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《哈茨木霉h-13形態(tài)及生理特征的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類(lèi)號(hào)：Q：塑密級(jí)：醬適單位代碼：一!Q3盟——學(xué)號(hào)：S絲QZ!Q!1225名微雇業(yè)大學(xué)學(xué)位論文哈茨木霉H．13形態(tài)及生理特征的研究StudyonMorphologyandPhysiologicaICharacteristicsofTrichodermaharziahumH一13研究生：韭友維指導(dǎo)教師：鎣童科教援合作指導(dǎo)教師：申請(qǐng)學(xué)位門(mén)類(lèi)級(jí)別：理堂亟±專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)：一生物物理堂一一研究方向：生物塑型氈堂所在學(xué)院：生金型堂堂瞳答辯委員會(huì)主席：2007年6月摘要木霉菌是一種廣泛存在于土壤、植物根際和葉面的腐生型真菌，對(duì)多種植物病原真菌具有
2、拮抗作用。因而被當(dāng)作一種生防菌種進(jìn)行使用，并引起了眾多微生物學(xué)家和植物病害研究者的高度重視。本項(xiàng)研究采用對(duì)比研究法，與對(duì)照菌株相比，將試驗(yàn)菌株培養(yǎng)后，從菌落，菌絲體，細(xì)胞形態(tài)等宏觀層次闡明主要差異；從菌物對(duì)環(huán)境物質(zhì)吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)及利用，闡明對(duì)環(huán)境物質(zhì)選擇性吸收的可調(diào)控性；從對(duì)目的物合成種類(lèi)與星的分析，闡明相關(guān)酶基因表達(dá)能力與效果變化規(guī)律；為生產(chǎn)實(shí)踐提供技術(shù)參數(shù)。文中采用將試驗(yàn)菌株與原菌株分別點(diǎn)接在PDA培養(yǎng)基平板上，30℃下培養(yǎng)3天，肉眼觀察菌物呈圓斑狀，菌斑上的菌絲大部分呈白色，菌斑的局部有色素合成，呈現(xiàn)淡黃色。在液體培養(yǎng)基中，木霉
3、菌絲相互纏繞在～起，呈球狀，顯淡黃色。普通光學(xué)顯微鏡觀察表明，木霉菌絲縱橫交錯(cuò)，呈網(wǎng)絡(luò)狀。掃描電鏡觀察表明，對(duì)照菌株孢子基本呈圓形，表面粗糙，中間略有凹陷，試驗(yàn)菌株孢子表面光滑，棱角清晰，呈饅頭狀，有的甚至呈方形，中問(wèn)略有凹陷。通過(guò)對(duì)發(fā)酵液殘留糖含量的測(cè)定，試驗(yàn)菌株培養(yǎng)液中還原糖的濃度明顯低于對(duì)照菌株，說(shuō)明試驗(yàn)菌株對(duì)碳源的吸收利用速率明顯要高于對(duì)照菌株。在進(jìn)行產(chǎn)幾丁質(zhì)酶和纖維素酶的試驗(yàn)中，分別以膠態(tài)幾丁質(zhì)和羧甲基纖維素鈉作為相應(yīng)的產(chǎn)酶培養(yǎng)基中的唯一碳源，通過(guò)測(cè)定幾丁質(zhì)酶的酶活以及纖維索酶水解圈的大小，得出離子束誘變后，試驗(yàn)菌株的產(chǎn)
4、酶基因的表達(dá)比對(duì)照菌株有了較大的增強(qiáng)，試驗(yàn)菌株幾丁質(zhì)酶的酶活最高可達(dá)0．292U／ml，而對(duì)照菌株酶活只有0．228U／m1故產(chǎn)幾丁質(zhì)酶最佳培養(yǎng)基是在原培養(yǎng)基中添加1．O％的酵母粉：纖維素酶也是木霉抑菌的又一酶制劑，文中采用羧甲基纖維素鈉(CMC)作為唯一碳源的產(chǎn)纖維素酶培養(yǎng)基，以CMC水解圈的大小來(lái)衡量纖維素酶的酶活，則試驗(yàn)菌株的水解圈的直徑偏高于對(duì)照菌株。通過(guò)上述試驗(yàn)表明，離子束對(duì)木霉的生物學(xué)特性改造產(chǎn)生積極影響，經(jīng)20代轉(zhuǎn)接，木霉的遺傳穩(wěn)定性未見(jiàn)明顯衰退，提高了木霉對(duì)環(huán)境物質(zhì)吸收轉(zhuǎn)化利用的選擇性；發(fā)現(xiàn)幾丁質(zhì)酶、纖維素酶量與活
5、性均有定向提高。一總結(jié)上述，，離子柬誘變?cè)谏谰昴久沟母牧忌掀鹬卮蟮淖饔?，改良后的菌株?duì)外界環(huán)境的適應(yīng)性比對(duì)照菌株提高，遺傳性狀較對(duì)照菌株穩(wěn)定，試驗(yàn)菌株對(duì)酸堿、高溫及滲透壓的耐受性增強(qiáng)，所有這些特點(diǎn)表明改造后的菌株更適合用作生防菌株。關(guān)鍵詞：木霉，幾丁質(zhì)酶，纖維素酶，試驗(yàn)菌株，對(duì)照菌株AbstractTfichodermawhichexistsinthesoil．plantrootzoneandleafsurfacewidespreadisatypicalrotfungianditisartantagonisticbacter
6、iumofAgaricusspa：．So婦1,wndistresspathogensTrichodermausedasbiocontrofactorsandattractsmuchattentionofmanymierobiologistsand1eaiTlersonplantdiseases．Contrastingmethodwasmadeuseofinthisexperiment．Afterculturingthemutantstrain。maindifferenceswereconcludedbycolony，mycelia
7、andeellmorphologyincontrasttothewildstrain．Fromtheassimilation，transportationandutilizationofnutrientsmadebythemutantstrain，theresultWasconcludedthattheassimilationfornutrientWascontrollabIe．Fromthekindsandquantityoftargetproducts，aconclusionwasconcludedthatexpression
8、ofsomeenzymegeneswasenhanced．Inthistest．inoculatedthemutantstrainandthewildstrainonthePDAmediumplaterespectively．culturingun
