肝復(fù)康及xav939對非經(jīng)典wntrhoarock信號通路的影響

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1、大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中圖分類號密級肝復(fù)康及XAV939對非經(jīng)典Wnt／ImoAROCK信號通路的影響王月計：學(xué)位論文：4l頁表格：2個插圖：7幅指導(dǎo)教師：賈玉杰教授申請學(xué)位級別：碩士學(xué)位學(xué)科(專業(yè))：病理學(xué)與病理生理學(xué)培養(yǎng)單位：大連醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院完成時間：二。一四年五月答辯委員會主席：大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在指導(dǎo)教師指導(dǎo)下進行的研究工作及所取得的研究成果。除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得大連醫(yī)科大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研

2、究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：——年——月——日大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)大連醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于(請在以下相應(yīng)方框內(nèi)打“4”)：1．保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。2．不保密口。作者簽名：導(dǎo)師簽名：日期：年月日日期：年月日大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目

3、錄一、摘要??????????????????????????1(一)中文摘要???????????????????????1(二)英文摘要???????????????????????3二、正文??????????????????????????6／＼—tL—j一(一)Ilt．1舌?????????????????????6(二)材料和方法??????????????????8(三)結(jié)果?????????????????????15(四)討論?????????????????????22(五)結(jié)論?????????????????????27(六)參考文獻????????????

4、???????28三、文獻綜述?????????????????????32(一)綜述正文???????????????????33(二)參考文獻???????????????????39四、致謝??????????????????????41大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文肝復(fù)康及XAV939對非經(jīng)典W蛐洲ROCK信號通路的影響碩士生姓名：王月指導(dǎo)教師：賈玉杰教授專業(yè)名稱：病理學(xué)與病理生理學(xué)摘要目的：肝纖維化被認為是大部分肝臟慢性病變發(fā)展過程中必經(jīng)的過程，并可進一步發(fā)展到肝硬化以至于肝癌。肝癌是我國高發(fā)的癌癥之一，所以我國醫(yī)學(xué)臨床一直大力致力于肝癌的控制與干預(yù)?，F(xiàn)今醫(yī)學(xué)界普遍認為肝纖維化

5、發(fā)展到肝硬化直到肝癌這一系列發(fā)展過程中纖維化到肝硬化是作為病變是否可逆的關(guān)鍵節(jié)點，即纖維化可逆而肝硬化不可逆。所以肝纖維化的干預(yù)與治療在控制與預(yù)防肝硬化方面又有著重要作用。肝纖維化發(fā)展的核心是肝星狀細胞的活化，大量研究證實Wnt信號傳導(dǎo)通路參與肝纖維化的發(fā)展，根據(jù)不同的Wnt蛋白是否產(chǎn)生內(nèi)源性t3．catenin積累信號參與分為經(jīng)典與非經(jīng)典通路。其中Wnt經(jīng)典通路(Wnt／t3．catenin信號通路)多年來已有大量研究，而非經(jīng)典Wnt信號通路中包含三條通路相對復(fù)雜且研究尚少。其中RhoA／ROCK信號通路參與多種疾病的發(fā)生，細胞的收縮、遷移、增殖、凋亡及基因的表達都有參與。小分子

6、物質(zhì)XAV939用于Wnt經(jīng)典通路的干預(yù)已有研究證實其作用。但應(yīng)用于肝細胞的研究還尚少。本此實驗設(shè)計是把中藥肝復(fù)康和小分子抑制劑XAV939干預(yù)肝星狀細胞HSC．T6株，檢測他們對致肝纖維化核心指標及非經(jīng)典Wnt／RhoA／ROCK信號通路的影響與作用。來進一步研究探索經(jīng)典Wnt信號通路與非經(jīng)典Wnt信號通路間是否存在著相互聯(lián)系。方法：用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)HSC．T6細胞，其中含有胎牛血清t0％，放于溫度為37。C，C02含量為5％孵箱中，進行傳代培養(yǎng)。等到細胞成對數(shù)增長時，用不含胎牛血清的DMEM，進行進行饑餓培養(yǎng)一天。細胞于六孔板中隨機分為：正常血清組(含10％正常大鼠血清的D

7、MEM培養(yǎng)基)；XAV939lumol／L組(DMEM培養(yǎng)基中含10％正常大鼠血清并加入XAV9391umol／L)；XAV9392umol／L(DMEM培養(yǎng)基中含10％正常大鼠血清并加入XAV9392umol／L)；肝復(fù)康治療組(含10％肝復(fù)康治療組大鼠血清的DMEM培養(yǎng)基)。將1大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文六孔板放于孵箱中，溫度為37。C，C02含量為5％，培養(yǎng)兩天。逆轉(zhuǎn)錄．聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscriptasepolymerasechainreact