化學(xué)去細(xì)胞神經(jīng)與自體神經(jīng)移植橋接修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損的對(duì)比研究

化學(xué)去細(xì)胞神經(jīng)與自體神經(jīng)移植橋接修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損的對(duì)比研究

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時(shí)間:2019-02-03

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1、bychemicalextraction.Theresultofthegroupthattreatedwiththeautograftsisbetterthanthegrouptreatedwiththeacellularnervesegments·KeywordsAcellular;Sciaticnerve;Nervegap;Nervetransfer;Nerveregeneration;Tissueengineering;Rats7·英文縮略語·_————————————_——_—————————————一英文縮寫英文全稱中文全稱一————————————————————————————

2、———一PBSPhosphatebufferedsolution磷酸鹽緩沖液SPFSFI臟NCVSpecificpathogenfree無特定病原體SciaticnerVe缸lctionindex坐骨神經(jīng)指數(shù)Hematoxylinandeosin蘇木精一伊紅NeⅣeconductionvelocity神經(jīng)傳導(dǎo)速度CMAPCompoundmuscleactionpotential復(fù)合肌肉動(dòng)作電位SPSSSatisticalpakageforthesocialscience社會(huì)科學(xué)軟件統(tǒng)計(jì)包8·論文·化學(xué)去細(xì)胞神經(jīng)與自體神經(jīng)移植橋接修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損的對(duì)比研究=-gr,皇}n,看周圍神經(jīng)損傷并

3、形成缺損會(huì)給患者帶來嚴(yán)重的肢體功能障礙,治療仍然面臨著巨大挑戰(zhàn)。神經(jīng)缺損的距離超過神經(jīng)直徑4倍者通常需要神經(jīng)移植。到目前為止,自體神經(jīng)移植是最基本和最可靠的方法,仍作為神經(jīng)缺損修復(fù)的“金標(biāo)準(zhǔn)"。但是由于自體神經(jīng)來源有限,移植神經(jīng)多為腓腸神經(jīng)等細(xì)小的皮神經(jīng),無法滿足較大神經(jīng)缺損和廣泛神經(jīng)缺損修復(fù)的需要,且會(huì)導(dǎo)致供區(qū)感覺神經(jīng)新的功能喪失,瘢痕形成和神經(jīng)瘤性疼痛,這些缺點(diǎn)限制了其在臨床上的廣泛應(yīng)用。因此,人們一直在努力尋找自體神經(jīng)的替代物來橋接神經(jīng)缺損。自1880年(}luck、Vanlain首先報(bào)道用脫鈣骨制成的骨性支架橋接周圍神經(jīng)缺損以來,多種天然及合成材料被用來橋接周圍神經(jīng)缺損,如硅膠管、聚

4、乳酸、聚乙醇酸、聚乳糖、殼聚糖、血管、骨骼肌、膜管等。但是,這些材料也有導(dǎo)致局部酸性環(huán)境,缺乏細(xì)胞識(shí)別信號(hào),吸收瘢痕、組織增生及粘連等缺點(diǎn)。近年來很多學(xué)者轉(zhuǎn)而探索異體神經(jīng)移植修復(fù)神經(jīng)缺損的方法。異體神經(jīng)不但具有其它材料所沒有的網(wǎng)管狀神經(jīng)內(nèi)部結(jié)構(gòu),利于神經(jīng)的再生,而且來源廣泛,可以得到與缺損神經(jīng)長度直徑相似的移植物。需要解決的就是免疫排斥反應(yīng)問題。神經(jīng)內(nèi)的主要組織相容性抗原主要分布于雪旺細(xì)胞和其它非神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞膜表面,神經(jīng)膜結(jié)構(gòu)的抗原性則非常弱“1。所以去除細(xì)胞,保留細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)的方法,可顯著降低同種異體神經(jīng)的抗原性,而保留的生物活性成分和神經(jīng)管狀結(jié)構(gòu)可為神經(jīng)再生提供良好環(huán)境瞳3。我們用化

5、學(xué)萃取法去除同種異體神經(jīng)內(nèi)的細(xì)胞,用它橋接修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損,并與自體神經(jīng)移植修復(fù)做對(duì)照,研究該移植物修復(fù)神經(jīng)缺損的效果,為周圍神經(jīng)組織工程學(xué)的進(jìn)一步研究打下基礎(chǔ)并為臨床應(yīng)9用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。一、材料材料和方法(一)實(shí)驗(yàn)試劑Triton-X100,脫氧膽酸鈉,水合氯醛,硫化鈉,氯化鈉,十二水合磷酸氫二鈉,二水合磷酸二氫鈉,40%甲醛溶液,尼氏染液(上海碧云天生物技術(shù)有限公司),硝酸銀,氨水,硫代硫酸鈉,蘇木素,伊紅,碘酸鈉,十二水合硫酸鐵銨(鐵明礬)。㈢實(shí)驗(yàn)試劑配制1、脫毛劑40毫升75%乙醇與60毫升去離子水混勻后加入6克硫化鈉。2、PBS溶液(1)0.2mol/LNail2P04溶液的配

6、制:稱取NaH2P04·2H:O31.2克,加去離子水至1000毫升溶解。(2)0.2moYLNa2HP04溶液的配制:稱取Na2HP04-12H:071.632克,加去離子水至1000毫升溶解。(3)0.2mol/LpH7.3PB的配制:取23毫升0.2moFL的NaH.2P04和77毫升0.2mol/L的NaEHP04,充分混合即為0.2mol/L的PB。(4)PBS的配制:稱取NaCl9克及0.2mol/L的PB50毫升,加入1000毫升的容量瓶中,最后加去離子水至1000毫升,充分搖勻。3、10%中性緩沖福爾馬林溶液福爾馬林500毫升溶于4500毫升0.1mol/LpH7.3的eBe

7、e。4、鐵明礬蘇木素染液甲液:10%蘇木素?zé)o水酒精溶液20毫升加入去離子水180毫升,再加入碘酸鈉0.4克。10乙液:4%鐵明礬水溶液200毫升。臨用前將兩液等量混合使用。.5、氨銀乙醇液20%硝酸銀水溶液6毫升中加入4毫升無水乙醇。逐滴加入濃氨水,立即呈現(xiàn)乳白色沉淀,繼續(xù)逐滴加入濃氨水至沉淀剛好溶解,再加濃氨水1滴,過濾后置于棕色瓶中避光保存?zhèn)溆?。㈢儀器設(shè)備BP3100S型電子天平,VT-1300-U超凈工

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