nkx2.5tbx5gata4等基因在雞、鵪鶉及其屬間雜交種胚胎心臟發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)研究

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1、分類(lèi)號(hào):密級(jí):公開(kāi)學(xué)號(hào):2009108006單位代碼:10759石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文【Nkx2.5/TBX5/GATA4等基因在雞、鵪鶉及其屬間雜交種胚胎心臟發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)研究學(xué)位申請(qǐng)人陳丹盈指導(dǎo)教師趙宗勝教授申請(qǐng)學(xué)位門(mén)類(lèi)級(jí)別農(nóng)學(xué)碩士學(xué)科、專(zhuān)業(yè)名稱動(dòng)物遺傳育種與繁殖研究方向動(dòng)物遺傳育種所在學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院中國(guó)·新疆·石河子2012年6月2ExpressionstudiesofNkx2.5/TBX5/GATA4andotherrelevantgeneinchickens,quail,andtheirintergenerichybrids'embryonicheart

2、developmentprocessADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsFortheDegreeofMasterofAgricultureByChenDan-Ying(AnimalGeneticsandBreeding)DissertationSupervisor:Prof.ZhaoZong-shengJune,2012ShihezixinjiangChina3學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人所呈交的學(xué)位論文是在我導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)

3、我所知,除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含其他個(gè)人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。研究生簽名:時(shí)間:年月日學(xué)位論文版權(quán)授權(quán)書(shū)本人完全了解石河子大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國(guó)家主管部門(mén)或指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版。有權(quán)將學(xué)位論文用于贏利目的的少量復(fù)制并允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書(shū)館被查閱。有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行檢索。有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。研究生簽名:時(shí)間:年月日導(dǎo)師簽名:時(shí)間:年月日2摘要雞與鵪鶉的遠(yuǎn)緣雜交

4、存在著一定程度的不親和性,其雜交禽胚胎早期大量死亡,死亡原因到目前為止仍未得到很好地解釋。前人從時(shí)間、性分化上及細(xì)胞凋亡對(duì)雜交種胚胎早期死亡的原因進(jìn)行了分析。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行雞與鵪鶉體外受精后,采集3-7天的雞、鵪鶉及雜交禽的胚胎,進(jìn)行解剖鏡下形態(tài)學(xué)觀察,并對(duì)其心臟制作石蠟切片進(jìn)行組織學(xué)觀察,同時(shí)通過(guò)實(shí)時(shí)定量RT-PCR對(duì)心臟發(fā)育相關(guān)的Nkx2-5,TBX5,GATA4,NPPA基因表達(dá)規(guī)律進(jìn)行研究,深入探討雞與鵪鶉屬間雜交種早期胚胎死亡原因與心臟分化發(fā)育的關(guān)系,結(jié)果表明:(1)雞、鵪鶉與其雜交種在形態(tài)學(xué)上的觀察顯示雞的發(fā)育比鵪鶉的遲緩,這與它們的孵化周期相符,而雜交禽發(fā)育

5、緩慢,各種生理狀態(tài)比較微弱,這可能是屬間雜交所引起的,由此可見(jiàn),雜交禽早期胚胎死亡在其發(fā)育過(guò)程中的生理狀態(tài),器官功能方面都是有所體現(xiàn)的。(2)雞、鵪鶉與其屬間雜交種胚胎心臟組織學(xué)上觀察到,雞與鵪鶉均在第七天時(shí)心臟的構(gòu)造基本完成。而雜交禽在第七天時(shí)腔室分化不明顯,房室隔,室間隔還未形成,與親本雞、鵪鶉相比心臟發(fā)育遲緩,因此推測(cè),雜交禽胚胎心臟有可能發(fā)育過(guò)于遲緩或者畸形發(fā)育不能及時(shí)行使心臟的功能導(dǎo)致不能為其他器官的正常發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),因而導(dǎo)致雜交禽胚胎早期死亡。(3)Nkx2-5,TBX5,GATA4三個(gè)心臟發(fā)育相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子與下游基因NPPA的表達(dá)量,在雞與鵪鶉的胚胎心

6、臟發(fā)育中較為一致,但在雜交禽中TBX5,GATA4,NPPA的表達(dá)與親本相比出現(xiàn)異常,而Nkx2-5基因的表達(dá)與親本相比差異不顯著(P>0.05),GATA4基因在雜交禽的心臟發(fā)育過(guò)程中,從時(shí)間和表達(dá)量上發(fā)生紊亂,有可能導(dǎo)致胚胎心臟發(fā)育缺陷甚至導(dǎo)致死亡。GATA4基因的下游基因Nkx2-5的表達(dá)量并未受到大的影響,由此可見(jiàn),多種順式作用元件在不同的空間與時(shí)間調(diào)控著Nkx2-5基因的表達(dá),使其在胚胎發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮著復(fù)雜的作用。(4)在同一日齡內(nèi),雜交禽胚胎心臟的TBX-5基因表達(dá)量與雞、鵪鶉胚胎心臟的TBX-5基因表達(dá)量差異顯著(P<0.05)。這種遠(yuǎn)高于親本的表達(dá)量,

7、會(huì)引起心臟的發(fā)育畸形,進(jìn)而導(dǎo)致死亡。雜交禽NPPA基因與親本相比表達(dá)提前,且同一日齡內(nèi),雜交禽NPPA基因表達(dá)量與雞、鵪鶉NPPA基因表達(dá)量差異顯著。由此表明,雜交禽胚胎心臟NPPA基因表達(dá)從時(shí)間與量上的異??赡軐?dǎo)致早期胚胎死亡,而原因有可能是雜交禽NPPA基因錯(cuò)誤表達(dá),也有可能是其上游基因的錯(cuò)誤調(diào)控引起的。關(guān)鍵詞:雞;鵪鶉;雜交禽;心臟發(fā)育相關(guān)因子;實(shí)時(shí)熒光定量PCRIAbstractThereisacertaindegreeofincompatibilityinthedistanthybridizationofchickenandquail,le

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