as2o3對(duì)大鼠睪丸支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的影響

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1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文As203對(duì)大鼠睪丸支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的影響．^上．·J一刖茜砷是一種類金屬元素，在自然界中廣泛存在，其毒性由小到大依次為砷化合物、五價(jià)砷、砷酸鹽、亞砷酸鹽(無(wú)機(jī))、氧化砷(三價(jià))。人體攝入砷的途徑主要是飲水和飲食，食物中包含無(wú)機(jī)砷和有機(jī)砷，而飲水中的砷主要以無(wú)機(jī)砷的形式存在Ⅲ。地殼中的砷礦通過(guò)與地下水接觸，很容易釋放出來(lái)導(dǎo)致地下水被污染，導(dǎo)致某些地區(qū)天然水含砷量過(guò)高。長(zhǎng)期居住在這種高砷環(huán)境中的人們不可避免的攝入過(guò)量的砷而引起地方性砷中毒。其中地方性砷中毒最嚴(yán)重的國(guó)家是中國(guó)、孟加拉國(guó)和印度。中國(guó)地方性砷中毒病區(qū)主要是山西、內(nèi)蒙古、貴州等十省，其中山西、內(nèi)蒙古以

2、飲水型砷中毒為最嚴(yán)重，貴州以燃煤型砷中毒最嚴(yán)重心1。除上述高砷地區(qū)外，日常生活中也經(jīng)常接觸到砷化合物，馮江西3通過(guò)測(cè)定中草藥微量元素發(fā)現(xiàn)，大部分中草藥都含砷，少部分含砷較高，根據(jù)我國(guó)食品中砷含量允許標(biāo)準(zhǔn)H’，許多中藥的含砷量均超標(biāo)。這種情況下，多種常用含砷中草藥、中成藥的服用中，人們常擅自加大劑量和延長(zhǎng)用藥時(shí)間，導(dǎo)致超劑量服用所致砷急、慢性中毒均有報(bào)道睛1，其所致不良反應(yīng)及中毒現(xiàn)象主要表現(xiàn)為心功能紊亂、血糖血鉀過(guò)低、呼吸衰竭、白細(xì)胞增多、皮膚干瘁著色、嘔吐腹瀉，末梢神經(jīng)反應(yīng)，骨關(guān)節(jié)疼痛，肝功能損害等№1。本教研室前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，慢性接觸As203可導(dǎo)致大鼠睪丸組織明顯病理性損害和每日

3、精子生成量下降，且損害程度呈劑量依賴性；慢性接觸As203可誘導(dǎo)大鼠生精細(xì)胞凋亡增加，二者存在劑量．效應(yīng)關(guān)系，生精細(xì)胞凋亡增加可能是導(dǎo)致大鼠精子數(shù)量減少的原因之一訂1。支持細(xì)胞是睪丸內(nèi)唯一與各級(jí)生精細(xì)胞直接、緊密相貼細(xì)胞，在生精過(guò)程中起到至關(guān)重要的調(diào)控作用。支持細(xì)胞參與了精子發(fā)生所需的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，為生精細(xì)胞提供各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。通過(guò)收縮微管、微絲使生精細(xì)胞向生精小管管腔移動(dòng)，促使精子細(xì)胞釋放入生精小管管腔。支持細(xì)胞是生精細(xì)胞的支架，對(duì)生精細(xì)胞起到支持作用。能合成和分泌多種蛋白，其中雄激素結(jié)合蛋白能夠維持生精小管內(nèi)的雄激素在一個(gè)較高的水遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文As203對(duì)大鼠睪丸支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)

4、和功能的影響曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼舅I一一一II；．一．一一；IIII_IIII甍平，以促進(jìn)精子的發(fā)生，支持細(xì)胞合成和分泌抑制素，抑制垂體前葉合成和分泌卵泡刺激素。支持細(xì)胞還能吞噬和清除凋亡的生殖細(xì)胞以及精子成熟過(guò)程中脫落下來(lái)的殘余胞質(zhì)以維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定呻1，吞噬的殘余胞質(zhì)富含脂肪，能夠作為類固醇激素合成的原料。支持細(xì)胞間通過(guò)緊密連接形成血睪屏障，阻止大分子物質(zhì)通過(guò)血睪屏障，為生精細(xì)胞的健康發(fā)育提供有利的微環(huán)境。通過(guò)給予雄性大鼠睪丸組織一定量的甘油后觀察發(fā)現(xiàn)，生精功能受影響。但對(duì)細(xì)胞類固醇激素的產(chǎn)生，血清卵泡刺激素、黃體生成素和睪酮的水平以及第二性征的作用并不明顯，通過(guò)熒光共聚焦顯

5、微鏡觀察發(fā)現(xiàn)經(jīng)甘油處理后的大鼠支持細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白、閉鎖蛋白、微管微絲構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)被破壞四1，表明甘油的作用目標(biāo)是這些分子。用秋水仙素破壞支持細(xì)胞的微管后，支持細(xì)胞遭到破壞、精子數(shù)量減少、畸形率增加，說(shuō)明微管在精子發(fā)生過(guò)程中起到很重要的作用n引。抑制素B主要由睪丸支持細(xì)胞產(chǎn)生，可以負(fù)反饋調(diào)節(jié)卵泡刺激素的合成與分泌，抑制素B水平與卵泡刺激素水平呈負(fù)相關(guān)，與精子形態(tài)呈正相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，抑制素B能較好的反映隱睪患者的生精功能?1，目前已將抑制素B作為評(píng)價(jià)睪丸生精功能的常規(guī)指標(biāo)。三氧化二砷也可以造成生殖系統(tǒng)的損傷，但查閱文獻(xiàn)未發(fā)現(xiàn)三氧化二砷影響睪丸支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能報(bào)道，三氧化二砷能否通過(guò)改變

6、支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)、功能來(lái)影響生殖過(guò)程?本項(xiàng)目擬通過(guò)檢測(cè)三氧化二砷對(duì)支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的影響，探討三氧化二砷對(duì)生殖功能損傷的作用機(jī)制。9遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文As203對(duì)大鼠睪丸支持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的影響1材料與方法1．1主要實(shí)驗(yàn)材料健康雄性Sprague—Dawley大鼠，清潔級(jí)，24只，體重2009±109，購(gòu)于第三軍醫(yī)大學(xué)野戰(zhàn)外科研究所動(dòng)物中心，許可證號(hào)：SCXK(渝)2007．0005。1．2主要實(shí)驗(yàn)試劑1．2．1主要藥品As203美國(guó)Sigma公司水合氯醛生工生物工程(上海)有限公司DEPC美國(guó)Sigma公司Chloralhydrate睪酮(T)放免試劑盒天津九鼎生物制品有限公司

7、大鼠抑制素B(INH-B)E1isa試劑盒美國(guó)R＆D公司多聚甲醛成都科龍?jiān)噭┕緹o(wú)水乙醇成都市科龍化工試劑廠1．2．2主要儀器H-7650型透射電子顯微鏡日本HitachiBSl10S型電子天平北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司Perkin-Elmer3110型原子吸收光譜儀美國(guó)PerkinElmer公司光明牌101型電熱鼓風(fēng)干燥箱北京永光明醫(yī)療儀器廠GC．1200r放射免疫計(jì)數(shù)器中國(guó)科技大學(xué)中佳公司Leica-RM2135型切片機(jī)德國(guó)Leica公司DB型不銹鋼電熱板常州市