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《基于量子點(diǎn)的新型均相熒光免疫分析技術(shù).pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、第8卷第6期中國(guó)科技論文Vo1．8No．62013年6月CHINASCIENCEPAPERJune2013基于量子點(diǎn)的新型均相熒光免疫分析技術(shù)陳玫君，陳振華，吳英松，任志奇，李思雯，劉天才(南方醫(yī)科大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院，廣州510515)摘要：研究一種檢測(cè)人血清中癌胚抗原(CEA)的新型量子點(diǎn)均相免疫分析方法。制備還原型谷胱甘肽包被的水溶性量子點(diǎn)(QDs)，偶聯(lián)上抗CEA單克隆抗體，使異硫氰基熒光素(FITC)偶聯(lián)上另一株抗CEA單克隆抗體，采用雙抗體夾心法模式，充分利用兩株抗體與CEA抗原的相互作用，從而驗(yàn)證QDs、F丌C兩者與抗體偶聯(lián)的生物活性，并研究QDs用于均相熒光共
2、振能量轉(zhuǎn)移(HFRET)免疫分析中的可行性與實(shí)用性。結(jié)果表明，F(xiàn)ITC與QDs之間能夠發(fā)生能量轉(zhuǎn)移，其熒光共振能量轉(zhuǎn)移信號(hào)與CEA濃度成線(xiàn)性相關(guān)，其工作曲線(xiàn)為L(zhǎng)ogY一2．504+0．154LogX(r2—0．98197，P一0．002)，并計(jì)算出其分析靈敏度為0．4ng／rnL。該新型均相熒光免疫分析方法具有不需沖洗掉游離熒光標(biāo)記物、靈敏度高等優(yōu)勢(shì)，為今后實(shí)現(xiàn)快速便捷、多通道、高靈敏度、微量化、自動(dòng)化及高通量化的生物醫(yī)學(xué)傳感技術(shù)和現(xiàn)代免疫分析技術(shù)提供科學(xué)依據(jù)。關(guān)鍵詞：量子點(diǎn)；雙抗體夾心法；熒光共振能量轉(zhuǎn)移；均相熒光免疫分析中圖分類(lèi)號(hào)：R446．61文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)
3、：2095—2783(2013)06—0487—05Anovelquantum-dot-basedhomogeneousfluoroimmunoassaytechnologyChenMeijun，ChenZhenhua，WuYingsong，RenZhiqi，LiSiwen，LiuTiancai(SchoolofBiotechnology，SouthernMedicalUniversity，Guangzhou，510515，China)Abstract：Anovelquantum-dot-basedhomogeneousfluoroimmunoassaytechnolog
4、yhasbeenstudiedfordetectionofcarcinoem—bryonicantigen(CEA)inhumanserum．Water-solublequantumdots(QDS)werepreparedandcoatedwithanti-CEAmonoclonalantibody(McAb)，andanotheranti-CEAMcAbwaslabeledwithFluoresceinisothiocyanate(FITC)．Theactivitiesofthesela—beledantibodieswereanalyzedbyfluorescenc
5、eresonanceenergytransfer(FRET)．TheconcentrationsofCEAweremeasuredbyFRETbetweenFITCandQDswiththetwo-antibodysandwichsystem．Theresultsindicatedthatquantumdotscouldbeappliedinhomogeneousfluoroimmunoassay．ThesignalsofFRETwereproportionaltotheconcentrationsofCEAwithLogY一2．504+0．154LogX(r2—0．98
6、197，P一0．002)；thecalculatedsensitivitywas0．4ng／mL．Thenovelhomogeneousfluorescenceimmunoassaydoesnotrequiretowashawaythefreefluorescentconjugateswithhighsensitivity．Itprovidesascientificbasisforthedevelopmentofrapidandconvenientbiomedicalsensortechnologyandmodernimmunoassaytechnologywithmul
7、ti-channel，highsensitivityandhigh-throughput．Keywords：quantumdots；two-antibodysandwichsystem；fluorescenceresonanceenergytransfer；homogeneousfluorescenceimmunoassay癌胚抗原(CEA)是一種多糖蛋白復(fù)合物，屬于究潛質(zhì)。目前，關(guān)于FRET的研究，還停留在理論非器官特異性腫瘤相關(guān)抗原，是腫瘤診斷和病情檢上，大多數(shù)就是集中在共振能量轉(zhuǎn)移的定性檢測(cè)，而測(cè)中最常用的一種腫瘤標(biāo)志物
