 Abstract:Thisstudymainlydiscussedtheextractionofthesaponinfrombittermelonseedsanditsantibacterialactivity.Theoptimumextractionconditionofextractingsaponinfrombittermelonseedswasdeterminedbyorthogonaltest,suchasextractionpowerfor240W,extractiontimefor40min,ethanolconcen
3、trationfor85%,andthesolutionandmaterialratiofor15,andtheextractionyieldreached1.85%.Theresultsshowedthatthesaponinextractedfrombittermelonseedshadstrongantibacterialactivity.TheMICofsaponinfrombittermelonseedswas6.25%toBacillussubtilis,Staphylococcusaureus,Aspergillusnigerand6Rhiz
4、opus,12.5%toEscherichiacoli,and25%toSalmonellaandSaccharomycescerevisiae. Keywords:bittermelonseeds;saponin;extraction;antibacterialactivity 苦瓜集食用和藥用功能于一體,具有清熱解毒、清肝明目之功效[1]??喙现懈缓喙显碥粘煞?,它能夠抑制血糖、抗氧化、增強人體免疫力、降低膽固醇、抗腫瘤和防御艾滋病毒入侵等[2]。除了做制藥原材料外,皂苷還是食品加工、化妝品制造過程中不可或缺的添加物,在空氣殺毒劑、面膜、膨化劑等化
5、工產品中,都可以看到它的存在,是一種十分普及的工業(yè)生產原材料[3-4]。因此,本試驗從苦瓜籽中提取皂苷成分并分析其抑菌活性具有十分重要的應用價值?! ?材料和方法 1.1原料與試劑 苦瓜籽:購自廣東省農業(yè)科學院。花旗參皂苷:購自廣東廣益生物科技公司。乙醇、氫氧化鈣、正丁醇、石油醚、香草醛、冰乙酸氯化鈉、牛肉浸膏、細菌學蛋白胨等:實驗室提供。 1.2試驗儀器與設備 HK-02型小型中藥粉碎機(湖南中誠制藥機械廠);FA1004型電子天平(鄭州華通實業(yè)有限公司);SB-80型超聲波清洗器(天津鑫源儀器儀表有限公司);754型紫外分光光度計(上海譜元儀器
6、有限公司);FDGJ-0.5C型真空冷凍干燥機(南京瑪爾儀器設備有限公司)等。 1.3試驗方法6 1.3.1苦瓜籽皂苷提取工藝加乙醇→苦瓜籽→清洗→粉碎→超聲波浸提→抽濾→減壓濃縮→正丁醇萃取→過大孔樹脂柱→減壓濃縮→冷凍干燥→苦瓜籽皂苷[5-7]?! ?.3.2苦瓜籽皂苷測定采用香草醛-冰乙酸比色法[8]?! 【€性方程為Y=0.0745X-0.0803,R2=0.9994,其中Y指吸光度,X指標準品的濃度。 1.3.3苦瓜籽皂苷提取工藝的優(yōu)化根據(jù)單因素試驗,選取4個因素的最優(yōu)試驗范圍,以皂苷提取率作為優(yōu)化指標,采用正交試驗對苦瓜籽皂苷提取工藝進行優(yōu)
7、化[9-10]?! ?.3.4最小抑菌濃度(MIC)的測定將苦瓜籽皂苷溶液和液體培養(yǎng)基配成濃度分別為100,50,25,12.5,6.25,3.125,1.56g?L-1的液體,對照組設為空白。把25μL菌懸液加進試管,經過一段時間培養(yǎng)后,取出觀察,選取濃度低而無肉眼可見菌生長的一管濃度為苦瓜籽皂苷對該菌的MIC。 2結果與分析 2.1苦瓜籽中皂苷提取條件的優(yōu)化 2.1.1超聲波功率對苦瓜籽皂苷提取效果的影響研究120,160,200,240,280,320W等6個水平的超聲波功率對苦瓜籽皂苷提取效果的影響。由圖1可以看出,超聲波功率為240W時,苦
8、瓜籽皂苷提取率最大,為1.78%,提取效果較好?! ?.1.2超聲