rna干擾技術(shù)沉默inos基因?qū)m頸癌細(xì)胞株增殖活性及vegf表達(dá)影響 (1)

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1、大學(xué)萬方數(shù)據(jù)博士學(xué)位論文學(xué)校代碼：10246學(xué)號(hào)：09111250009RNA干擾技術(shù)沉默iNOS基因?qū)m頸癌細(xì)胞株增殖活性及VEGF表達(dá)的影響TheeffectsofsilencingiNOSgeneonproliferationandVEGFexpressionincervicalcancercelllinesviaRNAinterference院系：婦產(chǎn)科醫(yī)院專姓業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)名：董晶指導(dǎo)教師：孫紅教授完成Et期：2012年3月回一萬方數(shù)據(jù)目錄中文摘要???????????????????????????????????1英文摘要??????

2、?????????????????????????????4前言??????????????????????????????????????????????”7日U舌??????????’????????????????????????????????????’，參考文獻(xiàn)???????????????????????????????????12第一部分iNOS基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建及感染宮頸癌SiHa和HeLa細(xì)胞株?16材料和方法??????????????????????????????????16結(jié)果?????????????????

3、????????????????????????·31討論?????????????????????????????????????·35結(jié)論?????????????????????????????????????????·40參考文獻(xiàn)???????????????????????????????????4l第二部分iNOS—shRNA對(duì)宮頸癌SiHa和HeLa細(xì)胞株生長(zhǎng)影響的體外研究??44材料和方法?????????????????????????????????44結(jié)果???????????????????????????????????

4、???????49討論??????????????????????????????????????????????一64結(jié)論????????????????????????????????????????68參考文獻(xiàn)???????????????????????????????????69第三部分iNOS—shRNA對(duì)宮頸癌SiHa和HeLa細(xì)胞株生長(zhǎng)影響的體內(nèi)研究?73材料和方法??????????????????????????????????73結(jié)果?????????????????????????????????????·77討{侖???

5、???????????????????????????????????????????一80結(jié){侖??????????????????????????????????????????????83參考文獻(xiàn)??????????????????????????????????·84全文總絡(luò)??????????????????????????????????85主要縮略詞表????????????????????????????????86致謝?????????????????????????????????????87發(fā)表論文情況???????????

6、?????????????????????88綜述?????????????????????????????????????89萬方數(shù)據(jù)RNA干擾技術(shù)沉默iNOS基因?qū)m頸癌細(xì)胞株增殖活性及VEGF表達(dá)的影響中文摘要宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，其發(fā)病率逐年上升、發(fā)病年齡呈年輕化的趨勢(shì)。晚期或復(fù)發(fā)性宮頸癌的預(yù)后很差，其臨床治療多采用手術(shù)、化療或放療等綜合性治療，雖然能夠取得一定的臨床療效，但由于病灶容易轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，最終的治療效果仍不理想，且伴有嚴(yán)重的不良反應(yīng)。因此，尋找新的治療方法勢(shì)在必行。新生血管是腫瘤賴以生長(zhǎng)的基礎(chǔ)。腫瘤組織必須依賴血管提

7、供營(yíng)養(yǎng)，才能維持其生長(zhǎng)，并實(shí)現(xiàn)瘤灶的血行性播散。一氧化氮(nitricoxide，NO)是促進(jìn)腫瘤血管形成的細(xì)胞因子，iNOS作為NO合成的關(guān)鍵酶，在多種惡性腫瘤中呈高表達(dá)，催化合成大量的NO，促進(jìn)腫瘤血管的形成，影響腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。既往的研究均表明iNOS的表達(dá)與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。同樣，在宮頸癌組織中，iNOS的高表達(dá)與惡性程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相關(guān)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)VEGF是已知的、腫瘤新生血管形成最重要、作用最強(qiáng)的細(xì)胞因子，iNOS通過NO介導(dǎo)，在誘導(dǎo)VEGF

8、促內(nèi)皮細(xì)胞遷移和血管生成過程中發(fā)揮作用。RNA干擾(RNAinterfcrence，RNAi)是一種新近發(fā)展起來的基因沉默技術(shù)，由雙鏈R