電針足少陽經(jīng)穴對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠opg、rankl及cbfa1mrna表達(dá)的影響

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1、中圖分類號(hào):R89;R36;R39碩士學(xué)位論文電針足少陽經(jīng)穴對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠OPG、RANKL及CBFa1mRNA表達(dá)的影響院(系)、所中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院研究生姓名潘小燕學(xué)科、專業(yè)針灸推拿學(xué)導(dǎo)師姓名王鴻度教授二Ο一二年四月目錄1電針足少陽經(jīng)穴對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠OPG、RANKL及CBFa1mRNA表達(dá)的影響??11.1中文摘要?????????????????????11.2英文摘要?????????????????????31.3前言???????????????????????51.4材料與方法????????????????????71.5結(jié)果???????????????

2、????????121.6討論???????????????????????241.7結(jié)論???????????????????????301.8參考文獻(xiàn)?????????????????????311.9英漢縮略詞對(duì)照表?????????????????352致謝???????????????????????363淺談針灸治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的取穴規(guī)律(綜述)????????????????????39電針足少陽經(jīng)穴對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠OPG、RANKL及CBFa1mRNA表達(dá)的影響摘要目的:本實(shí)驗(yàn)旨在通過電針足少陽經(jīng)穴干預(yù)骨質(zhì)疏松大鼠后,觀察分析骨組織相關(guān)因子OPG/RA

3、NKLmRNA和CBFa1mRNA表達(dá)的變化情況,以初步探討其作用的分子基礎(chǔ)和機(jī)制。方法:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為12月齡Wistar雌性大鼠40只,體重(220±10g),由瀘州醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)期間所有大鼠均飼養(yǎng)在二級(jí)動(dòng)物室,溫度(25±1)℃,喂食正常飼料,自由飲水。按完全隨機(jī)分組法將40只大鼠隨機(jī)分為四組。假手術(shù)組(Shamgroup)、模型對(duì)照組(OVXControlgroup,OVX-C)、模型加膽經(jīng)組(OVXacupuncturegroup,OVX-A)、模型加非經(jīng)穴針刺組(OVXNonpointAcupuncturegroup,OVX-N),10只/組。假手術(shù)組

4、僅行雙側(cè)開腹手術(shù)不摘除卵巢。其余各組施行手術(shù)摘除雙側(cè)卵巢術(shù)。手術(shù)后所有動(dòng)物在同一條件(室溫19~24℃,相對(duì)濕度40%左右)用普通飼料飼養(yǎng),自由飲水。手術(shù)后三個(gè)月開始針刺OVX-A組:陽陵泉、環(huán)跳、懸鐘、京門穴,均施以提插捻轉(zhuǎn)平補(bǔ)平瀉手法后加以電針刺激,留針30分鐘,10次為一個(gè)療程,每天施針一次。一個(gè)療程完后休息五天,再繼續(xù)下個(gè)療程,共針刺6個(gè)療程。OVX-N組選大鼠后肢內(nèi)側(cè)非經(jīng)穴處(雙側(cè)),常規(guī)消毒后以毫針快速進(jìn)針后施以平補(bǔ)平瀉手法快速取針。Sham組、OVX-C組不作針刺。干預(yù)3個(gè)月停止干預(yù)再觀察3個(gè)月后,處死前一天分別置大鼠于代謝籠中,收集24h空腹尿液,置-2

5、0℃低溫冰箱保存待測(cè)。處死前用電子臺(tái)秤稱其重量。全麻下心臟采血,血清分離保存待測(cè),快速取左側(cè)股骨,仔細(xì)剔盡附著的軟組織,置于凍存管內(nèi),置于-70℃低溫冰箱保存待測(cè)。結(jié)果:1、造模3月、干預(yù)3月、觀察3月后,電針膽經(jīng)經(jīng)穴組OPGmRNA表達(dá)較模型組和假手術(shù)組OPGmRNA表達(dá)顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);電針膽經(jīng)經(jīng)穴組OPGmRNA表達(dá)與非經(jīng)穴組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);模型組OPGmRNA表達(dá)與假手術(shù)組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。2、電針膽經(jīng)組RANKLmRNA表達(dá)較模型組明顯降低,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),與非經(jīng)穴組比較差異

6、無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);非經(jīng)穴組RANKLmRNA表達(dá)較模型組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;模型組RANKLmRNA表達(dá)較其余三組均增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3、電針膽經(jīng)組OPG/RANKLmRNA的比值較假手術(shù)組降低明顯,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),較非經(jīng)穴組和模型組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);非經(jīng)穴組和模型組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);非經(jīng)穴組較假手術(shù)組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);模型組與假手術(shù)組比較顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。4、電針膽經(jīng)組CBFa1mRNA表達(dá)明顯高于假手術(shù)組,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

7、P<0.01);電針膽經(jīng)組CBFa1mRNA表達(dá)高于非經(jīng)穴組,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.507),高于模型組,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.389);非經(jīng)穴組與假手術(shù)組比較增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);模型組與非經(jīng)穴組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)論:1、電針足少陽經(jīng)穴具有抑制骨吸收同時(shí)刺激骨形成的作用:電針少陽通過抑制破骨細(xì)胞關(guān)鍵調(diào)控因子OPG和RANKL的mRNA表達(dá),提高OPG/RANKL兩者比值,抑制骨吸收;同時(shí)刺激成骨細(xì)胞骨形成特異性基因CBFa1mRNA表達(dá),增強(qiáng)骨形成,以促進(jìn)OB和OC相偶聯(lián),進(jìn)而達(dá)到和調(diào)骨重建的

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