核盤菌菌株snz1-3-5中攜帶病毒的初步研究

核盤菌菌株snz1-3-5中攜帶病毒的初步研究

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1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文核盤菌菌株SNZ1--3--5中攜帶病毒的初步研究姓名:李艷申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):植物病理學(xué)指導(dǎo)教師:姜道宏201206核盤菌菌株SNZI.3.5中攜帶病毒的初步研究摘要真菌病毒在真菌群體中分布廣泛,篩選和鑒定新的真菌病毒可以為研究真菌病毒的分子進化、生態(tài)及與其寄主互作提供豐富生物材料。本論文主要以從陜西省漢中市南鄭縣油菜病殘體的菌核上分離獲得的菌株SNZl.3.5為研究材料,對該菌株的生物學(xué)特性及其所含真菌病毒進行了初步分析。研究結(jié)果如下所述:以不攜帶真菌病毒的菌株Ep一1PNA367作對照,發(fā)現(xiàn)菌株SNZl.3.5的生長速率減緩,產(chǎn)草酸能力下降,而菌

2、落形態(tài)無明顯變化。對油菜葉片的致病力測定表明,菌株Ep.1NPA367在接種接種24h可在葉片產(chǎn)生病斑,48h病斑平均直徑為3.2cm;而菌株SNZl.3.5在接種24h葉片上未見病斑形成,48h時病斑平均直徑為1.5cm。因此,菌株SNZl.3.5是一株弱毒菌株。檢測發(fā)現(xiàn)菌株SNZl.3.5至少含有2條dsRNA片段,大小分別約為9.0kb和5.0kb,分別命名為SL—dsRNA和SS—dsRNA。經(jīng)過eDNA克隆和生物信息學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)SL—dsRNA的已知序列與核盤菌真菌病毒SsHWSZ一150基因組同源性達到97%與核盤菌弱病毒1(Scleritiniasclerotior

3、umhypovirus1,SLHVl/SZ.150)屬于同一病毒種的不同株系,命名為SsHVl/SNZl—3—5。SS—dsRNA的已知序列與隸屬于全病毒科的盾殼霉RNA病毒(ConiothyriumminitansRNAvirus,CmRV)基因組對應(yīng)序列同源性達到55%,命名為核盤菌全病毒1(SclerotiniasclerotiorumTotivirus1/SNZl.3.5,SsTV.1/sNZl.3—5)。分析菌株SNZl.3—5原生質(zhì)體再生菌株,篩選獲得了一株僅含有SsTV-1,而不含SsHVl的再生菌株SNZlR20。生物學(xué)特性分析,發(fā)現(xiàn)菌株SNZlR20菌落形態(tài)與出

4、發(fā)菌株有顯著差異,如氣生菌絲多,菌絲頂端卷曲等;致病力測定顯示菌株SNZlR20對油菜葉片完全失去致病力。關(guān)鍵詞:核盤菌;真菌病毒;弱病毒;全病毒;弱毒現(xiàn)象華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2012屬碩二{二學(xué)位論文AbstractMycoviruses(orfungalviruses)arewidelyspreadinthefungalkingdom.Thediscoveryandcharacterizationofmorenovelmyeovirusesmightsupplyabundantviralmaterialtoresearchtheorigin,ecologyandevolutionar

5、ypathwaysofmycoviruses.Inpresentstudy,thebiologicalcharacterizationoftwomycovirusesandtheirhostSclerofiniasclerotiorumstrainSNZl—3—5,isolatedfromadiseasedrapeseedplantatShanxiprovince.wereanalyzed.Theresultsofpresentstudyaregivenbelow:ComparedwiththecontrolstrainwithoutcarryingthefungalvirusE

6、p一1PNA367。wefoundthatthegrowthrateandtheproductionofoxalicacidcapacityofthestrainsSNZl—3-5significantlydecreased.whilecolonymorphologyofSNZl一3-5wassimilartothatofstrainEp一1PNA367.VirulencetestonthedetachedleavesofrapeseedrevealedthatstrainEp-·1PNA367couldcausetypicaldiseasedlesionsat24hourspo

7、st-inoculation(hpi)anddevelopdiseasedlesions謝th3.2cmindiameterat48hpi,whereasstrainSNZl—3-5couldnotcausediseasedlesionat24hpianddevelopdiseasedlesionswith1.5cmindiameterat48hpi.Therefore,strainSNZl~35isahypovirulentstrainofS.sclerotiorum.Weal

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