SNT2177-2008-危險品哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗方法.pdf

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1、免費標準網(www.freebz.net)標準最全面版權所有·禁止翻制、電子傳閱、發(fā)售中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準犛犖/犜2177—2008危險品哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗方法犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犻狀狏犻狏狅犿犪犿犿犪犾犻犪狀犫狅狀犲犿犪狉狉狅狑犮犺狉狅犿狅狊狅犿犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀犳狅狉犱犪狀犵犲狉狅狌狊犵狅狅犱狊20080904發(fā)布20090316實施中華人民共和國發(fā)布國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局免費標準網(www.freebz.net)無需注冊即可下載免費標準網(www.freebz.net)標準最全面版權所有·禁止翻制、電子傳閱、發(fā)售犛犖

2、/犜2177—2008前言本標準修改采用聯合國經濟合作與發(fā)展組織(OECD)化學品測試方法No.475《哺乳動物骨髓染色體畸變試驗》(1997)。本標準與OECD化學品測試方法No.475相比,存在以下差異:———對OECD化學品測試方法No.475進行了編輯性修改;———增加了前言部分;———增加了定義部分;———刪掉了試驗報告部分。本標準由中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局提出。本標準由國家認證認可監(jiān)督管理委員會歸口。本標準負責起草單位:中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫局。本標準參加起草單位:中化化工標準化研究所。本標準主要起草人:張園、趙好力寶、于智睿、趙琢

3、、熊中強、李學洋。本標準系首次發(fā)布的出入境檢驗檢疫行業(yè)標準。Ⅰ免費標準網(www.freebz.net)無需注冊即可下載免費標準網(www.freebz.net)標準最全面版權所有·禁止翻制、電子傳閱、發(fā)售犛犖/犜2177—2008危險品哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗方法1范圍本標準規(guī)定了體內哺乳動物骨髓染色體畸變試驗的術語和定義、試劑和儀器、試驗方法、試驗結果及結果評價。本標準適用于檢測化學品對骨髓細胞的致突變性。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,

4、然而,鼓勵根據本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本標準。GB14924.1實驗動物配合飼料通用質量標準GB14925實驗動物環(huán)境及設施衛(wèi)生部《消毒技術規(guī)范》3術語和定義下列術語和定義適用于本標準。3.1染色單體型畸變犮犺狉狅犿犪狋犻犱狋狔狆犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀染色體結構損傷,表現為染色單體斷裂或染色單體斷裂重組的損傷。3.2染色體型畸變犮犺狉狅犿狅狊狅犿犲狋狔狆犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀染色體結構損傷,表現為在兩個染色單體的相同位點均出現斷裂或斷裂重組的改變。3.3核內復制犲狀犱狅狉犲犱狌狆犾犻犮犪狋犻狅狀

5、在DNA復制的S期之后,細胞核未進行有絲分裂就開始了另一個S期的過程。其結果是染色體有4,8,16……倍的染色質。3.4裂隙犵犪狆染色體或染色單體損傷的長度小于一個染色單體的寬度,為染色單體的最小的錯誤排列。3.5染色體數目畸變犮犺狉狅犿狅狊狅犿犪犾狀狌犿犲狉犻犮犪犾犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀染色體數目發(fā)生改變,不同于正常核型。3.6多倍體狆狅犾狔狆犾狅犻犱狔哺乳動物染色體數目正常是二倍體,在化學誘變劑的作用下,染色體數目成倍地增加成三倍體、四倍體等。1免費標準網(www.freebz.net)無需注冊即可下載免費標準網(www.freebz.net)標準最全面版權所有·禁

6、止翻制、電子傳閱、發(fā)售犛犖/犜2177—20083.7染色體結構的畸變犮犺狉狅犿狅狊狅犿犪犾狊狋狉狌犮狋狌狉犲犪犫犲狉狉犪狋犻狅狀通過顯微鏡可以直接觀察到的發(fā)生在細胞有絲分裂中期的染色體的結構變化。如染色體中間缺失和斷片,染色體互換和內交換等。3.8最高劑量犺犻犵犺犲狊狋犱狅狊犲產生毒性體征的劑量,更高劑量將引發(fā)試驗動物死亡。4試劑和儀器4.1試劑———0.1%秋水仙堿;———0.9%氯化鈉溶液;———0.075mol/L氯化鉀溶液;———固定液:甲醇與冰乙酸以3∶1混合,臨用時現配;———姬姆薩(Giemsa)染液、姬姆薩應用液,配制方法見《消毒技術規(guī)范》;———磷

7、酸鹽緩沖液(pH7.4),配制方法見《消毒技術規(guī)范》。4.2儀器和器材實驗室常用設備、生物顯微鏡、恒溫水浴箱37℃±5℃、離心機、解剖剪、鑷子、注射器、灌胃針頭、離心管、吸管、滴管、試管架、載玻片、塑料吸瓶、干凈紗布、濾紙等。5試驗方法5.1試驗動物成年小鼠(體重25g~30g),或大鼠(體重180g~220g)。每個劑量組每個性別動物不少于5只。試驗動物飼養(yǎng)條件應符合GB14924.1和GB14925有關規(guī)定。5.2劑量分組應進行預試驗以選擇最高劑量,為避免出現假陰性結果應適當增大劑量范圍。如果受試樣品具有毒性,應在第一個采樣時間點設三個劑量,設置

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