內(nèi)源性血管抑制因子抑制眼底新生血管的機(jī)理研究

內(nèi)源性血管抑制因子抑制眼底新生血管的機(jī)理研究

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1、卜海變通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論義上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2009級(jí)博士研究生學(xué)位論文課題名稱:內(nèi)源性血管抑制因子抑制眼底新生血管的機(jī)理研究作者姓名:張岐學(xué)號(hào):0097249268導(dǎo)師姓名:孫曉東專業(yè):眼科學(xué)答辯日期:2012年10月國(guó)家自然科學(xué)基金30973259國(guó)家973計(jì)劃2011CB707500f10liltIrlllIfrrflIIrfrill1rulY2250623卜-海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文內(nèi)源性血管生長(zhǎng)因子抑制眼底新生血管的機(jī)理研究STUDYoFENDOGENOUSPROTEINTOSUPPRESSoCULARNEOVASCULARIZATION作者姓名:張岐學(xué)號(hào):

2、0097249268導(dǎo)師姓名:孫曉東專業(yè):眼科學(xué)研究方向:眼底新生血管申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士培養(yǎng)單位:上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬上海市第一人民醫(yī)院資助基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金30973259國(guó)家973計(jì)戈lJ201CB707500關(guān)鍵詞:答辯日期:國(guó)家自然科學(xué)基金30973259國(guó)家973計(jì)劃201lCB707500內(nèi)源性血管抑制因子,眼底新生血管,血管內(nèi)皮成長(zhǎng)因子,年齡相關(guān)性老年黃斑變性O(shè)neclickstaing,新生血管染色,巨噬細(xì)胞2012年10月卜海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論義上海交通大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校

3、保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、索引或掃描等復(fù)制手法保存和匯編本學(xué)位論文。保密口,在年解密后適用本授權(quán)書(shū)。本學(xué)位論文屬于不保密口√。(請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”)學(xué)位論文作者簽名:豸艮磁指導(dǎo)教師簽名:日期:2012年10月1日卜海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論義上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包括任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的作品成果。

4、對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:蘇磋.日期:2012年10月1日.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文內(nèi)源性血管抑制因子抑制眼底新生血管的機(jī)理研究摘要新生血管性疾病(Neovascularization,NV)是當(dāng)今很多眼科疾病導(dǎo)致視力災(zāi)難性喪失甚至致盲的主要原因。在正常視網(wǎng)膜血管的發(fā)育過(guò)程中,血管內(nèi)皮細(xì)胞(Vascularendothelialcell,VEC)在各種細(xì)胞因.了作用下增殖并通過(guò)細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellularmatrix,ECM)進(jìn)行遷移有序的形成血管。而在病理性NV

5、形成過(guò)程中,在眼的相關(guān)部位如虹膜、視網(wǎng)膜、及脈絡(luò)膜可形成無(wú)序的,異常形態(tài)結(jié)構(gòu)及無(wú)功能的血管形成。這些新生的血管很容易發(fā)生滲漏、出血、進(jìn)而引起視網(wǎng)膜水腫、纖維增生、視網(wǎng)膜玻璃體出血或牽引性視網(wǎng)膜脫離可以導(dǎo)致潛在的災(zāi)難性的視力喪失。本研究中,我們嘗試探討運(yùn)用內(nèi)源性血管抑制因子來(lái)治療和抑制眼底NV并簡(jiǎn)要的討論眼底NV的發(fā)生機(jī)制。我們著重研究了內(nèi)源性血管生長(zhǎng)抑制因子對(duì)于眼底NV的作用機(jī)制。內(nèi)源性血管抑制因子,是一組機(jī)體自身存在的抑制血管生成的負(fù)反饋分子,對(duì)機(jī)體正常生理作用的于預(yù)和影響小。在研究中我們發(fā)明了一利-新的免疫染色方法可以高質(zhì)量定性和定量的評(píng)價(jià)視網(wǎng)膜新生血管(Retinaln

6、eovascularization,RNV)以及脈絡(luò)膜新生血管(Choroidalneovascularization,CNV)。本研究提供了幾種眼底NV可行的新型治療靶點(diǎn),不僅可以作為有價(jià)值的研究工具,并且可能具備潛在的治療前景。卜海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文第一部分:1OneClickStaining一種特殊的新生血管特異性免疫組織化學(xué)染色以用于研究新生血管和巨噬細(xì)胞關(guān)系研究目的:本研究的目的是研究和探索新的染色方法以提高及規(guī)范化視網(wǎng)膜血管和新生血管(NV)的染色,對(duì)新生血管更準(zhǔn)確的進(jìn)行定性定量分析。方法:對(duì)缺氧誘導(dǎo)新生血管的小鼠,在出生后17天,對(duì)其視網(wǎng)膜表面產(chǎn)生的新生

7、血管進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,分別運(yùn)用了熒光標(biāo)記的GSAlectin抗體和沒(méi)有熒光標(biāo)記的抗體和不同長(zhǎng)度的染色時(shí)間。與此同時(shí),在缺氧誘導(dǎo)新生血管模型小鼠出生后的第13,15,17,19,2l,23,25天進(jìn)行傘視網(wǎng)膜新生血管和巨噬細(xì)胞的體外染色,鋪片拍照以觀察新生血管和巨噬細(xì)胞的關(guān)系。同時(shí)對(duì)出生后21天rhoNEGF轉(zhuǎn)基因小鼠采用同樣體外染色方法,可以特異性地染色視網(wǎng)膜下血管。結(jié)果:對(duì)缺氧誘導(dǎo)的小鼠新生血管模型(ROP模型)視網(wǎng)膜新生血管在用GSA標(biāo)記的Lectin抗體染色40分釧t后,可以觀察到清晰的新生血

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