天然牛黃與酶促牛黃中膽酸類成分的血清藥物化學(xué)研究

天然牛黃與酶促牛黃中膽酸類成分的血清藥物化學(xué)研究

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時(shí)間:2019-03-01

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1、目錄中文摘要?????????????????????????????????·1英文摘要?????????????????????????????????·5符號(hào)說明????????????????????????????????·1o第一部分膽酸類成分血藥濃度測(cè)定方法的建立???????????11前言??????????????????????????????????11日盯舌??????????????????????????????????11材料????????v?????????????????????????·12方法?????????????????

2、?????????????????14結(jié)果??????????????????????????????????17討論??????????????????????????????????26小結(jié)??????????????????????????????????29第二部分天然牛黃與酶促牛黃膽酸類成分的血清中移行成分????30前言??????????????????????????????????30日巧百??????????????”??”?””??????????????‘3U材料??????????????????????????????????31方法???

3、???????????????????????????????32結(jié)果??????????????????????????????????34{寸論??????????????????????????????????38小結(jié)?????????????????????????一????????42結(jié)1竺三o.oolooooo.ou,oIooooooolo.o·o.10·ooeooolo·ollBoIooolo···o···oo+㈣。??·zI:;材料?????????????????????二二:!。??.44方法????????????????????????????

4、?????。45結(jié)果??????????????????????????????????47討論??????????????????????????????????55小結(jié)??????????????????????????????????56參考文獻(xiàn)????????????????????????????.58綜述????????????????????????????????????..62致謝????????????????????????????????????..70論文原創(chuàng)性聲明????????????????????????????.·7l天然牛黃與酶促

5、牛黃中膽酸類成分的血清藥物化學(xué)研究研究生:韓衍銀專業(yè):藥理學(xué)導(dǎo)師:齊永秀教授中文摘要第一部分膽酸類成分血藥濃度測(cè)定方法的建立目的建立大鼠血清中膽酸類的HPLC—ELSD分析測(cè)定方法,為兩種牛黃血清藥物化學(xué)及藥代動(dòng)力學(xué)研究提供依據(jù)。方法(1)色譜柱:AgelaVenusilMPCls(4.6mmx250mm,5pIn)色譜柱,0.2%甲酸水和乙腈為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,流速為1.0ml·rain-1;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD);柱溫87.5"C,氮?dú)饬魉?.0L·m.m-1,ImpactOFF進(jìn)行檢測(cè)。(2)血清樣品處理的方法:取血清100p1,加入甲醇900l_tl,

6、渦旋混勻,12000rpm離心5min;取上清液,0.221J.m微孔濾膜過濾;取濾液900pI,37"C水浴氮?dú)獯蹈?,固體殘留物于一20。C低溫冷凍保存,測(cè)定前取出備用。固體殘留物用100p1流動(dòng)相溶解,渦旋混勻,12000rpm離心5min,取201.d進(jìn)樣分析。結(jié)果該分析方法的檢測(cè)限為llag·ml~,定量限為51.tg·Inrl。重復(fù)性和穩(wěn)定性考察RSD%值均小于3.91;提取回收率的RSD%值小于3.67。符合生物樣品分析方法的限度要求。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)建立了測(cè)定大鼠血清中膽酸類含量的HPLC—ELSD法,該方法專屬性強(qiáng),樣品處理方法簡單、快捷,為藥代動(dòng)力學(xué)及血清

7、藥物化學(xué)的研究提供了檢測(cè)技術(shù)。第二部分天然牛黃與酶促牛黃膽酸類成分的血清中移行成分目的對(duì)灌胃給藥天然牛黃與酶促牛黃的大鼠血清進(jìn)行HPLC.ELSD、HPLC—MS分析,確認(rèn)二者的入血成分和血中移行成分,從藥效物質(zhì)基礎(chǔ)方面論證酶促牛黃替代天然牛黃的可行性。方法(1)色譜柱:AgelaVenusilMPC18(4.6mmx250mm,50aaa)柱;流動(dòng)相:乙腈(A),0.2%甲酸水(B),梯度洗脫,0min為30%A、70%B,15min為55%A、45%B,30min90%A、10%B;流速:1.0ml·miD-1;柱溫:25"C;檢測(cè)器:蒸發(fā)光散射

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