條斑紫菜赤腐病病原學(xué)探究

《條斑紫菜赤腐病病原學(xué)探究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、條斑紫菜赤腐病病原學(xué)探究摘要：條斑紫菜是紅藻門的代表性物種之一，具有重要的經(jīng)濟(jì)價值。但近年來，隨著條斑紫菜栽培規(guī)模的持續(xù)擴(kuò)大，病害發(fā)生的頻率、規(guī)模和危害程度也逐年增加。本研究對紫菜腐霉的生長特性進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其在溫度28°C,鹽度為20%o時生長速度最快。此外，對感染的葉片進(jìn)行了病原學(xué)的研究。對條斑紫菜病害進(jìn)行病原學(xué)和致病條件的研究，不僅可以為制定病害防治措施提供依據(jù)，而且也將為抗病品系的篩選提供條件。關(guān)鍵詞：條斑紫菜；赤腐?。蛔喜烁埂痉诸愄枴浚篠968.4一、背景介紹條斑紫菜是一些獨(dú)特的海洋藻類，且易通過它們的絲狀體或葉狀體被辨別。主要分布于南半球和北半

2、球寒冷的北方海岸［1,2］。條斑紫菜的人工栽培產(chǎn)業(yè)是世界上商業(yè)價值最重要的海藻栽培產(chǎn)業(yè)，其中紫菜年總產(chǎn)值近20億美元，中國、韓國和日本每年紫菜栽培產(chǎn)業(yè)的總產(chǎn)值已經(jīng)達(dá)到14億美元以上［3］。近年來，我國條斑紫菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛，栽培產(chǎn)量逐年增加，居世界第一位。隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大紫菜病害每年都有不同程度的發(fā)生，這些病害對紫菜產(chǎn)值造成嚴(yán)重影響。赤腐病是嚴(yán)重危害條斑紫菜的一種病害，1947年日本的新崎盛德首先報導(dǎo)了赤腐病［4,5］,1970年由高橋?qū)嵉辱b定病原菌為腐霉屬新種-紫菜腐霉（Pythiumporphyrae）［6］□目前關(guān)于赤腐病的研究熱點(diǎn)主要集中在抗紫菜腐霉

3、蛋白的分離純化［7］。本實(shí)驗(yàn)研究赤腐病的致病機(jī)理以及發(fā)病過程，對條斑紫菜病害進(jìn)行病原學(xué)和致病條件的研究，不僅可以為制定病害防治措施提供依據(jù)，而且也將為抗病品系的篩選提供條件，對高產(chǎn)抗病品系的篩選有著不容忽視的應(yīng)用價值。二、材料與方法（一）材料來源健康的條斑紫菜葉片來自于實(shí)驗(yàn)室自由絲狀體培養(yǎng)而成的，葉狀體培養(yǎng)條件為：溫度15°C,鹽度28%o-29%o,光照強(qiáng)度5&1ymol/m2?s-62.5nmol/m2?s,光暗周期12L：12D,每五天換一次培養(yǎng)基并充氣培養(yǎng)。紫菜腐霉菌株購自于日本生物資源庫。（二）紫菜腐霉的培養(yǎng)紫菜腐霉在玉米粉瓊脂固體培養(yǎng)基［7］上進(jìn)

4、行劃線培養(yǎng)，溫度20°Co菌絲擴(kuò)大培養(yǎng)時，刮取-一小塊經(jīng)純化的腐霉菌絲塊置于谷氨酸鈉液體培養(yǎng)基［8］中，20°C,100r.min-lo（三）不同培養(yǎng)條件對紫菜腐霉菌絲體生長的影響將在固體培養(yǎng)基上生長5天的菌絲接種到液體培養(yǎng)基中，置于4°C-36°C（pH=7.5,鹽度為18%。，每隔41設(shè)一個梯度）和鹽度為5%。-50%0（pH=7.5,溫度為20°C,每隔5%。設(shè)一個梯度）的恒溫培養(yǎng)箱中，每個實(shí)驗(yàn)組梯度設(shè)置3個平行，每組最初起始重量為lmg（濕重）。一周后測量每個實(shí)驗(yàn)組的菌絲體重量。（四）人工感染實(shí)驗(yàn)及觀察將在液體培養(yǎng)基中生長5天的菌絲體用滅菌海水沖洗三

5、次，并用消毒的衛(wèi)生紙稍微把水吸干。稱取2g菌絲（濕重）置于裝有200ml滅菌海水的錐形瓶中，制成終濃度為lg/100ml的菌絲體懸液，每組錐形瓶中放入5片健康的紫菜葉片，同時設(shè)置3個重復(fù)。此外設(shè)置一組無添加菌絲的作為對照，同時設(shè)置3個重復(fù)。將對照組和實(shí)驗(yàn)組置于光照培養(yǎng)箱中，溫度15°C,鹽度29%o,光照強(qiáng)度58.1umol/m2-s-62.5umol/m2-s,光暗周期12L：12D。將對照組和實(shí)驗(yàn)組患病的葉片，切取正常的和患病部位葉片組織，利用OlympusCX31型顯微鏡觀察病斑部位并做記錄。三、結(jié)果（一）不同培養(yǎng)條件對紫菜腐霉菌絲體生長的影響由表1可

6、知，在液體培養(yǎng)基中生長一周后，紫菜腐霉菌絲體在16-361的溫度范圍內(nèi)生長良好，菌絲體最適生長溫度為28°C,重量達(dá)到了346.6mg,其次是24°C,重量為256.9mgo經(jīng)統(tǒng)計學(xué)方差分析，2（TC和36工之間的菌絲體重量有顯著性差異（P（二）人工感染實(shí)驗(yàn)濃度為lg/100ml的菌絲體懸液加到紫菜培養(yǎng)液后，2天后出現(xiàn)病癥。肉眼觀察可以發(fā)現(xiàn)，病斑在藻體上出現(xiàn)的位置不定，葉狀體的梢部、中部和基部都可以看到病斑的存在，梢部出現(xiàn)的病斑稍微多些。初期病斑僅為一個小銹紅色斑點(diǎn)，病斑形狀多為亞圓形或圓形，大小不同，大的可達(dá)2厘米以上，小的可到1毫米之下。多數(shù)斑點(diǎn)開始時僅

7、為肉眼依稀可辨的大小，之后相互愈合連成一片。隨著病情的加重，銹紅色斑點(diǎn)逐漸變?yōu)辄S綠色或淡黃色（圖3-A）,邊緣有時稍帶紅色。之后大大小小的的斑點(diǎn)相互愈合連成一片，最后葉片顏色基本全變?yōu)榫G色（圖3-B）,并開始出現(xiàn)爛洞現(xiàn)象，直至最后腐爛流失，從病癥出現(xiàn)到整個葉片腐爛流失僅需要5-7天。圖3感染赤腐病的紫菜葉片（三）發(fā)病進(jìn)程的顯微觀察光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，出現(xiàn)病癥的葉片出現(xiàn)大小不同的病斑（圖4-A,圖4-B）,病斑處的紫菜細(xì)胞被菌絲體貫穿,這是赤腐病最顯著的特征。在紫菜細(xì)胞被感染過程中，開始只有1個細(xì)胞被菌絲體穿透，和正常紫菜細(xì)胞（圖4-C）比較，發(fā)生病害的細(xì)胞

8、已經(jīng)萎縮，顏色也加深，并且菌絲體繼續(xù)伸長侵染臨近的細(xì)