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1、條斑紫菜多糖的提取純化及其體外抗腫瘤活性研究摘要本文優(yōu)化了超聲波或微波輔助同時(shí)提取條斑紫菜(尸口rP妙rayezoensis夕多糖和藻紅蛋白的工藝,采用三氛乙酸和藻膽蛋白變性溫度結(jié)合的方法去除蛋白,并用膜分離技術(shù)對多糖進(jìn)行初步分離,根據(jù)帶電性質(zhì)和分子量采用DEAEC一52和SePhadexG一100純化出三種不同的多糖組分PYPSlla!PYPSla和PYPSZa,研究了這三種多糖的結(jié)構(gòu),單糖組成及PYPSlla和PYPSZa這兩個(gè)多糖組分的Invitro杭腫瘤活性.主要研究結(jié)果如下:1!本文首次明確提出超聲波
2、輔助同時(shí)提取條斑紫菜多糖和藻紅蛋白的最佳提取條件為:超聲6Omin,功率88OW,30e水浴4h,料液比1:50,多糖提取得率為34.03%,藻紅蛋白提取得率為1.20%,藻紅蛋白純度為0.356"2!本文首次明確提出微波輔助同時(shí)提取條斑紫菜多糖和藻紅蛋白的最佳提取條件為:微波4min,功率巧OW,30e水浴sh,料液比l:40,多糖提取得率為16.94%,藻紅蛋白提取得率為0.417%,藻紅蛋白純度為0.255"與對照(30e水浴sh,料液比1:40,多糖提取得率為10.50%,藻紅蛋白提取得率為0.324%
3、,藻紅蛋白純度為0.215)相比,超聲波輔助提取多糖提取得率增加23.5%,微波輔助提取多糖提取得率增加6.4%"3!本文研究得出了三氛乙酸和藻膽蛋白變性溫度結(jié)合法去除蛋白的最佳條件為:三氯乙酸濃度2%,50e處理20min,蛋白清除率99.63%,多糖保存率90.49%,與傳統(tǒng)的三氛乙酸除蛋白法(三氯乙酸濃度3%放置lh,蛋白清除率為91.24%,多糖保存率為82.84%)相比,三氛乙酸和藻膽蛋白變性溫度結(jié)合法去除蛋白效果更好,蛋白清除率增加8.39%,多糖保存率增加7.65%"4!通過對超濾膜孔徑的篩選,確
4、定截留分子量分別為50kDa和3kDa的膜"采用DE規(guī)e一52和s叩hadexe一100對50kDa和3kDa兩個(gè)條斑紫菜多糖(P鉀S)組分進(jìn)行純化,得到三個(gè)單一多糖組分PYPSna!PYPSla和PYPSZao5!紫外光譜分析表明PYPSlla!PYPSla和PYPSZa不含核酸和蛋白質(zhì),是單一組分"紅外光譜解析表明PYPSlla!PYPsla和PYPSZa呈現(xiàn)出多糖的特征吸收峰,均為毗喃糖且含有硫酸基和3.6一內(nèi)醚橋"氣相色譜法分析表明PYPSla和PYPSZa均由L一鼠李糖!D一半乳糖及三種未知單糖組成,
5、半乳糖與鼠李糖的摩爾比分別為30:1和12.8:1;PYPSlla是由L一鼠李糖!D一半乳糖及四種未知單糖組成,半乳糖與鼠李糖的摩爾比為6.6:L6!PYPSlla和PYPSZa對人肝癌細(xì)胞A549的Invitro生長均有一定程度的抑制作用,并呈劑量依賴關(guān)系,在lm留mL時(shí)抑制率分別為43.1%和30.0%.關(guān)鍵詞:條斑紫菜;多糖;提取;分離純化;結(jié)構(gòu)分析;杭腫瘤活性EARCHONEXTRACTION,PURIFICAI,IONANDLV叮TROANTITUMORACTIVITYOFP01萬SACCHARIDE
6、SFROMPOR只甘月漢ABSTRACTTheultrasonie一assistedormierowave一assisteds擔(dān)ehronousextractionParametersofPolysaeeharideandPhyeoeryt斷nfromPorphyrayezoensiswereoPtimized.Triehloroaeetieaeid(TCA)eombinedwiththedenaturationteirlPeratureofphycobiliproteinwasusedtoremoveProt
7、einandmembraneseParationteclmologywasusedtoisolatethePolysaecharides.ThreedifferentP而fiedfractionsPYPSIla!PYPSlaandPYPSZawerefurhterobtainedbasedontheirdifferentehargeeharaeteristieandmolecularweightbyDEAEC一52andSephadexG一100ehromato9即hv,respeetivel丫Thebasie
8、s加cturesofthreemainfraetions,monosaceharideeompositionsandantltumoractivityofPYPS11aandPYPSZainvitrowerealsoinvestigatedinthePaPer.ThePrimaryresearehresultswereasfollows:1.hi面5PaPer,theoPtimumPa
