小麥wvp21基因表達(dá)載體的gateway技術(shù)構(gòu)建及其遺傳

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1、麥類作物學(xué)報(bào)2009,29(2):1892194JournalofTriticeaeCrops小麥WVp21基因表達(dá)載體的Gateway技術(shù)構(gòu)建及其遺傳轉(zhuǎn)化31,222233高東堯,夏蘭芹,徐兆師,馬有志,李彥舫,原亞萍,221,4李連城,陳明,孫金海(1.吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部畜牧獸醫(yī)學(xué)院,吉林長(zhǎng)春130062;2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所/農(nóng)作物基因資源與基因改良國(guó)家重大科學(xué)工程/農(nóng)業(yè)部作物遺傳育種重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室,北京100081;3.吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部植物科學(xué)學(xué)院,吉林長(zhǎng)春130062;4.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,山東青島266109)摘要:為了利用

2、中國(guó)特有的抗穗發(fā)芽小麥遺傳資源,并深入分析Viviparous21(Vp21)基因在小麥穗發(fā)芽抗性中的作用,從抗穗發(fā)芽小麥品種西農(nóng)979的干種子中分離了Vp21基因的同源基因,命名為WVp21。利用Gate2way技術(shù),以植物表達(dá)載體pLeela為基礎(chǔ),成功構(gòu)建了含有雙35S啟動(dòng)子的高效表達(dá)載體,并轉(zhuǎn)化擬南芥突變體abi324,獲得了8株陽(yáng)性植株。關(guān)鍵詞:小麥;WVp21基因;克隆;轉(zhuǎn)化中圖分類號(hào):S512.1;S330文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):100921041(2009)022189206ConstructionandTransformationo

3、ftheExpressionVectorofWheatWVp21GeneUsingGatewayTechnology1,22223GAODong2yao,XIALan2qin,XUZhao2shi,MAYou2zhi,LIYan2fang,3221,4YUANYa2ping,LILian2cheng,CHENMing,SUNJin2hai(1.CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,JilinUniversity,ChangChun,Jilin130062,China;2.NationalkeyFaci

4、lityforCropGeneResourcesandGeneticImprovement/KeyLabortoryofCropGeneticsandBreeding,MinistryofAgriculture/InstituteofCropSciences,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing10081,China;3.CollegeofPlantScience,JilinUniversity,ChangChun,Jilin130062,China;4.CollegeofAnimalScience

5、andVeterinaryMedicine,QingdaoAgricultureUniversity,Qingdao,Shandong266109,China)Abstract:Pre2harvestsprouting(PHS)ofgrainwhileitisstillintheear,isduetoanearlydisruptionofseeddormancy.PHSreducesthequalityofwheatandthevalueofthegrain.Viviparous1(Vp21)homo2loguesplayanimportantrol

6、einseedmaturation,dormancyanddesiccation.Inthisstudy,tomakeuseofgeneticresourceofpre2harvestsproutingtoleranceinChinesewheats,PCR2basedapproachwasemployedtoisolateaVp21homologouscDNAclonefromXinong979,anddesignatedasWVp21.UsingGatewaycloningtechnology,theplantexpressionvectorof

7、WVp21genedrivenbythedouble35Spromoterwassuc2cessfullyconstructedandinducedintoArabidopsismutantabi324.8plantswithresistancetoBialaphoswereobtain.ThislaidabasisforthefunctionanalysisofWVp21gene.Keywords:Wheat;WheathomologousVp21gene(WVp21);Clone;Transformation[1][1]小麥穗發(fā)芽是一種世界性的自

8、然災(zāi)害。研究可能主要受種子休眠特性的影響。[2]表明,小麥穗發(fā)芽是受多基因控制的性狀,種子休脫落酸(ABA)

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