資源描述：
《樺褐孔菌多糖的提取、純化及其抗腫瘤活性研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、樺褐孔菌多糖的提取、純化及其抗腫瘤活性研究StudyontheExtraction，PurificationandAnti-tumorActivityofPoly’saccharideFromInonotusobliqUUS學(xué)位論文完成日期：指導(dǎo)教師簽字：答辯委員會(huì)成員簽字：青島科技大學(xué)研究生學(xué)位論文樺褐孑L菌多糖的提取、純化及其抗腫瘤活性研究摘要隨著人們工作壓力的增大，腫瘤患者越來(lái)越多，且具有了年輕化的趨勢(shì)，癌癥已成為危害人類(lèi)健康的第二殺手，僅次子心腦血管疾病。目前治療惡性腫瘤仍以化療、放療、手術(shù)治療為主。臨床使用的抗腫瘤藥物都會(huì)有不同程度的毒副作用，
2、比如化療藥物在破壞腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，又破壞正常組織的細(xì)胞，使人體的免疫系統(tǒng)紊亂。從中藥，．尤其是植物資源中尋找療效好、毒副作用小的抗腫瘤活性成分，己成為國(guó)內(nèi)外抗腫瘤研究的熱門(mén)開(kāi)發(fā)領(lǐng)域。動(dòng)物和臨床試驗(yàn)表明：樺褐孔菌多糖沒(méi)有明顯毒副作用，并已被證明具有抗腫瘤的功效。本實(shí)驗(yàn)在研究提取、脫蛋白和脫色方法的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步對(duì)其單糖組成成分及其體外抗腫瘤活性進(jìn)行了研究。首先，對(duì)樺褐孔菌粗多糖成分進(jìn)行了提取，并通過(guò)正交試驗(yàn)確定了最佳提取工藝，其參數(shù)為：料液比1：40(W／V)、提取時(shí)間2．5h、提取溫度90。C，在優(yōu)化條件下進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，得出的多糖平均得率為1．82％，重
3、復(fù)性良好，多糖的純度達(dá)到21．1％。其次，進(jìn)行了粗多糖的脫蛋白質(zhì)和脫色實(shí)驗(yàn)。通過(guò)考察多糖保留率和蛋白脫除率，比較了Sevage法、三氯乙酸(TCA)法、三氯乙酸一正丁醇(TCA-NBA)法、鹽酸法、酶法輔助等方法的脫蛋白效果，結(jié)果酶法輔助三氯乙酸一正丁醇法的脫蛋白效果優(yōu)，蛋白脫除率達(dá)N82．3％，且多糖保留率較高，達(dá)到76．1％，經(jīng)脫蛋白的多糖純度提高N81．1％；采用活性炭粉末、過(guò)氧化氫、殼聚糖和聚酰胺層析柱對(duì)樺褐孔菌多糖進(jìn)行脫色，從脫色率和多糖保留率兩方面進(jìn)行考察，選擇了脫色效果優(yōu)的聚酰胺層析柱為適宜的脫色方法，其脫色率達(dá)至tJ89．3％，多糖保留率
4、為91．7％，經(jīng)脫色的多糖純度提高N85．8％。再次，對(duì)樺褐孔菌多糖中的單糖組成進(jìn)行了分析。本論文采用1一苯基一3一甲基一5-口比唑啉酮(PMP)柱前衍生化高效液相色譜新方法來(lái)分析樺褐孔菌多糖中的單糖組成。結(jié)果顯示，樺褐孔菌多糖主要含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖6種單糖。各單糖之問(wèn)摩爾比為：甘露糖：鼠李糖：葡萄糖：半乳糖：木糖：阿拉伯糖-2．13：1．36：7．01：2．98：1：1．78。在樺褐孔菌多糖的PMP衍生化色譜圖中發(fā)現(xiàn)了未知峰，經(jīng)HPLC-MS分析未知物的m／z為164。采用樺褐孔菌多糖的提取、純化及其抗腫瘤活性研究在水解
5、樣品中加入一定量巖藻糖對(duì)照品的方法進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證，結(jié)果顯示，加入一定量巖藻糖的樣品組在未知成分的相應(yīng)保留時(shí)間位置的峰信號(hào)明顯增加，由此推斷未知成分是巖藻糖。最后，采用MTT法研究了樺褐孔菌多糖對(duì)人宮頸癌細(xì)胞(Hela)、小鼠骨髓瘤細(xì)胞(SP2)、入張氏肝細(xì)胞(Chang)增殖的抑制作用。樺褐孔菌多糖濃度在10～1000gg／mL的范圍內(nèi)，對(duì)Hela、SP2、Chang細(xì)胞的增殖均有明顯的抑制作用，生長(zhǎng)抑制率分別從4．78％至1]46．54％、2．89％至tJ44．90％、3．56％到22．56％，并呈濃度依賴(lài)性關(guān)系，各濃度問(wèn)的生長(zhǎng)抑制率存在顯著性差異①
6、7、rtrend．Nowcancerhasbecomethesecondkillerthathazardtohumanhealthaftercardiovasculardisease．Currenttreatmentofmalignanttumorsisstillgivenprioritytowithchemotherapy,radiotherapy,surgical．Anticancerdrugsinclinicalallhavedifferentdegreesofsideeffects，suchaschemotherapydrugscankilltumo
8、rcells，anddestroythenormaltissuecells，un
