資源描述：
《中藥肝復(fù)康對(duì)肝纖維化時(shí)rho通路干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、中藥肝復(fù)康對(duì)肝纖維化時(shí)RHO通路干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究計(jì)：學(xué)位論文：37頁表格：4個(gè)插圖：6幅唐尹超指導(dǎo)教師：賈玉杰教授申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士學(xué)位專業(yè)名稱：病理學(xué)勘瓤剿羽學(xué)論文提交日期：2012年4月論文答辯日期：2012年5月學(xué)位授予單位：大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)位授予日期：2012年6月評(píng)閱人：答辯委員會(huì)主席：獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得大連醫(yī)科大學(xué)或其他教育
2、機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：絲年土月翌日目錄一、摘要??????????????????????????1(一)中文摘要????????????????????_?l(二)英文摘要??????????????????????3二、正文??????????????????????????6／＼—1L—j一(一)MJJ百”??一?”????．．?”?．．“??一??···．．·?·····?6(二
3、)材料和方法?????????????????????7(三)結(jié)果???????????????????????12(四)討論???????????????????????18(五)結(jié)論???????????????????????23(六)參考文獻(xiàn)?????????????????????24三、文獻(xiàn)綜述???????????????????????27(一)綜述??????????????????????27(二)參考文獻(xiàn)?????????????????????33四、附錄???????????
4、??????????????36五、致謝?????????????????????????37中藥肝復(fù)康對(duì)肝纖維化時(shí)RHO通路干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究碩士生姓名：唐尹超指導(dǎo)教師：賈玉杰教授專業(yè)名稱：病理學(xué)與病理生理學(xué)摘要目的：肝纖維化是肝臟受損后機(jī)體可逆的傷121愈合反應(yīng)階段，以ECM(extracellularmatrix)沉積為特點(diǎn)。如果不及時(shí)治療，將會(huì)導(dǎo)致肝硬化的形成。所以抗肝纖維化治療具有非常重要意義，但是目前對(duì)肝纖維化的機(jī)制尚不明確。RHO信號(hào)通路主要是調(diào)節(jié)細(xì)胞收縮，遷移，增殖，形態(tài)以及基因的表達(dá)。這
5、個(gè)信號(hào)通路與很多疾病密切相關(guān)，如血管痙攣，腎纖維化，神經(jīng)損傷，肺動(dòng)脈高壓等。所以RttO信號(hào)通路具有潛在的臨床治療價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)的目的是為了研究肝復(fù)康對(duì)肝纖維化時(shí)RHO信號(hào)通路干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究。方法：整體實(shí)驗(yàn)：健康的SD大鼠隨機(jī)被分為正常組，肝纖維化模型組及三組藥物治療組。正常組予皮下注射生理鹽水(0．5ml／kg)，其余各組予等體積橄欖油稀釋的10％CCl4皮下注射，每周兩次，共12周。三組康復(fù)康中藥處理組分別為：高劑量組(3125mg／kg／day)，，中劑量組(312．5mg／kg／day)及低劑量
6、組(31．25mg／kg／day)。在第九周開始給大鼠予肝復(fù)康高、中、低劑量治療。正常組與模型組在12周末處死并迅速取出肝組織，中藥治療組于第20周處死并取出肝組織，立即儲(chǔ)存于．700C冰箱中。HE染色法觀察肝組織病理結(jié)構(gòu)的變化，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT．PCR)檢測(cè)組織中RHOA，ROCKI，F(xiàn)AK，vinculin的mRNA水平的表達(dá)，免疫組織化學(xué)和免疫蛋白印記法(werstemblot)檢測(cè)組織中ROCKI蛋白水平的表達(dá)。離體實(shí)驗(yàn)：HSC．T6細(xì)胞培養(yǎng)在加入了10％胎牛血清，100U／ml青霉
7、素G及100U／ml鏈霉素的DEMN培養(yǎng)基中，并置于孵育箱中培養(yǎng)(370C，5％C02及95％02)。每?jī)商鞊Q液一次。細(xì)胞傳代后，實(shí)驗(yàn)在呈指數(shù)生長(zhǎng)的細(xì)胞中進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為三組：正常對(duì)照組(DEMN培養(yǎng)液+10％正常大鼠血清+HSC細(xì)胞)，模型組(DEMN培養(yǎng)液+終濃度200umol／L乙醛+l0％正常大鼠血清+HSC細(xì)胞)，肝復(fù)康治療組(DEMN培養(yǎng)液+終濃度200umol／L乙醛+10％肝復(fù)康中劑量組大鼠血清+HSC細(xì)胞)。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT．PCR)法檢測(cè)細(xì)胞中RHOA，ROCKI，F(xiàn)A
8、K，vinculin的mRNA水平的表達(dá)，免疫蛋白印記法(wersternblot)檢測(cè)細(xì)胞中ROCKI在蛋白水平的表達(dá)。結(jié)果：(1)肝復(fù)康對(duì)大鼠肝組織中RHO信號(hào)通路相關(guān)因子表達(dá)的影響：HE染色觀察到正常肝組織肝小葉結(jié)構(gòu)完整，肝索呈放射狀排列，肝細(xì)胞形態(tài)正常，無脂肪空泡。模型組可見假小葉生成，正常肝小葉被破壞，多數(shù)肝細(xì)胞出現(xiàn)脂肪變，大量炎癥細(xì)胞浸潤。中藥治療組肝組織纖維化表現(xiàn)不同程度的改善，以中劑量組最為明顯。RT．PCR結(jié)果顯示，在肝組織巾RttO通
