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《mir164c和mir168a的表達(dá)與種子活力的關(guān)系研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、目錄摘要??????????????????????????．．IAbstract．???．．．．．?．?．?．．?．??．??．??．?．．．．?．??．．?．?．．?．????．．．III1文獻(xiàn)綜述???????????????????????．．11．1植物miRNA的研究進(jìn)展???????????????11．1．1植物miRNA的發(fā)現(xiàn)?????????．??????11．1．2植物miRNA的形成與作用機(jī)制?????????．11．1．3植物miRNA的生物學(xué)功能????????????41．1．4植物miR
2、NA的研究方法????????????．．71．2種子活力及其調(diào)控?????????????????141．2．1種子活力的形成及其生理機(jī)制?????????．．141．2．2貯藏過程中種子活力的變化及其生理機(jī)制????一141．2．3種子活力的調(diào)控???????????????．．151．3本研究的目的與意義????????????????162材料與方法??????????????????????172．1實(shí)驗(yàn)材料??????????????j??：?????．．172．1．1植物材料???????????????
3、????172．1．2菌種及質(zhì)粒??????????????????172．1．3引物序列???????????????????172．1．4試劑和試劑盒?????????????????182．1．5儀器與設(shè)備??????????????????202．2實(shí)驗(yàn)方法?????????????????????．202．2．1種子的干燥與老化處理?????????????202．2．2種子萌發(fā)率的測(cè)定????????．．??????．212．2．3miRl64c和1NRl68a表達(dá)量的Real．timeqPCR檢測(cè)?212
4、．2．4miRl64c、miRl68a沉默載體的構(gòu)建???????一242．2．5miRl64c、miRl68a過表達(dá)載體構(gòu)建???????．．312．2．6農(nóng)桿菌介導(dǎo)的目的基因的kasalath遺傳轉(zhuǎn)化????323結(jié)果與分析??????????????????????363．1miRl64c和miRl68a表達(dá)與擬南芥種子耐老化能力的關(guān)系363．1～擬南芥miRl64c與miRl68a突變體種子和野生型種子耐老化能力的差異?????????????????．363．1．2擬南芥突變體種子和野生型種子的miRl64c
5、和miRl68a的表達(dá)量差異???????????????．373．2miRl64c和miRl68a的表達(dá)與水稻種子活力的關(guān)系???383．2．1水稻種子發(fā)育過程中種子活力形成與miRl64c和miRl68a表達(dá)量變化的關(guān)系?????????????．383．2．2自然貯藏條件下水稻種子的活力變化與miRl64c和miRl68a表達(dá)量的關(guān)系???????????????．413．3miRl64c和miRl68a過表達(dá)和沉默基因的水稻(kasalath)遺傳轉(zhuǎn)化???????????????????????423．3．1
6、miRl64c和miRl68a過表達(dá)和沉默基因的克隆與改造423．3．2miRl64c和miRl68a過表達(dá)載體和沉默載體的構(gòu)建．．433．3．3農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻kasalath的遺傳轉(zhuǎn)化??????443．3．4轉(zhuǎn)基因水稻的分子鑒定????????????一453．4T0代轉(zhuǎn)基因植株的表型初步觀察???????????474討論?????????????????????????????????．49參考文獻(xiàn)????????????????????????一51附錄一??????????????????????????
7、58附錄二?????????????????????????．．64致謝????????????????????????????65湖南師范大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明?????????????．．66miRl64c和miRl68a的表達(dá)與種子活力的關(guān)系研究1文獻(xiàn)綜述1．1植物miRNA的研究進(jìn)展1．1．1植物miRNA的發(fā)現(xiàn)繼1993年，Ambros研究小組的Lee[1】等人用遺傳分析法在秀麗線蟲(c．elegents)中首次發(fā)現(xiàn)了miRNA之后，2002年，Reinhart[2】首次從擬南芥中克隆到miRNA，由此開啟了
8、研究植物miRNA的大門。到目前為止，已經(jīng)在擬南芥(Arabidopsisthaliana)、水稻(Oryzasative)、玉米(Zeamays)、苔蘚(bryophyta)、煙草(Nicotianatabacum)、卷柏(Selaginellamoellendorffii)等【2‘6】植物中發(fā)現(xiàn)了大量的miRNA。迄今為止，m
