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1、江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文玫瑰茄花色苷的純化、鑒定、藥理活性及穩(wěn)定性研究姓名:仰榴青申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):中藥學(xué)指導(dǎo)教師:張冰濤2012-06-07江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要玫瑰茄(上勱西c螂陽(yáng)6咖辦腦L.)屬于錦葵科木槿屬一年生草本植物或多年生灌木,素有“植物紅寶石”之稱。玫瑰茄富含多種人體所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),其花瓣中富含的花色苷,是一種優(yōu)質(zhì)的天然色素來源。但目前對(duì)于玫瑰茄花色苷的研究存在花色苷純度低、易吸潮、鑒定成分少和穩(wěn)定性差等不足。為此,本文采用酸性甲醇提取花色苷,對(duì)其進(jìn)行分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定,并研究其
2、藥理活性和穩(wěn)定性,為玫瑰茄花色苷的研究與應(yīng)用提供基礎(chǔ)。全文分為四個(gè)部分,主要研究?jī)?nèi)容如下:第一部分玫瑰茄的成分分析對(duì)玫瑰茄干花萼中的成分進(jìn)行分析測(cè)定。結(jié)果表明,玫瑰茄干花萼中水分占8.99%,灰分4.48%,粗蛋白15.47%,粗脂肪2.62%。玫瑰茄花萼油脂中含17種脂肪酸,主要脂肪酸組成為肉豆蔻酸、棕櫚油酸、棕櫚酸、亞油酸、油酸、硬脂酸、(10E)一10一十九烯酸和花生酸,占總油脂含量的98.59%,其中不飽和脂肪酸達(dá)71.40%。玫瑰茄花萼中含Ca、K、Mg、Na、Zn、Fe、Mn、Cu等常微
3、量元素,其中Ca含量最高,為917.62m∥100g。玫瑰茄干花萼中多酚、花色苷、黃酮和總糖含量分別為為752.27mgGAC/100g、8.45m∥100g、30.51mgRu/100g和9298.85mgGl叫100g。玫瑰茄富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),具有很好的研究和應(yīng)用價(jià)值。第二部分玫瑰茄花色苷的分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定采用C18Sep.Pak柱對(duì)玫瑰茄花色苷粗提物進(jìn)行純化得到花色苷富集物。采用S印hadexLH.20對(duì)花色苷富集物進(jìn)行純化得到兩個(gè)組分(組分1和組分2),應(yīng)用HPLC.ESI.MS/MS技術(shù)
4、對(duì)該兩個(gè)組分進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明,組分1中主要含有飛燕草色素.3.O.接骨木二糖苷、矢車菊色素一3.O一接骨木二糖苷,此外還含有芍藥色素.3.O.接骨木二糖苷和少量飛燕草花色素衍生物;組分2中主要含有飛燕草色素.3.o.葡萄糖苷,此外還含有矢車菊色素.3.o.葡萄糖苷、芍藥色素.3.0.木糖鼠李糖苷、飛燕草色素衍生物和少量酚類物質(zhì)。首次在玫瑰茄中鑒定出芍藥色素一3一O一接骨木二糖苷、飛燕草色素.3.O.葡萄糖苷和芍藥色素.3.O.木糖鼠李糖苷。T玫瑰茄花色苷的純化、鑒定、藥理活性及穩(wěn)定性研究第三部分玫
5、瑰茄花色苷的藥理活性研究以清除DPPH自由基和ABTS自由基兩種方法研究純化后玫瑰茄花色苷提取物的抗氧化活性。以MTT法研究純化后玫瑰茄花色苷提取物對(duì)HeLa細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明,花色苷富集物、組分l和組分2有強(qiáng)抗氧化活性,抗氧化活性強(qiáng)弱順序?yàn)椋航M分1>組分2>花色苷富集物,其中組分l的抗氧化活性略低于Vc。花色苷富集物、組分1和組分2對(duì)HeLa細(xì)胞生長(zhǎng)都具有劑量依賴性的抑制能力,抑制能力強(qiáng)弱依次為:組分1>組分2>花色苷富集物,其半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為120.47p咖L、139.49p
6、g/mL和310.57pg/mL,該研究未見文獻(xiàn)報(bào)道。第四部分玫瑰茄花色苷p.環(huán)糊精包合物的穩(wěn)定性研究采用飽和水溶液法對(duì)玫瑰茄花色苷富集物進(jìn)行p.CD包合,以吸光度和UV.Vis光譜為指標(biāo),比較花色苷富集物與花色苷包合物對(duì)光照、溫度、金屬離子和pH的穩(wěn)定性。結(jié)果表明,與未包合的花色苷富集物相比,花色苷包合物對(duì)光和熱的穩(wěn)定性增強(qiáng)??梢娒倒迩鸦ㄉ湛梢酝ㄟ^飽和水溶液法與p.CD包合來提高其對(duì)光和熱的穩(wěn)定性。關(guān)鍵詞:玫瑰茄,花色苷,純化,鑒定,HPLC.ESI.MS/MS,藥理活性,穩(wěn)定·I生Il江蘇大學(xué)
7、碩士學(xué)位論文ABSTRACT舶西c淞s動(dòng)加a弦L.is趾鋤mlalsIlrubWIlichbelongst0malvace∞‰ily,considered嬲‘‘plantsmby,’.Itisrichi11刪trientsubstancewmchisiIIlp0咖t矗)rhumallbody.111epetaloftllerosellecontaillsplent)rof雅吐10cy鋤ins,wlliChis強(qiáng)exceIlentresourCeofnaturalpigments.Ho、vever,i
8、tisapi夠tllatt11ereare110tmanyresearchesonp謝fication,identificationaIlds切bili鑼improv堍of翩6括c淞陽(yáng)6咖驍碭L.a(chǎn)Iltllocyallins(HAs).Hence,t11eailIlofmepresentstudywaSt0investigatemep嘶6cationandS缸u(yù)cturalide塒ficationofHAswllichisex訛cted麗Ⅱ1acidicInetll