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《基于cdte、znsmn量子點熒光免疫的分析》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、中文摘要金黃色葡萄球菌腸毒素B(SEB)是由一種革蘭氏陽性球菌產(chǎn)生的常見的食物毒素。作為一種超抗原,SEB在炎癥過程中起到非常重要的作用。它也是過敏性疾病中的一種重要的致敏原。由于其內(nèi)在的高穩(wěn)定性、強毒性和易散播的特性,SEB還是一種潛在的生物武器。所以發(fā)展一種快速、簡便、靈敏的SEB檢測新方法具有非常重要的立、、,思義。熒光免疫分析靈敏度高、特異性好,是一種應用十分廣泛的生物、生化分析技術。鑒此,本論文在本實驗室前期研究的基礎上,首先建立了一種以CdTe量子點作為能量供體、熒光染料AlexaFl
2、uor568(AF568)作為能量受體的熒光共振能量轉(zhuǎn)移分析體系,用來快速檢測SEB毒素。但是考慮到Cd系列量子點的毒性,本論文進一步建立了基于ZnS摻Mn低毒性量子點的熒光免疫分析,并將之用于毒素SEB的快速、靈敏檢測,以應對食品安全監(jiān)測的迫切需要。本論文工作主要內(nèi)容:1.綜述了熒光免疫分析技術的應用以及現(xiàn)階段常用于熒光分析中的不同熒光標記物;論述了新興的熒光標記物低毒性ZnS:Mn量子點的制備方法和應用現(xiàn)狀;簡述了SEB的危害以及現(xiàn)有的檢測方法。2.制備了水溶性CdTe量子點及其磁性熒光納米復
3、合物;對相關性能進行了表征;利用磁性熒光復合物和熒光染料建立了快速檢測SEB毒素的FRET分析體系。3.采用水相共沉淀法制備了Mn摻雜的ZnS量子點;X射線衍射和透射電鏡測試結(jié)果表明該量子點具有閃鋅礦型結(jié)構(gòu),為直徑19nm的球型顆粒;熒光測試表明所制備的量子點具有窄而對稱的發(fā)射峰,發(fā)光波長在580nm左右,為耀眼的橙色光。4.結(jié)合磁性納米粒子的免疫磁分離和ZnS:Mn量子點的免疫熒光標記,采用“夾心式三明治”免疫分析法對SEB毒素進行了檢測,最低檢測限為0.01ng/mL,具有較好的靈敏度。5.建
4、立了一種以硝酸纖維素膜為抗體固定載體的熒光免疫分析方法;該方法簡便快速,具有一定的靈敏度(檢測限為O.1ng/mL)。關鍵詞:熒光免疫分析;熒光共振能量轉(zhuǎn)移;ZnS:Mn量子點;CdTe量子點;金黃色葡萄球菌腸毒素B;快速檢測;ABSTRACTStaphylococcusenterotoxinB(SEB)isacommonfoodbometoxinproducedbytheGram-positivebacteriumStaphylococcusaureus.Asasuperantigen,SEBp
5、laysanimportantroleininflammationprocesses,Itisalsoanimportantsensitinogeninallergicdiseases.Duetoitsinherenthighstablility,strongintoxicationeffect,easyspreadability,SEBisapotentialbiologicalweapon.Therefore,itisvitaltodevelopnewsimpleandconvenientme
6、thodsforradipandsensitivedetectionofSEB.Characterizedbytheirhighsensitivityandspecificity,fluorescenceimmuoassaysareaclassofwidely—usedbiologicalandbiochemicalanalysistechnologies.Hence,onthebasisofourlaboratory’Spreciousresearch,thisthesisworkfirstes
7、tablishedafluorescenceresonanceenergytransfer(FRET)immunoassaymethodforrapidSEBdetectionwithaCdTequanttundotandthefluorescentdyeAF568asanenergydonorandanenergyreceptor,respectively.ConsideringthetoxicityofCdquantumdots,thisthesisworkfurtherestablished
8、afluorescenceimmunoassaybasedonZnS:Mnlow-toxicityquantumdotforrapid,sensitivedetectionofbacterialtoxinssuchasSEB,addressingtheurgentneedforfoodsafetymonitoring.Themaincontentsofthisthesisworkareasfollows:1.Applicationsoffluorescenceimmunoassay