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《大豆皂苷對(duì)d—半乳糖胺和內(nèi)毒素所致小鼠急性肝損傷保護(hù)作用》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、大豆皂昔對(duì)D—半乳糖胺和內(nèi)毒素所致小鼠急性肝損傷保護(hù)作用［摘要］目的：研究大豆皂昔對(duì)D-半乳糖胺（GalN）及內(nèi)毒素（LPS）聯(lián)合誘發(fā)的急性肝損傷的保護(hù)作用。方法:將實(shí)驗(yàn)小鼠按體重隨機(jī)分為5組，即正常組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照水飛薊素組（0.10mmol?kg-1）及大豆皂昔高、低劑量組（0.24,0.12mmol?kg-l）o每日給藥1次，連續(xù)7d0實(shí)驗(yàn)?zāi)┢?，除正常組外，其余組小鼠腹腔注射GalN和LPS建立急性肝損傷模型，蘇木素-伊紅（HE）染色法觀察肝組織病理學(xué)變化，ELISA法檢測(cè)血清腫瘤壞死因子
2、-a（TNF-a）,比色法檢測(cè)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）以及肝臟過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPx）、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶（GST）活性及還原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量和Caspase-3,Caspase-8活化水平。結(jié)果：大豆皂昔明顯降低GalN和LPS聯(lián)合誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠血清ALT,AST活性，減輕肝組織病理?yè)p傷，降低血清TNF-a水平，降低肝N0和MDA水平,升高肝組織CAT,GPx,GST活性和GSH水平，降低肝組織Ca
3、spase-3和Caspase-8活化水平。結(jié)論：大豆皂昔對(duì)GalN和LPS聯(lián)合誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與其抗氧化活性和抗肝細(xì)胞凋亡作用有關(guān)。［關(guān)鍵詞］大豆皂昔；肝損傷；抗氧化；凋亡流行病學(xué)調(diào)查證實(shí)，常食大豆有助于預(yù)防癌癥和心血管疾病的發(fā)生，而這些均與大豆中的異黃酮和皂昔等活性物質(zhì)密切相關(guān)。大豆皂昔是存在于大豆中的一類五環(huán)三菇的糖昔，主要分為A類、B類、E類和DDMP皂昔［1］。具有抗氧化、抗癌、防治心血管疾病及免疫增強(qiáng)等多種藥理作用［2-3］o研究還表明，大豆皂昔對(duì)酒精性肝損傷
4、以及半刀豆球蛋白A所致免疫性肝損傷具有保護(hù)作用［4-5］o本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立D-半乳糖胺（GalN）及內(nèi)毒素（LPS）聯(lián)合誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷模型，觀察大豆皂昔對(duì)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用，為大豆皂昔的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。1材料1.1動(dòng)物昆明小鼠，雄性，體重18?22g,由延邊大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.2藥物和試劑大豆皂昔（純度280%）購(gòu)于華北制藥股份有限公司；GalN及LPS購(gòu)于Sigma公司；水飛薊素購(gòu)于沈陽(yáng)東陵藥業(yè)股份有限公司；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷
5、胱甘肽過(guò)氧化物酶（GPx）、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶（GST）、還原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（N0）及蛋白試劑盒購(gòu)于南京建成科技有限公司；TNF-aELISA試劑盒購(gòu)于武漢博士德公司。1.3儀器3-30K型離心機(jī)（德國(guó)Sigma公司）；S22PC型分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；RT-2100型酶標(biāo)儀（深圳雷杜公司）；ZMN-7803型組織包埋機(jī)（常州市華利電子有限責(zé)任公司）；RM2126型切片機(jī)（上海探卡儀器有限公司）；BA200型生物顯微鏡（中國(guó)麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公
6、司）。2方法1.1動(dòng)物分組及處理將50只小鼠按體重隨機(jī)分為5組，即正常組、模型組、水飛薊素組（0.10nnnol?kg-l）、大豆皂昔高、低劑量組（0.24,0.12mmol?kg-l）0每日灌胃給藥1次，連續(xù)7d,正常組及模型組小鼠則以等體積生理鹽水灌胃。末次給藥1h后，除正常組腹腔注射無(wú)菌生理鹽水外，其余各組小鼠腹腔注射給予2.26mmol?kg-1GalN和10Pg?kg-1LPS（用無(wú)菌生理鹽水配制）。造模期間禁食，不禁水。2.2血清轉(zhuǎn)氨酶及TNF-a水平的檢測(cè)造模1.5h后，分離血清，檢測(cè)
7、小鼠血清TNF-a。造模8h后，分離血清，檢測(cè)小鼠血清ALT,AST活性，并按公式計(jì)算藥物對(duì)TNF-a及轉(zhuǎn)氨酶活性的抑制率。抑制率二（模型組-治療組）/（模型組-正常組）X100%2.3肝組織病理學(xué)檢查造模8h后處死動(dòng)物，取小鼠肝左葉，固定于10%福爾馬林溶液中，常規(guī)石蠟包埋、切片、HE染色，在光鏡下觀察肝組織病理學(xué)變化。2.4肝組織氧化應(yīng)激、抗氧化活力及凋亡相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)4°C裂解肝細(xì)胞，離心取上清。按照各測(cè)試盒操作方法測(cè)定CAT,GPx,GST,GSH,MDA,NO水平以及肝細(xì)胞Caspase-
8、3和Caspase-8活性的相對(duì)活化程度。2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以±s表示，組間均數(shù)比較采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件，進(jìn)行單因素方差分析和Turkey?s多因素t檢驗(yàn)。3結(jié)果1.1大豆皂昔對(duì)急性肝損傷小鼠血清ALT和AST活性的影響與正常組比較，模型組小鼠血清ALT和AST活性明顯升高(P3.3大豆皂昔對(duì)急性肝損傷小鼠血清TNF-a以及肝NO水平的影響與正常組比較，模型組小鼠血清TNF-a和肝NO水平明顯升高(P[7]鄧秀蘭，鐘相根,張曉晶，等.痰熱清注射液對(duì)小鼠免疫性
