昆蟲病原線蟲steinernema+akhursti所攜帶共生菌的鑒定與描述

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1、周凱中山大學碩士學位論文題目：昆蟲病原線蟲Steinernemaakhursti所攜帶共生菌的鑒定與描述專業(yè)：微生物學碩士生：周凱指導老師：邱禮鴻副教授摘要致病桿菌屬(Xenorhabdus)和發(fā)光桿菌屬(Photorhabdus)細菌存在于昆蟲病原線蟲腸道內(nèi)并與之互惠共生。這類細菌能產(chǎn)生多種有生物活性的次級代謝產(chǎn)物，包括殺蟲毒素、抗生素、抗癌藥物等，已成為一類新型的具有開發(fā)潛力和應用前景的生物資源。為此，人們越來越重視對共生菌的采集、分離以及分類鑒定工作。本研究采用16SrDNA系統(tǒng)分析結(jié)合形態(tài)與生理生化鑒定的方法，對本室最近定名的一個采自我國云南省的昆蟲病原線蟲新種S

2、teinernemaakhursti所攜帶的共生菌進行了分類鑒定與描述。通過反復分離純化獲得了三號&akhursti線蟲所攜帶共生菌的初生型和次生型菌株；采用PCR擴增得到這些菌株的16SrDNA部分序列并與GenBank中登錄的已定名致病桿菌屬細菌的同源序列進行比對，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹；同時以API細菌鑒定試劑條為主對這些菌株的生理生化特性進行了測試比較。16SrDNA序列分析與表型分析結(jié)果一致顯示Sakhursti所攜帶的共生菌很可能是致病桿菌屬的一個新種，與丑japonica近緣。本研究為進一步研究和開發(fā)利用昆蟲病原線蟲&akhursti及其所攜帶的共生菌打下了堅實的基

3、礎。關(guān)鍵詞：昆蟲病原線蟲共生細菌，16SrDNA，分類鑒定，生物資源旦塑主些查蘭堡主蘭垡墮塞墊竺———————一Title：IdentificationandDescriptionoftheSymbioticBacteriaofanEntomopathogenicNematodeSteinernemaakhurstiMajor：MicrobiologyName：ZhOHKaiSupervisor：OiuLinghongAssociateProfessorAbstractXeno，^口bduJandPhotorhabdusalesymbioticbacteria(SB)of

4、entomopathogenicnematodes(EN)．Thesebacteriahavebecomeimportantbioresourcesastheyproducemanybioactivesubstances，suchasinsecticidaltoxins，antibioticsandpharmaceutics．Collectionandcorrectidentificationofthesymbioticbacteriaiscriticalforallrelatedstudies．Inthepresentstudy,thesymbioticbacteria

5、ofStienernemaakhursti，anEPNspeciesrecentlydescribedbythislab，wasidentifiedanddescribedbyapolyphasicapproachinvolvedphylogeneticanalysesof16SrDNAandphenotypiccharacterization．Boththegeneticandphenotypicdataobtainedshowedcongludientlythatthesymbioticbacteriaof&akhurstiarelikelytobeanewspeci

6、esofXenorhabdusclosedtoZjaponica．ThepresentstudyunveiledthetaxonomicstatusofthesymbioticbacteriaofS．a(chǎn)khursti，whichsetsasolidfoundationforfurtherstudyandutilizationofthebacteriaanditshostnematodeKeywords：symbioticbacteriaofentomopathogenicnematodes，16SrDNA，identification，bioresourceII周凱中山大

7、學碩士學位論文月U吾昆蟲病原線蟲共生細菌是一類存在于昆蟲病原線蟲腸道并與之互惠共生的革蘭氏陰性細菌，屬于腸桿菌科(Thomas＆Poinar，1979)，兼性厭氧。目前，該共生細菌總共包括兩個屬，分別為致病桿菌屬(XenOrhabdus)和發(fā)光桿菌屬(Photorhabdus)。其中致病桿菌屬與斯氏屬(Steinernema)線蟲共生，而發(fā)光桿菌屬與異小桿屬(Hetororflabditis)線蟲共生(Poinar，1990)。近年來，隨著對昆蟲病原線蟲及其共生菌研究的不斷深入，共生細菌的多種生物學功能不斷被發(fā)現(xiàn)。在自然界中，