微生物在發(fā)酵床奶牛養(yǎng)殖中動態(tài)變化、作用機理及其對奶牛生產(chǎn)性能影響

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1、論文獨創(chuàng)性聲明㈣㈣II@胛ll㈣㈣Y1801icji§。岑本人鄭重聲明：所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行研究工作所取得的成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，學位論文中不包含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學或其它教育機構(gòu)的學位或證書所使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生虢句泛≥o}9年6只≥汩關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電

2、子版，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意四川農(nóng)業(yè)大學可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名：導師簽名：勾j乏階鋤a杉年6月弘日為，夕年6月≯增四川農(nóng)業(yè)大學顧七論文{兩要為了解決奶牛養(yǎng)殖中日益嚴重的糞尿污染問題，根據(jù)發(fā)酵床技術(shù)基本原理和奶牛生活習性，篩選出生長性能穩(wěn)定的高酶活菌株，將其應用于奶牛發(fā)酵床養(yǎng)殖，改善奶牛場養(yǎng)殖環(huán)境，提高產(chǎn)奶量和乳品質(zhì)。首先，根據(jù)奶牛糞便量大，纖維素含量高的特點，針對性地在大量樣品中篩選出3株纖維素酶、蛋白酶和淀粉酶均較高的菌株。經(jīng)鑒定，其中

3、2株為芽孢桿菌，l株為酵母菌。同時，經(jīng)過反復發(fā)酵，這3株菌的酶活力穩(wěn)定，且生長性能較好。然后，通過測定pH值、銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量，以及各項酶活性等，對微生物在墊料發(fā)酵過程中的作用機理進行研究。結(jié)果表明：1．實驗組墊料表面幾乎無臭味散發(fā)，較干燥。發(fā)酵使內(nèi)部溫度先升高，后降低；整個墊料環(huán)境的pH值降低，這對控制牛糞中NH3的揮發(fā)有一定作用。而對照組表面始終散發(fā)出臭味，引來較多蒼蠅附著，并且墊料顏色逐漸變深變黑，很潮濕，有腐爛的趨勢；整個過程，溫度幾乎處于與室溫等溫的狀態(tài)，pH值始終高于實驗組。2．加快了有機物降解為銨態(tài)氮，促進墊料硝化作用的能力，有

4、利于降低環(huán)境pH值，減少NH3的揮發(fā)；降低了硝化氮含量，提高墊料的反硝化能力。3．墊料中纖維素酶、蛋白酶和脲酶活性均得到提高，促進整個系統(tǒng)的代謝，對于奶牛糞尿的快速、有效處理起到關(guān)鍵性作用。最后，運用發(fā)酵床技術(shù)開展動物應用試驗。將制作的高酶活復合菌劑與鋸末、谷殼、米糠等按一定比例混合后，進行發(fā)酵(15d)，對照組則不添加菌劑，其它步驟采取相同方式處理。定期記錄墊料發(fā)酵過程中的溫度變化；采用活菌計數(shù)檢測墊料中益生菌和有害菌數(shù)量變化；利用PCR．DGGE技術(shù)監(jiān)測不同時期墊層內(nèi)微生物的動態(tài)變化；并通過在奶牛飼糧中添加1％o微生物復合菌劑，與發(fā)酵床技術(shù)

5、相結(jié)合，研究其對奶牛產(chǎn)奶量、乳品質(zhì)和腸道菌群的影響。結(jié)果表明：1．發(fā)酵過程中，墊料中大多數(shù)微生物數(shù)量呈下降趨勢，但不同類型微生物數(shù)量下降的特點有所不同。益生菌(芽孢桿菌、乳酸桿菌、酵母菌)等穩(wěn)定存在，數(shù)量有微弱降低，但均高于對照組，并在發(fā)酵結(jié)束時，數(shù)量開始回升；有害茵(大腸桿菌、放線菌、霉菌)等數(shù)量急劇下降，并且低于對照組，個別菌甚至死亡。DGGE指紋圖譜表明，隨著發(fā)酵時間延長，墊料中菌群的多樣性降低，平均條帶數(shù)量從38．7條降低到29條，穩(wěn)定性得到提高。四川I農(nóng)業(yè)大學碩t論文2．對照組奶牛平均產(chǎn)奶量有所降低，每頭日均產(chǎn)奶量減少0．36kg，差

6、異不顯著(P>0．05)；而通過飼喂微生態(tài)制劑的奶牛，在與對照組完全相同的環(huán)境條件下，產(chǎn)奶量不僅未減少，反而有所增加，每頭奶牛日均產(chǎn)奶量比對照組增加1．81kg，增產(chǎn)16．97％，差異極顯著(P<0．01)。鮮奶中蛋白質(zhì)含量增加0．04％(P>O．05)；乳糖增加0．03％(P>O．05)；非脂乳固體增加0．05％(P>0．05)；脂肪降低0．46％，差異顯著(P

7、高，最高達到了97％，最低值為87％。而對照組各樣品間相同條帶重復性低，相似性最高只有91％，最低僅為77％，個體間的差異非常明顯。說明通過發(fā)酵床技術(shù)飼養(yǎng)奶牛，并在飼料中添加微生物菌劑進行飼喂后，顯著增加了奶牛腸道菌群的多樣性，使奶牛個體間差異性降低；同時，促進了腸道內(nèi)微生物的定植，菌群穩(wěn)定性提高。關(guān)鍵詞：微生物發(fā)酵床PCR．DGGE生產(chǎn)性能奶牛H四川農(nóng)業(yè)大學碩士論文AbstractThedynamicsandmechanismofMicro—-organismsindeep--littersystemfordairyCOWbreeding，a

8、nditsimpactonproductionperformanceofdairyCOWTosolvethemanurepollutionproble