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《重組里氏木霉產(chǎn)高活力外切β葡聚糖酶地研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、浙江大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及耿得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得逝’江盤堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：孔哿簽字日期：2。蚪年弓月JQ日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解迸姿盤堂有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)迸姿態(tài)鱟可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)
2、庫進(jìn)行檢索和傳播，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名：孔芹導(dǎo)師簽名：傀％卅心簽字日期：20J4年多月J0閂簽字日期：如洱年弓月ID日浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文致謝“你來浙大做什么?你畢業(yè)后要成為怎么樣的人”，竺可楨校長的這句話如一盞指明燈，指引我順利完成研究生學(xué)業(yè)。兩年多的學(xué)習(xí)生活，本人得到很多人的幫助，在此致以真誠的謝意。首先，感謝夏黎明老師的悉心指導(dǎo)和殷切關(guān)懷。夏老師為人親切和善，在科研與生活中給予我無限鼓勵；夏老師做事一絲不茍，對我們嚴(yán)格要求，是一位可敬可佩的導(dǎo)師。正是夏老師的鼓勵與指導(dǎo)，才
3、讓我們的研究生生活如此充實。其次，感謝顧斌濤、蔣守坤、趙海峰、趙杰、蔣興、方圓、陶亮亮、章旭、歷雪琪、白冬梅等同門的兄弟姐妹對我科研和生活中的指導(dǎo)與幫助。正是他們的熱心，讓我感覺實驗室就像一個大家庭，團(tuán)結(jié)互助，助我順利完成科研任務(wù)。再次，感謝劉浩婧、余晶梅、李亭亭、王明霞等朋友于我生活中的關(guān)心和照顧。是他們在我需要幫助時給予支持與鼓勵，讓我校園生活充滿了歡笑。最后，鄭重地感謝我的親人、導(dǎo)師、同門兄弟姐妹和朋友們，是你們的無私奉獻(xiàn)與鼓勵支持讓我順利完成研究生學(xué)業(yè)!我的人生即將步入新的階段。我會更加努力，在職場生涯中，繪出人生新的篇章!孔芹2014年3月于浙大求是園浙
4、江大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要外切一B一葡聚糖酶(C1)是纖維素酶的重要組分之一，提高該組分的活力是增強(qiáng)纖維素酶協(xié)同降解性能、降低纖維素水解成本的關(guān)鍵技術(shù)之一。本文采用微晶纖維素瓊脂平板法和濾紙崩解法分別對200個里氏木霉重組轉(zhuǎn)化子進(jìn)行篩選，得到了六個優(yōu)良轉(zhuǎn)化子，其濾紙崩解速率和在微晶纖維素瓊脂平板上的生長速率都較大。進(jìn)一步在搖瓶條件下進(jìn)行復(fù)篩試驗，獲得了外切一p一葡聚糖酶高產(chǎn)轉(zhuǎn)化子ZreeseiZU一101，液體培養(yǎng)48h，其Cl酶活力可達(dá)18．24U·mL～，是出發(fā)菌株的2．16倍：其纖維素酶的總活力(濾紙酶活力FPA)也提高了61．9％。對TreeseiZU．101
5、的產(chǎn)酶性能進(jìn)行了深入研究，與出發(fā)菌株相比，重組轉(zhuǎn)化子的纖維素酶體系中，內(nèi)切一B一葡聚糖酶(CMC)和纖維二糖酶的活力變化不大，但外切一B一葡聚糖酶活力明顯提高。搖瓶培養(yǎng)120h，Cl酶活力可高達(dá)34．66U·mL～，是出發(fā)菌株的1．26倍。由于外切一D一葡聚糖酶得到了定向增強(qiáng)，濾紙酶活力也得到了明顯提高，發(fā)酵120h達(dá)7．35IU·mL～，比出發(fā)菌株提高了40％。對重組轉(zhuǎn)化子ZreeseiZU．101的分批補(bǔ)料發(fā)酵工藝進(jìn)行了研究，結(jié)果表明：發(fā)酵48h后開始補(bǔ)加料液，其乳糖濃度為15％，C／N為7，每隔48h補(bǔ)加2％(V／V)，發(fā)酵168hCl酶活力可達(dá)55．689
6、U·mL～，是分批發(fā)酵工藝(batchprocess)的2．11倍。以NaOH(2％)預(yù)處理后的玉米秸稈為底物，對T．reeseiZU一101所產(chǎn)纖維素酶的降解性能進(jìn)行了深入研究，在底物濃度為10％、每克底物的纖維素酶用量為20FPIU(濾紙酶活力國際單位)的條件下，T．reeseiZU．101纖維素酶的酶解得率比出發(fā)菌株提高了43％：在TreeseiZU一101纖維素酶系中，C．酶活力與CMC活力和濾紙酶活力的比例分別為l：23和4：1，而出發(fā)菌株纖維素酶系中，cl酶活力與CMC活力和濾紙酶活力的比例分別為1：24和3：l，纖維素酶復(fù)合體系中C1酶活力比例的提高
7、，有利于結(jié)晶性較高的秸稈纖維素的協(xié)同降解。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)：1)增大反應(yīng)體系中纖維二糖酶活力的比例，可以顯著提高酶解得率。在上述相同酶解條件下，當(dāng)纖維二糖酶用量為300IU·g。1底物，纖維二糖酶活力(IU)與濾紙酶活力(IU)的比例為15：1時，酶解得率可高達(dá)95％；2)添加木聚糖酶可以促進(jìn)秸稈原料的酶解效率，在底物濃度為10％、每克底物的纖維素酶(FPA)、纖維二糖酶用量分別為20IU和100IU，添加木聚糖酶(300浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要Iu·91底物)可以使玉米秸稈的酶解得率達(dá)到94．4％。本文的研究成果在可再生纖維素資源的生物轉(zhuǎn)化與利用方面具有廣闊的應(yīng)用
8、前景。關(guān)鍵
