利用基因槍轉化技術創(chuàng)造抗病大豆新材料

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1、————F了一一摘罩邑????????????????????????????????????????????????????I英文摘要?????????????????????????????????????II1前言?????????????????????????????????????11.1研究目的及意義???????????????????????????????.11.2文獻綜述??????????????????????????????????..11.2.1作物抗病育種現(xiàn)狀??????

2、???????????????????????.11.2.2植物抗病基因工程的研究進展????????????????????????21.2.3轉基因大豆研究進展????????????????????????????81.2.4大豆遺傳轉化方法?????????????????????????????91.2.5再生系統(tǒng)????????????????????????????????。122材料與方法??????????????????????????????????..132.1材料???????

3、?????????????????????????????????????????132.1.1菌株與質粒???????????????????????????????。132.1.2受體材料????????????????????????????????..132.1.3生化試劑????????????????????????????????..132.1.4培養(yǎng)基??????????????????????????????????142.1.5儀器??????????????????????????

4、????????????????????。l42.2試驗方法??????????????????????????????????152.2.1植物表達載體pDT-hrpZ構建????????????????????????152.2.2大豆再生體系的建立????????????????????????????172.2.3用基因槍法轉化大豆體細胞胚???????????????????????.182.2.4抗性植株分子生物學檢測?????????????????????????.203結果與分析???

5、???????????????????????????????.253.1pDT-hrpZ表達載體的構建??????????????????????????253.2大豆再生體系的建立?????????????????????????????263.2.1不同基因型對大豆體細胞胚誘導的影響???????????????????263.2.2優(yōu)異基因型品種胚胎發(fā)生的特點??????????????????????。273.3基因槍介導的遺傳轉化????????????????????????????283

6、.4轉基因植株分子生物學檢測??????????????????????????293.4.1To代轉基因植株的PCR檢測????????????????????????293.4.2轉基因大豆及對照總RNA的提取?????????????????????..3l3.4.3To代轉基因植株hrpZ表達量的real.timePCR檢測??????????????.3l4討{侖?????????????????????????????????????????????????..34東北農業(yè)大學理學碩士學位論

7、文4.1大豆未成熟子葉體細胞胚誘導的主要影響因素?????????????????一344.2基因槍轟擊大豆體細胞胚的影響因素??????????????????????354.3標記基因選擇????????????????????????????????354.4液體篩選優(yōu)點????????????????????????????????.354.5下一步工作展望???????????????????????????????355結論??????????????????????????????????

8、???????????????。365.1構建了含hrpZ基因植物表達載體???????????????????????365.2篩選出體細胞胚分化率較高的基因型大豆???????????????????.365.3獲得了轉HrpZ基因大豆植株?????????????????????????36致謝??????????????????????????????????????????????????.38參考文獻??????????????

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